גישת Stereotaxic Cisterna Magna לאספקה טיפולית במודל עכבר

תקציר

מקור: Joshi, K., et al. גישה כירורגית סטריאוטקסית להזרקת מיקרו-גזע המוח הזנבי וחוט השדרה הצווארי העליון דרך ה-Cisterna Magna בעכברים. J. Vis. Exp. (2022)

סרטון זה מדגים את הגישה הסטריאוטקסית של ציסטרנה מגנה לאספקה ממוקדת לגזע המוח ולחוט השדרה העליון. על ידי גישה למאגר המים המלא בנוזל השדרה, גישה זו מאפשרת הזרקות מדויקות לאזורים שקשה להגיע אליהם בשיטות סטריאוטקסיות סטנדרטיות.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. פתיחת קרום בור המים

1. השתמש במלקחיים הזוויתיים של דומונט כדי לתפוס את הדורה, המשתרעת מהעצם העורפית לאטלס. תפוס את הדורה ליד העצם העורפית והשתמש במספריים הקפיציים כדי ליצור פתח קטן (~0.5 עד 1.5 מ"מ) בדורה.
   הערה: במיקום הרוסטרלי הזה, המרווח בין גזע המוח לדורה שמעליו הוא הרחב ביותר, ומספק מקום רב למניפולציה בטוחה של הדורה.
2. השתמש במספריים הקפיציים כדי להרים את הדורה ולפתוח את הדורה עוד יותר. גודל החלון תלוי במטרה.
   הערה: יהיה צורך בחלון גדול יותר בעת ביצוע זריקות אורך מרובות או זריקות דו-צדדיות; חלון קטן יספיק בעת ביצוע זריקות חד צדדיות או קו אמצע.
3. לאחר פתיחת הדורה יש לנקז עודפי נוזל מוחי עם קצה רמז סטרילי.

2. זיהוי ציוני דרך ונקודת אפס

1. מבט על פני השטח הגביים של גזע המוח עם ציוני דרך מפורטים דרך הדורה הפתוחה. ה-obex, הנקודה שבה התעלה המרכזית נפתחת לתוך חדר ה-IV, היא נקודת האפס הקדמית-אחורית והבינונית הסטנדרטית.

3. הזרקת המטרה

1. הורד את הפיפטה או המזרק למטרה באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית והזריק תמיסה כמו בגישות סטריאוטקסיות סטנדרטיות. השאירו במקום למשך 1-5 דקות לאחר ההזרקה כדי למנוע מעקב מחט בעת שימוש בנפחים בין 3-50 nL. לאחר מכן, הרם את הפיפטה או המזרק באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית.
2. חזור על שלב 3.1. עבור יעדים מרובים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מלקחיים זוויתיים, Dumont 5/45	FST	11251-35	רק כדי לתפוס
מספריים אביביים של דורה, Vannas 2.5 מ"מ עם קופסה נלווית	FST	15002-08	מספריים רק לפתיחת דורה, קופסה להעלאת הגוף
מיקרומניפולטור סטריאוטקטי	Kopf	1760-61	מחובר למחזיק האלקטרודה כדי להתאים את המיקום על סמך קואורדינטות
מכלול מסגרת 'U' סטריאוטקטית ולוחית בסיס תוך-תאית	Kopf	1730-B, 1711	מסגרת לניתוח
אפליקטורים סטריליים עם קצה כותנה	פוריטן	25-806 10WC	ספיגת דם משדה כירורגי