הערכת הליכה לפי ניתוח טביעת רגל: שיטה לבדיקת קואורדינציה מוטורית בעכברים

תקציר

מקור: Sugimoto, H. and Kawakami, K. פרוטוקול בעלות נמוכה של ניתוח טביעת רגל ובדיקת קופסה תלויה לעכברים יישם את לחץ הריסון הכרוני.J. Vis. Exp. (2019).

בסרטון זה, אנו מתארים את הליך בדיקת טביעת הרגל וניתוח קשור כדי להעריך הליכה וקואורדינציה מוטורית בעכברים.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. ניתוח טביעת רגל

1. הגדרת המסלול (איור 1A)
   1. גזור פיסת נייר לבן (29.7 ס"מ x 42 ס"מ x 0.09 מ"מ) לאורך לשלושה אורכים ברוחב שווה. הניחו פיסת נייר לבן (9.9 ס"מ x 42 ס"מ) על השולחן.
   2. הניחו את קופסת המטרה הכהה בקצה הדיסטלי של הנייר. שים קופסאות אחרות (בערך באותו אורך כמו זה של הנייר) עם הקירות משני צידי המסלול, מניעת בריחה של עכברים.
   3. הכניסו דיו שחור ודיו אדום לצלחות פטרי נפרדות (קוטר 35 מ"מ).

2. מפגש הדרכה

הערה: בצעו את האימון רק בגיל 4 שבועות.

1. שים עכבר על הקצה הפרוקסימלי של הנייר (עם הפנים עם הפנים לכיוון תיבת המטרה). תן לעכבר ללכת מהקצה הפרוקסימלי אל תיבת המטרה. הסר את העכבר מקופסת המטרה. אם העכבר נעצר על הנייר, דחוף בעדינות את העכבר לקופסת המטרה באמצעות אצבע.
2. החזק את העכבר על-ידי אחיזת הקשקוש בין האגודל לאצבע כדי להגביל את תנועת הגפיים הקדמיות. לאחר מכן, אחוז בגב ובזנב בין כדור האגודל לאצבעות האחרות כדי להגביל את תנועת הגפיים האחוריות.
   הערה: אחיזה לא מספקת של העכבר גורמת לכתמי דיו על בגדים.
3. טובלים את תחתית הגפיים הקדמיות בדיו אדום ואת תחתית הגפיים האחוריות בדיו שחור. מיד לשים את העכבר על הקצה הפרוקסימלי של הנייר (הפנים את הראש לכיוון תיבת המטרה). תן לעכבר ללכת מהקצה הפרוקסימלי אל תיבת המטרה. אם העכבר נעצר על הנייר, דחוף בעדינות את העכבר לקופסת המטרה באמצעות אצבע.
4. הסר את העכבר מקופסת המטרה. עבור למפגש המבחן.

3. מפגש מבחן

1. לאחר האימון, הגדירו את המסלול לטביעות רגליים עם פיסת נייר לבן חדשה שנחתכה.
2. החזק את העכבר על-ידי אחיזת הקשקוש בין האגודל לאצבע כדי להגביל את תנועת הגפיים הקדמיות. לאחר מכן, אחוז את הגב ואת הזנב בין כדור האגודל לבין האצבעות האחרות כדי להגביל את תנועת הגפיים האחוריות.
3. טובלים את תחתית הגפיים הקדמיות בדיו אדום ואת תחתית הגפיים האחוריות בדיו שחור. מיד לשים את העכבר על הקצה הפרוקסימלי של הנייר. תן לעכבר ללכת מהקצה הפרוקסימלי אל תיבת המטרה.
   הערה: מכיוון שעכברים מעדיפים את החושך, ההליכה נעשית יציבה יותר ככל שהעכבר מתקרב לקופסת המטרה החשוכה. אם העכבר נעצר על הנייר, דחוף בעדינות את העכבר לקופסת המטרה באמצעות אצבע. לאחר מכן, אם טביעות רגל אמינות אינן מתקבלות לניתוח מכיוון שהעכבר נעצר, נסה שוב את הפעלת הבדיקה.
4. החזירו את העכבר לכלוב הביתי מקופסת המטרה. נקו את קופסת המטרה עם 70% אתנול לאחר כל ניסוי. יבשו באוויר את הנייר המודפס ברגל.

