הדמיה חיה של אינטראקציות בין המאכסן לפתוגן בעוברי דגי זברה שנדבקו ב-Mycobacterium abscessus

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: ברנוט, א. ואחרים. פענוח והדמיה של פתוגנזה והקורדינג של Mycobacterium abscessus בעוברי דגי זברה. J. Vis. Exp. (2015)

הסרטון הזה מדגים פרוטוקול המשתמש בעוברים טרנסגניים של דגי זברה המבטאים מקרופאגים פלואורסצנטיים ונדבקים בזן מחוספס של Mycobacterium abscessus כדי להמחיש אינטראקציות בין מארח לפתוגן. הוא חושף כיצד חבל חוץ-תאי מאפשר התחמקות חיסונית, ומקדם הישרדות חיידקים ונזק לתאי המארח.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. הדמיה חיה של זיהום M. abscessus

עוברים מונדים בהר טריקאין באגרוז עם נקודת התכה נמוכה של 1% בצלחת פטרי בקוטר 35 מ"מ לפני תצפיות מיקרוסקופיות אפיפלואורסצנטיות. השתמשו בצלחת תחתית זכוכית למיקרוסקופיה קונפוקלית הפוכה, או במחסנית חד-חללית למיקרוסקופיה קונפוקלית זקופה. כוון את העובר למיקום הרצוי וכסה את האגרוז המוצק במי דגים המכילים טריקאין.
השתמשו במיקרוסקופ אפיפלואורסצנציה עם מטרת 10X לרכישת פלואורסצנציה והעברת תמונות רציפה של כל העובר. חלופה נוספת היא להשתמש במיקרוסקופ קונפוקלי עם מטרות של 40X או 63X כדי לדמיין את פעילות תאי החיסון לאחר זיהום.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם

חברה

מספר קטלוג

הערות

אגרוז עם התכה נמוכה

סיגמא-אלדריץ'

מלח מתאנסולפונאט אתיל 3-אמינובנזואט (טריקאין)

סיגמא-אלדריץ'

A5040

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

מאמרים קשורים