כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. ניתוח השתלת עמוד ראש
הערה: יש להקפיד על שימוש במכשירים סטריליים ולארגן ניתוח והחלמה באזורים שונים. לאחר השליטה, הליך ההשתלה נמשך כ -30 דקות.
- עבור שיכוך כאבים, 30 דקות לפני תחילת הניתוח, תת עורית להזריק buprenorphine (0.05 מ"ג / ק"ג) ולהחזיר את החיה בכלוב הביתי שלה.
הערה: ההשפעות משככי הכאבים של Buprenorphine נמשכות כ -12 שעות, זמן רב לאחר סיום ההליך. מניסיוננו, עכברים אינם מראים סימני מצוקה הקשורים להתערבות זו, אך מומלץ מינון עוקב של 0.05 מ"ג/ק"ג בופרנורפין 24 שעות לאחר הניתוח.
- מרדימים את בעל החיים בתא עם גז איזופלורן 2.5%-3%. המתן 3 דקות ובדוק אם העכבר מורדם כראוי על ידי התבוננות בנשימה וחוסר תנועה בתוך החדר. מעבירים את העכבר לקונוס אף על שולחן ניתוחים עם כרית חימום, ועל ידי צביטה בין-דיגיטלית, מוודאים שאין רפלקס נסיגה ומורידים את האיזופלורן ל-1.5%.
- לגלח את ראש העכבר באמצעות סכין גילוח חשמלי. כדי לקבל סביבה סטרילית, לשפשף את האזור המגולח עם תמיסת יוד ולאחר מכן עם 70% אלכוהול. חזור על הליך זה פעמיים נוספות.
- יש להזריק לידוקאין הידרוכלוריד (2%, 2 מ"ג/ק"ג) מתחת לעור הראש להרדמה מקומית ולהמתין 5 דקות עד שההשפעות יתחילו. כדי למנוע נזק לעיניים עקב יובש, כסו את עיני העכבר במשחה וטרינרית אופתלמית מקומית.
- בעזרת זוג מלקחיים קהים, תופסים את העור בחלק האחורי של הראש, ובעזרת זוג מספריים קהים (או אזמל), מבצעים חתך אורכי של כ-1.5 ס"מ כדי לחשוף את הגולגולת.
- בעזרת אזמל, לגרד את periosteum. היזהר לא לגרד חזק מדי, כמו קיבוע של הראש יכול להיפגע אם הגולגולת מתחילה לדמם מעט.
- מרחו טיפה של האקטיבטור הירוק (ראו טבלת חומרים) על מרכז הגולגולת. זה ישפר את קיבוע המלט על ידי הגדלת חדירות העצם.
- מכינים את המלט: מערבבים כף אחת (ראו טבלת חומרים) של פולימר עם חמש טיפות מונומר וטיפה אחת של קטליזטור. בעזרת מברשת, מרחו כמות נדיבה של תערובת הצמנט בין ציוני הדרך של גולגולת הלמבדה והברגמה.
- הניחו במהירות את עמוד הראש על הבטון בתנועת החלקה העוברת מלמדא לברגמה. לאחר הנחת עמוד הראש, מרחו מחדש מלט נוסף סביב החלק התחתון כדי להבטיח שעמוד הראש נדבק כראוי לגולגולת. כדי להבטיח קיבוע נכון, יש לוודא שהמלט מיושם בשפע ומתייבש לפני שממשיכים לשלב הבא.
הערה: בהליך קיבוע זה, עמוד הראש לא ירד ויאפשר בדיקות חוזרות ונשנות לטווח ארוך; בידינו, הסרת עמוד ראש היא <10%.
- הכינו את תערובת השרף על ידי מריחת יחס אבקה לנוזל המאפשר מרקם חלק של התערובת. יש למרוח את השרף במקום בו הוחל המלט וכן סביב עמוד הראש על מנת להגן על פני השטח שלו.
- המתן 3 דקות עד שהשרף יתייבש וסגור את העור בחלק האחורי של האוזניים עם תפר מונופילמנט. בעזרת צמר גפן, יש למרוח תמיסת יוד מדוללת (10%-20%) על האזור המנותח.
הערה: יש לוודא שהעור לא נדבק לשרף.
- כבו את ההרדמה והניחו את בעל החיים תחת אור אדום חם כדי למנוע היפותרמיה. הניחו ברצפת הכלוב מזון לח והידרוג'ל או מקור מים אחר המבוסס בג'ל. אל תשאיר את העכבר ללא השגחה עד שהוא חוזר להכרה. ברגע שהחיה מתאוששת לחלוטין מההליך (בדרך כלל, 30 דקות עד שעה לאחר מכן), הניחו אותו בכלוב עם קבוצות של שלושה או ארבעה כדי לעורר אינטראקציות חברתיות.