4. ניתוח עקבות

1. קבל שלוש מדידות של כל פרמטר (אורכי צעדים של הגפיים הקדמיות והאחוריות, רוחב הבסיס הקדמי והאחורי, חפיפה בין הגפה הקדמית לגפה האחורית, איור 1B) עם סרגל מנייר מודפס ברגל.
   הערה: מכיוון שטביעות רגליים של קצוות קרובים ודיסטליים מראות לעתים קרובות שינויים גדולים בגלל עצירה או ריצה, בחר את החלק עם דפוס הליכה יציב של טביעות רגל. החלק האמצעי של המאמר המודפס ברגל יתאים בדרך כלל לניתוח.
   1. עבור אורך הצעד, מדדו את המרחקים בין אותם חלקים של הכף (למשל, כרית כף או בוהן).
   2. עבור רוחב הבסיס הקדמי, צייר קו בין טביעות רגל קדמיות עוקבות מימין (או משמאל). לאחר מכן, מדדו את אורך הקו האנכי מהמשטח של טביעת הרגל הקדמית השמאלית (או הימנית) לקו המשורטט בין טביעות הרגל הימניות (או השמאליות).
   3. לרוחב הבסיס האחורי, ציירו קו בין טביעות רגל אחוריות עוקבות מימין (או משמאל). לאחר מכן, מדדו את אורך הקו האנכי מהכרית של טביעת הרגל האחורית השמאלית (או הימנית) לקו המשורטט בין טביעות הרגל הימניות (או השמאליות).
   4. לחפיפה, מדדו את המרחק בין רפידות של טביעות רגל קדמיות ואחוריות שמאליות (או ימניות).
2. ממוצע שלוש המדידות עבור כל אדם. השתמש בממוצע האישי של כל פרמטר לצורך ניתוח סטטיסטי.
   1. עבור אורך הצעד, השתמש בממוצע של הממוצעים האישיים של הצעדים השמאליים והימניים.
   2. עבור אסימטריה של אורך צעד, השתמש בערך המוחלט של ההפרש בין ממוצעים בודדים של אורך צעד של גפה שמאל וגפה ימנית.
   3. לניתוח סטטיסטי של הפרמטרים האחרים (רוחב בסיס קדמי, רוחב בסיס אחורי וחפיפה), השתמש בממוצע הבודד ישירות.

תוצאות

איור 1. ניתוח טביעת רגל. (A) מסלול לניתוח טביעת רגל. עכבר צבוע ברגל (גפיים קדמיות: דיו אדום; גפיים אחוריות: דיו שחור) הורשה ללכת מהקצה הפרוקסימלי אל תיבת השער. (B) תמונה מייצגת של טביעת רגל ומדידת פרמטרים. שלוש מדידות של כל פרמטר (אורכי צעדים של הגפה הקדמית והאחורית, רוחב הבסיס הקדמי והאחורי, חפיפה בין הגפה הקדמית לגפה האחורית) התקבלו מנייר מודפס ברגל.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
תיבת שערים	או'הרה ושות'	http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/	אביזר למכשיר בדיקת קרן מאוזנת
קופסאות	או'הרה ושות'		קיר צדדי של מסלול
דיו שחור	שין-אסאהי
דיו אדום	Maruyamakogyo	BC-6
צלחת פטרי חד פעמית	קורנינג	351008	צלחת פטרי (קוטר 35 מ"מ)
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3	Askul	701-712	סקירה טכנית (29.7 ס"מ x 42 ס"מ x 0.09 מ"מ)