חיבור מחדש ישיר של עצבי צוואר הרחם כדי להחזיר את ניידות הגפיים הקדמיות בעכבר

תקציר

מקור: Gao, Z., et al. מודל עכבר של אנסטומוזה ישירה דרך המסלול הקדם-עמוד השדרה לניתוח העברת עצבים חוצה. J. Vis. Exp. (2021).

סרטון זה מדגים שחזור תנועת הגפיים הקדמיות בעכבר באמצעות חיבור ישיר של עצב צוואר הרחם. זה מתחיל בעכבר עם גפה קדמית ימנית משותקת עקב עצב C7 ימני בשורש העצב שלו. עצב C7 השמאלי נחתך, מונחה ימינה דרך המסלול הקדם-עמוד השדרה, ונתפר עם עצב C7 הימני. לאחר מכן מנקים וסוגרים את אתר הניתוח.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

נעשה שימוש בעכברים זכרים בוגרים בני שמונה שבועות C57BL/6N.

1. הגדרה טרום ניתוחית

1. הקפידו על מלאי מתאים של מכשירי ניתוח מעוקרים ומעוקרים, ציוד, תרופות משככות כאבים ותרופות הרדמה.
2. הקפידו על מרחב עבודה הולם על שולחן הניתוחים.
3. הכן את שולחן הניתוחים באמצעות לוח קצף כירורגי מותאם אישית מכוסה חיתול כמיטה לעכבר. תקן כרית חימום ללוח הקצף בעזרת סרט רפואי מכוסה בגזה סטרילית.
4. צור מחזירים על ידי כיפוף מחט דיקור באמצעות מלקחיים לכלי דם, קיפולה לשניים ולאחר מכן כיפוף קצה מחט הדיקור המקופלת לוו. תקן רצועת גומי בקצה מחט הדיקור, והשתמש בנעץ כדי לקבע את קצה רצועת הגומי ללוח הקצף.
5. כייל את הסטריאומיקרוסקופ; בחר סטריאומיקרוסקופ עם מרחק מיקוד מתאים. כסו את לחצני הזום/מיקוד בנייר אלומיניום מעוקר כדי לאפשר למנתח להתאים אותם במהלך הניתוח. רדיד האלומיניום המעוקר הונח על כפתורי הזום/מיקוד, מה שאפשר למנתח להשתמש בו עם כפפות סטריליות.

2. הרדמה והכנה של עכבר

1. : שקלו את העכבר והרדימו אותו בהתאם למשקל גופו (איזופלורן 3%). ודא שהעכבר אינו מגיב כאשר החללים הבין-דיגיטליים של כפו נצבטים כדי לאשר את עומק ההרדמה. יש לשמור על עומק הרדמה הולם לאורך כל ההליך (1% איזופלורן).
2. יש למרוח משחה עיניים דו צדדית על העיניים כדי למנוע גירוי או ייבוש של הקרנית במהלך הניתוח.
3. הכן את אתר הניתוח על ידי גילוח הפרווה על הצוואר והחזה בעזרת קוצץ אוטומטי. הסר ונקה את השיער הרופף.
4. הנח את העכבר במצב שכיבה על כרית החימום המכוסה בגזה סטרילית. שמור על טמפרטורת העכבר על 37 מעלות צלזיוס במהלך כל הפעולה. תקן את העכבר עם סרט רפואי כדי לגרום לגפיים הקדמיות לחטוף אופקית ולמנוע מהגפיים האחוריות והזנב לנוע. וילון כירורגי חד פעמי מעוקר עם פתח מתאים הונח על העכברים.

