גירוי בתדר גבוה להגברת ההפעלה העצבית והנוירוגנזה בפיתול המשונן, העכבר

תקציר

מקור: Zhao, Z. et al. שיטה פולשנית להפעלת הבליטה המשוננת של העכבר על ידי גירוי בתדר גבוה. J. Vis. Exp. (2018)

סרטון זה מדגים את הפרוטוקול למתן גירוי מוחי עמוק בתדר גבוה לפיתול משונן, ומפרט את השפעותיו על הפעלה עצבית, פלסטיות סינפטית ונוירוגנזה.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. אספקת גירוי בתדר גבוה
   1. חבר את האלקטרודה המושתלת במוח העכבר לגירוי הניתן לתכנות באמצעות מובילים. הגדר את ממשק התוכנה כפי שמוצג באיור 1. הגדר את פרמטרי הגירוי בתדר גבוה (HFS) כ-6 סדרות של 6 רכבות של 6 פולסים ב-400 הרץ (איור 2B, 100 אלפיות השנייה בין הרכבות, 20 שניות בין הסדרות). הגדר את עוצמת הגירוי ל-200 μA.
   2. ספק HFS לפרק הזמן הרצוי כפי שהוגדר. ספק את הגירוי פעמיים ביום בשעה 8:00 בבוקר ובשעה 20:00 בערב.
   3. עבור קבוצת הביקורת, השתלו אלקטרודות בעכברים ולא ביצעו גירוי.
   4. לצביעה של c-fos, יש לעורר את עכברי הניסוי בצורה חריפה (2x ביום). עבור תיוג ברומודוקסיורידין (BrdU), חלקו את עכברי הניסוי לקבוצת גירוי אקוטי (מיושמת פעמיים ביום) וקבוצת גירוי כרוני (מיושמת פי 10 ב-5 ימים, פעמיים ביום). במהלך הגירוי, ודאו שהעכבר ער. זכור לוודא שהמובילים אינם מעוותים.
      הערה: ביום האחרון של ההליך, העכברים בקבוצת הגירוי החריף היו מגורים בו זמנית.
   5. בסיום הגירוי, נתק בזהירות את סיכת האלקטרודה ממחזיק האלקטרודה ומהמחבר של מערכת ההקלטה.

תוצאות

Figure1. ממשק ופרמטרים של המולטיסטימולטור. הסטימולטור חובר לממיר דיגיטלי-אנלוגי והופעל על ידי תוכנה קניינית. סוג הגירוי של הגירוי בתדר גבוה (HFS) היה חד-פאזי.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
Stimulator	A-M systems	Model 3800	MultiStim 8-Channel Programmable Stimulator
Digidata 1550 Digitizer	Molecular Devices	AXON 1550	רכישת נתונים ברזולוציה גבוהה