Method Article

דגימת מיקרו-מיצוי בשלב מוצק: טכניקה מבוססת בדיקה לחילוץ דגימות מרקמות השתל

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Stryjak, I. et al. שימוש בביופסיה כימית להערכת איכות השתל. J. Vis. Exp. (2020)

בסרטון זה, אנו מדגימים מיצוי מבוסס SPME של מטבוליטים מכליה מתורם שנקטף מראש. ניתן להשתמש במטבוליטים שחולצו לביצוע אנליזה מטבולית וליפידומית על מנת להעריך את איכות האיברים להשתלה.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים המערבים משתתפים אנושיים בוצעו בהתאם להנחיות המוסדיות, הלאומיות והבינלאומיות לרווחת האדם ונבחנו על ידי ועדת הבדיקה המוסדית המקומית.

1. הכנת בדיקות

  1. הכינו גשושיות מסגסוגת טיטניום-ניקל (אורך 40 מ"מ; קוטר 0.2 מ"מ) מצופות בסורב 7 מ"מ במצב ערבוב. מספר הבדיקות תלוי בנקודות הזמן הממוקדות במהלך ההליך כולו ובמספר העותקים המשוכפלים (3 מומלצים לכל נקודת זמן).
    הערה: ניתן להתאים את אורך וסוג שלב המיצוי בהתבסס על אופן המחקר, קוטביות המטבוליטים ומטריצת הדגימה.
  2. הכינו תערובת ניקוי המורכבת מכלורופורם 2:1:מתנול (v/v). פיפטה 1.0 מ"ל של התמיסה לכל בקבוקון זכוכית 2.0 מ"ל ומניחים בדיקה אחת, ש....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
חומצה אצטיתמרק5330010050תוסף שלב נייד
אצטוניטרילאלכם696-34967-4X2.5Lממס HPLC
אמוניום אצטטמרק5330040050תוסף שלב נייד
BENCHMIXER XL מערבולת מרובת צינורותבנצ'מרק סיינטיפיקBV1010מערבל מערבולות
כמוסותפרלן טכנולוגיות5183-2076כחול scrw tp, pre-slit PTFE/Si spta, 100PK
כלורופורםמרק1024441000
מחסנית Discovery HS F5 Supelguard, 3 מיקרומטר, L × ת.ד. 2 ס"מ × 2.1 מ"ממרק567570-Uעמודת מגן HPLC
Discovery HS F5, 2.1 מ"מ x 100 מ"מ, 3 מיקרומטרמרק567502-Uעמודת HPLC
חומצה פורמיתאלכם497-94318-50 מ"לתוסף שלב נייד
בקבוקוני זכוכיתפרלן טכנולוגיות5182-0714
HILIC Luna 3 מיקרומטר, 200A, 100 x 2.0 מ"משים-פולPHX-00D-4449-B0עמודת HPLC
מחסנית HILIC SecurityGuard, 3 מיקרומטר, 4 x 2.0 מ"משים-פולPHX-AJ0-8328עמודת מגן HPLC
איזופרופנולאלכם231-AL03262500ממס HPLC
מתנולאלכם696-34966-4X2.5Lממס HPLC
מים ננו-טהוריםמרק1037281002ממס HPLC
Q Exactive Focus היברידי Quadrupole-Orbitrap MSתרמו סיינטיפיקQ מיקוד פעילספקטרומטר מסות
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm,100Å 100 x 2.1 מ"ממרק1506570001עמודת HPLC
ערכת SeQuant ZIC-HILIC Guard 20 x 2.1 מ"ממרק1504360001עמודת מגן HPLC
בדיקות סיבים SPME LC, מצב מעורבסופלקוסיבי אב טיפוס
מערכות UltiMate 3000 HPLCתרמו סיינטיפיקUltiMate 3000מערכת HPLC
תוספות בקבוקון (מושבתות)פרלן טכנולוגיות5181-8872
XSelect CSH C18 3.5μm 2.1x75 מ"מווטרס186005644עמודת HPLC
מחסנית XSelect CSH C18 VanGuard 3.5μm, 2.1x5 מ"מווטרס186007811עמודת מגן HPLC

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

Related Articles