הדמיה בזמן אמת של זיהום חיידקי במודל עכבר באמצעות ביולומינסציה

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: ולנטיין, מ. א. ואחרים, יצירת מוטנטים למחיקת גנים בתוך המסגרת ב-Pseudomonas aeruginosa ובדיקת החלשת אלימות במודל פשוט של זיהום בעכברים. J. Vis. Exp. (2020)

סרטון זה מדגים את השימוש בגישה של הדמיה מבוססת ביולומינסצנציה לניטור זיהום חיידקי במודל עכבר חי. הדמיה ביולומינצנטית רציפה וצילום רנטגן מאפשרת הדמיה בזמן אמת ומיקום אנטומי של הזיהומים המתפשטים ברחבי המארח.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי ועדת הטיפול בבעלי חיים המוסדית המקומית וועדת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

המחשה של הזיהום בביולומינציה

כדי להמחיש את התקדמות הזיהום, הכנס אופרון ביולומינצנטי כרומוזומי (luxCDABE) לזני Pseudomonas aeruginosa PGN5 ו-VE2 שנבדקו. הפלסמידים והפרוטוקול ששימשו לסימון זנים אלו פותחו במעבדת שוויצר וייתכן שאינם תואמים לכל המינים והזנים של החיידקים. חשוב לציין שהדמיית הזיהום היא אופציונלית; לכן, החדרה גנומית של אופרון זה אינה הכרחית לביצוע מחקר התמותה.
הכינו ואמת זנים. בנוסף, בדוק את הביולומינסנציה בזנים המסומנים בכל שלב אימות.
לאחר הכנת הזנים, מזריקים לבעלי החיים בקבוצות של 10 עם הזנים....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם

חברה

מספר קטלוג

הערות

אמבטיה יבשה דיגיטלית של בלוק אקקו

Labnet

NC0205808

דרך פישר סיינטיפיק

חממת ארונות

VWR

1540

איזותזיה איזופלורן

הנרי שיין בריאות בעלי חיים

29405

מערכת ההדמיה IVIS Lumina XRMS Series III In-Vivo

פרקינס ואלמר

CLS136340

אלקטרופורטור מיקרופולסר

BioRad

1652100

פריזמה 7

GraphPad

https://www.graphpad.com/scientific-software/prism/

ספקטרופוטומטר SmartSpec Plus

ביו-ראד

170-2525

או שיטה/ספק מועדף

מסנני מערכת הרדמה XAF-8

פרקינס ואלמר

118999

מערכת ההרדמה הגזית XGI 8

קליפר לייף סיינס/קסנוגן

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

מאמרים קשורים