3. הליך ניתוחי

1. הזרקת טרמדול כמשכך כאבים מונע (20 מ"ג/ק"ג, תוך-צפקי או i.p.). סמן את החתך הרוחבי בקצה העליון של עצם הבריח. השתמש בשלושה מחזורים של קרצוף לסירוגין של תמיסת חיטוי יודופור ואתנול כדי לחטא את אתר הניתוח. אשר את עומק ההרדמה עם צביטה בבוהן לפני הניתוח.
2. בעבודה תחת מיקרוסקופ, בצע חתך רוחבי של 4 מ"מ לאורך הסימן באמצעות אזמל סטרילי. הגדל את החתך במהלך ההליך לפי הצורך.
3. לנתח בצורה בוטה דרך הפאשיה התת עורית ולזהות את הגבול התחתון של הבלוטה התת-לסתית. משוך את הבלוטה התת-לסתית כלפי מעלה כדי לחשוף את הפוסה ועצם החזה הסופרקלביקולריים.
   הערה: יתכנו כלי דם בקליבר קטן באזור זה. ניתן להשתמש בצריבה חשמלית כדי לעצור דימום.
4. בצע חתך סטרנוטומיה חציוני חלקי (~4 מ"מ) על ידי חיתוך עצם החזה מהראש לזנב לאורך קו האמצע. הגן על הצדר, הלב וכלי הדם במהלך סטרנוטומיה.
5. זהה את שריר הסטרנוהיואיד. משוך את עצם החזה בעדינות עם שני מחזירים קטנים בהתאמה אישית העשויים ממחטי דיקור וזהה את שריר הסטרנוהיואיד, מעל קנה הנשימה והוושט. החזר את השריר הזה כדי לחשוף את עורק הצוואר, וריד הצוואר הפנימי, העצב הפרני, עצב הנרתיק, קנה הנשימה והוושט.
   הערה: החזר בעדינות את עצם החזה כדי למנוע פנאומוטורקס פתוח. בניגוד לבני אדם, הוושט של העכבר אינו מאחורי קנה הנשימה אלא צמוד לקנה הנשימה בצד שמאל.
6. זהה את מקלעת הזרוע השמאלית. בקצה הצדדי של וריד הצוואר הפנימי השמאלי, משוך את הפאשיה ורקמת השומן כלפי חוץ כדי לחשוף את מקלעת הזרוע. חפש את תא המטען העליון, המורכב מהעצבים הצווארי או C5 ו-C6, שיש להם שלושה ענפים. זהה את תא המטען האמצעי המורכב מהעצב C7 ואת תא המטען התחתון המורכב מהעצבים C8 ובית החזה או T1, לאורך תא המטען העליון עד לזנב העכבר.
   הערה: ישנם כלי דם אורכיים על פני מקלעת הזרוע. השתמש בצריבה חשמלית כדי למנוע דימום. בעת הפרדת מקלעת הזרוע השמאלית, הגן על תעלת הזרוע כדי למנוע פיסטולה צ'ילוסית.
7. קצור את עצב C7 השמאלי. נתח את החלוקה הקדמית והחלוקה האחורית של תא המטען האמצעי (עצב C7) דיסטלי לרמת החלוקה לחוט מתחת לעצם הבריח וחסום את עצב C7 עם 0.1 מ"ל של 2% לידוקאין על ידי עירוי מקומי לתוך תא המטען. כרתו את עצב C7 בעזרת מספריים קפיציים של Vannas בנקודות המיזוג שלו עם החוט הצדדי והחוט האחורי. חתוך את עצב C7 כך שאורך כל חלוקה יהיה דומה.
   הערה: החלוקות הקדמיות והאחוריות של עצב C7 והחלוקות הקדמיות והאחוריות של הגזע העליון והתחתון עוברות למרחק רב לפני המפגש, ולכן יש לשחרר את עצב C7 מספיק לפני הכריתה. למעשה, עצב C7 לא תמיד מחולק לשתי חטיבות; לפעמים הוא מחולק לשלוש חטיבות או אפילו לארבע במקרים נדירים.
8. הסר את ה-C6 lamina ventralis השמאלי. הגן בזהירות על העצב הפרני וחתך את שריר הסקלן הקדמי ברמה של מקטע C6 כדי לחשוף את שורש העצב C7. חותכים ענפים קטנים של עצב C7 המעצבנים את שריר עמוד השדרה בעזרת מיקרו-מלקחיים. משוך את עצב C7 בעדינות וכרת את ה-C6 lamina ventralis בזהירות.
   הערה: יש בליטה גרמית בין הצד המדיאלי של עורק הצוואר השמאלי לבין הצד הצדדי של הוושט. בולטות גרמית זו היא הלמינה וונטרליס של חוליית צוואר הרחם השישית. השריר האורכי של הקצה הצדדי של ה-C6 lamina ventralis הוא שריר הסקלן הקדמי, והעצב הפרני עובר על פני שריר הסקלן הקדמי.
9. קצור את עצב C7 הימני. נתק את שריר הסקלן הקדמי בצד ימין, בדומה לצד שמאל, וחצה את שורש העצב C7 הימני קרוב לנקב הבין חולייתי. נתחו את עצב C7 הימני מרמת החלוקה שלו.
   הערה: חתכו בזהירות את עצב C7 הימני כדי למנוע נזק לכלי הדם שמתחת לעצב.
10. העבר את עצב C7 השמאלי.
    1. הסר את ה-longus colli השרירי לצד גופי החוליות באופן חלקי משני הצדדים. להפריד ולהרחיב באופן בוטה את המרווח בין קנה הנשימה-וושט לגוף החוליות.
    2. שלח תפר ניילון 5-0 חצי קפל מהצד הימני של גוף החוליה לצד שמאל דרך המסלול הקדם-עמוד השדרה.
    3. חבר את עצב C7 השמאלי עם צינור עירוי והוביל את העצב לצד ימין דרך המסלול הקדם-שדרתי.
    4. החזר את קנה הנשימה והוושט בעדינות והכניס את החלוקות הקדמיות והאחוריות של עצב C7 השמאלי לשורש העצב C7 הימני ללא מתח באמצעות תפרי ניילון 12-0. תפרו את האפינוריום סביב העצבים בעזרת 4-5 תפרים כדי לחבר את העצבים בחוזקה.
       הערה: חיוני לבחור צינור עירוי מפלסטיק בעובי מתאים. צינור דק מדי עלול לפגוע בעצב, וצינור עבה מדי עלול לפגוע בקנה הנשימה ובוושט. בנוסף, המרווח בין קנה הנשימה-וושט לגוף החוליה הוא חלל בצורת "V", וחיתוך חלק מהלונגוס קולי השרירי יכול לקצר את מסלול ההעברה.

