חסימת שופכה חד צדדית מודל מורין: הליך כירורגי לחסימת זרימת השתן מכליה במודלים עכבריים

תקציר

מקור: Yanai, K. et al. הערכת PCR כמותית בזמן אמת של ביטויי מיקרו-רנ"א בכליה של עכבר עם חסימת שופכה חד צדדית. J. Vis. Exp. (2020)

סרטון זה מדגים את ההליך ליצירת מודל עכבר חסימת שופכה חד צדדי. ההליך כולל חיתוך אחד השופכנים של העכבר כדי לחסום את זרימת השתן.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. ניתוח UUO

1. הכינו את הפריטים הבאים: איזופלורן, יריעת שעם, קרם אפילציה, מגבוני מעבדה, צלחת פטרי עם PBS, משי 4-0, ניילון 4-0, מזרק 2.5 מ"ל, צמר גפן, פינצטה, מספריים כירורגיים ועכברים זכרים C57BL/6 בני 8 שבועות.
2. מרדימים עכבר עם 1.5% איזופלורן ושומרים על 1.5%. לאחר מכן, להחיל קרם depilatory על הבטן של העכבר. לאחר מספר דקות, נגבו את קרם הניקוי עם מגבון מעבדה ספוג PBS.
3. הזריקו 70% אתנול לבטן העכבר והניחו את העכבר במצב שכיבה על יריעת השעם.
4. באמצעות מספריים כירורגיים פינצטה, לבצע חתך בעור בבטן לחתוך את השריר ואת קרום הצפק מן שלפוחית השתן אל הקצה התחתון השמאלי של הצלעות.
5. הניחו את מזרק 2.5 מ"ל מתחת לעכבר. קח שני צמר גפן והרטיב אותם עם PBS. משכו את המעיים בזהירות לצד עם הפינצטה והניחו את המקלונים הלחים כראוי כדי לזהות את השופכן השמאלי. באמצעות פינצטה, להרים את הכליה השמאלית.
6. השתמשו במשי 4-0 כדי לקשור את השופכן השמאלי בשני מקומות במרחק של כ-1 ס"מ זה מזה. חותכים את השופכן בנקודת המרכז של שתי הרצועות ולאחר מכן משתמשים בתפרי ניילון 4-0 כדי לסגור את קרום הצפק ואת החתך.