קצירת מחסני שומן פריטוניאלי: טכניקה לחקר התיישבות סרטן השחלות של רקמות שומן פריטוניאלי במודלים של עכברים

תקציר

מקור: Krishnan, V. et al. In Vivo וגישות Ex Vivo לחקר סרטן השחלות קולוניזציה גרורתית של מבני נקודות חלב בשומן הצפק. J. Vis. Exp. (2015)

בסרטון זה אנו משתמשים במודל עכברה נשית המתת חסד הנושאת סרטן שחלות. לאחר מכן אנו מתארים פרוטוקול לזיהוי וחילוץ מחסני שומן או רקמות שומן הקשורים לחמשת איברי הצפק העיקריים כדי לחקור התיישבות תאי סרטן גרורתיים.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הכנת בעלי חיים למחקרים ניסיוניים

1. לאפשר לבעלי חיים להתאקלם לדיור וסביבה חדשים, להתאושש מהשפעות פיזיולוגיות אפשריות של הובלה וטיפול.
   הערה: הטכניקה הבאה ישימה לכל זני העכברים הזמינים מסחרית. מספר בעלי החיים שישמשו לניסוי תלוי בתכנון המחקר ויש לעשות זאת בהתייעצות עם סטטיסטיקאי.

2. זיהוי ובידוד של מחסני שומן פריטוניאלי

1. המתת חסד של בעלי חיים באמצעות מנת יתר של_CO2 ושיטה פיזית משנית לאישור מוות.
2. מאחר שקצירת מחסני שומן פריטוניאלי מהווה הסרת איברים פנימיים (שיטה משנית), בצעו חתך בקו האמצע קרוב לפפילות המפשעה דרך דופן הצפק כדי לחשוף את האיברים הפנימיים (איור 1A).
3. עבור שומן אומנטל (OM), חשפו את קומפלקס הלבלב על-ידי הרחבת הטחול מחלל הצפק באמצעות מלקחיים (איור 1C). שחררו אומנטום מהלבלב והטחול על ידי חיתוך צמוד של כל חיבורי הרקמות. ודא כי כל רקמת הלבלב שנותרה נכרתה.
4. עבור שומן גונדל (GF), השתמשו במלקחיים כדי להרים את שומן הגונדאל המקיף את השחלות ואת הבלו על-ידי חיתוך חיבורי רקמות (איור 1A מימין למעלה).
5. עבור שומן הרחם (UF), השתמשו במלקחיים כדי להרים את שומן הרחם המקיף את קרני הרחם ולהוציא את הבלו על-ידי חיתוך חיבורי רקמות (איור 1A למטה מימין).
6. עבור שומן Mesenteric (MF), לחתוך את הצומת בין המעי הדק ואת פילורוס. השתמשו במלקחיים כדי לאחוז היטב בקצה החופשי של המעי הדק, ולאט לאט "לקלף" אותו מהשומן המזנטרי. שחררו את השומן המזנטרי מהשורש המזנטרי באמצעות מספריים מנתחים (איור 1A למטה משמאל).
7. עבור שומן הטחול (SF), הרימו את הקצה הדיסטלי של הטחול באמצעות מלקחיים כדי לחשוף את רצועת השומן הדקה של הרקמה המחברת בין הילום הטחול ללבלב. הבלו על שומן הטחול על-ידי שחרורו תחילה מהלבלב ולאחר מכן ניתוחו בזהירות מהטחול (איור 1B).

תוצאות

איור 1. המיקומים והמבנים היחסיים של מחסני השומן הצפקיים העיקריים. (א)דיסקציה אנטומית גולמית המראה את המיקום היחסי של ארבעה מתוך חמשת המקורות העיקריים של שומן הצפק. האומנטום (OM; מתואר), שומן גונדל (GF), שומן הרחם (UF), מזנטריה (MY), השחלה (ov), קרני הרחם (uh) והמעי הדק (si) מוצגים. (B) שומן טחול (SP; מתואר) שנחשף על-ידי הרמת הטחול במלקחיים. (C) האומנט...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
כלי דיסקציה	כלים מדעיים משובחים	נה
PBS	קורנינג	21-040-CV	ללא סידן ומגנזיום