4. סגירת פצע

1. להשקות את הפצע במי מלח רגילים סטריליים ולייבש אותו בגזה סטרילית.
2. לתפור את עצם החזה ולסגור את העור באמצעות 5-0 תפרים מונופילמנטים.

5. טיפול לאחר הניתוח

1. המתן עד שהעכבר יתעורר מההרדמה. העבירו את העכבר לכלוב נקי ללא חומר מצעים, אך מחומם בשמיכה מחממת. התבונן בעכבר עד שהוא אמבולטורי. השתמש בטרמדול (20 מ"ג/ק"ג, i.p.) כמשכך כאבים לאחר הניתוח.
2. הניחו את העכברים בכלוב התאוששות ועקבו אחריהם עד להתאוששות. החזר את המים והתזונה של העכברים לאחר הניתוח. עקוב אחר העכברים לאחר הניתוח לאיתור סימני ליקוי או זיהום מדי יום, כולל תת תזונה, יציבה כפופה ופרווה פרועה שבועיים לאחר הניתוח אמורה להתרחש הסרת תפרים.
   הערה: יש למרוח משחת אריתרומיצין על פני הפצע מדי יום במשך שלושה ימים רצופים.
3. אם נצפים סיבוכים כלשהם, כגון בצקת פצעים, יש לפתור אותם מיד.

חומרים