חיסון פתוגן חיידקי לעלים של ארבידופסיס באמצעות חדירת ואקום

במאמר זה

תקציר

מקור: רופיאן, י. ס., et.al. ניתוח תא יחיד של ביטוי גני Pseudomonas syringae ברקמת הצמח. J. Vis. Exp. (2022)

הסרטון הזה מדגים שיטת חדירה בוואקום להכנסת פתוגן חיידקי לעלי הצמח של ארבידופסיס . הגישה עושה שימוש במתלה חיידקי מוכן ובפולסים של ואקום כדי לאפשר כניסה אחידה דרך סטומטה, מה שמוביל לזיהום עלים מבוקר.

פרוטוקול

1. חיסון צמחי Arabidopsis

הערה: במחקר זה, הזנים Pseudomonas syringae pv. עגבנייה DC3000 ו-P. syringae PV. נעשה שימוש בפאזאוליקולה 1448A.

הכינו את חיסון P. syringae.
1. להוציא את זן P. syringae המעניין ממאגר גליצרול של −80°C על צלחת LB (10 גרם לליטר טריפטון, 5 גרם NaCl, 5 גרם לליטר תמצית שמרים, ו-16 גרם אגר בקטריולוגי) בתוספת האנטיביוטיקה המתאימה. דגרו בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס למשך 40-48 שעות.
  הערה: מומלץ להשתמש באנטיביוטיקה אם הזן הרלוונטי נושא פלסמיד או גן עמידות לגנום. ריכוזי האנטיביוטיקה המומלצי....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

איור 1: חיסון חיידקים והפקת אפופלסט באמצעות צמחי ארבידופסיס . (א) הכנת הסיר כאשר רשת המתכת מחוברת כראוי. (ב) זריעת זרעים באמצעות קיסם כדי להפציר אותם כפי שמצוין בסעיף (ג). (.......