יצירת תאי סרטן ערמונית כימותרפיים: הליך להשגת תאי סרטן עמידים לתרופות במבחנה

תקציר

מקור: Mohr, L. et al. יצירת מודלים של תאי סרטן הערמונית של עמידות לסוכן האנטי-מיטוטי Docetaxel. J. Vis. Exp. (2017)

סרטון זה מתאר פרוטוקול ליצירת מודלים של תאים עמידים לטקסאן של סרטן הערמונית. מודלים אלה יכולים לסייע בחקר המסלולים המעורבים בהתקדמות לעמידות לדוקטקסל בחולי סרטן הערמונית.

פרוטוקול

1. יצירת תאי סרטן ערמונית עמידים לדוקטקסל

הערה: בצע טיפולים תאיים באמצעות מלאי תמיסות Docetaxel המשמש לקביעת ריכוז התרופה IC50 (להכין מספיק מלאי מראש לשימוש ניסיוני). תאי ההורים צריכים להיות מגודלים במקביל בבקבוק קטן לאורך כל ההליך ולהיחשף לרכב (DMSO) בנפחים מתאימים המחקים את הכמויות המשמשות בצלוחיות המטופלות בדוסטקסל.

1. צלחת DU145 או 22Rv1 תאים ב 150 ס"מ² צלוחיות המכילות 20 מ"ל של מדיה (3.5 x 10⁶ תאים לבקבוק עבור DU145 ו 6.5 x 10⁶ תאים לבקבוק עבור 22Rv1). מומלץ להשתמש ב-10 עד 20 צלוחיות תאים כדי שיהיו מספיק תאים בסוף הפרוטוקול.
2. לאחר 24 שעות, כאשר התאים נ....

תוצאות

איור 1: יצירת מערכות מודל של תאי סרטן ערמונית עמידים לדוקטקסל.(A) דיאגרמה המתארת את קביעת Docetaxel IC50 בקווי תאי סרטן הערמונית DU145 ו- 22Rv1 (שלב 1 של הפרוטוקול). האחוזים הצפויים של כדאיות התא והריכוזים העולים במינון Docetaxel הדרושים נכללים. גרפים מייצגים של כדאיות תאים DU145 ו- 22Rv1 המציינים 5 ננומטר כ- IC50 לאחר 72 שעות של חשיפה ל- Docetaxel כלולים. הניסויים הם טריפליקטים, והנ.......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
תאי DU145	ATCC	HTB-81
22Rv1 תאים	ATCC	CRL-2505
Docetaxel	סלק כימיקלים	S1148	ב-DMSO (10mM)
בקבוק תרבית רקמה 150 ס"מ^{2}	בז	355001
סל"ד 1640 בינוני	גיבקו	11875093	בתוספת 10% FBS ו 1% פניצילין/סטרפטומיצין
פאונדיישן B סרום בקר עוברי	ג'מיני	900208
1X מלח חוצץ פוספט (PBS)	קורנינג	21-040-ס"מ
0.05%טריפסין-EDTA	גיבקו	25300-062
פניצילין-סטרפטומיצין	גיבקו	15140122