$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. בעל חיים מרדים
- השתמש במערכת הרדמה שולחנית כדי להרדים את בעל החיים עם isoflurane. הפעל את מיכל O2 וכוונן את מד זרימת החמצן ל- 1 ליטר לדקה.
- הניחו עכבר נקבה בוגרת C57BL/6J בתא האינדוקציה. הפעל וכוונן את וופורייזר האיזופלורן ל-3% לאינדוקציה. העכבר צריך להיות בהרדמה בתוך 2 דקות. לנהל משכך כאבים buprenorphine (0.1 מ"ג / ק"ג) תת עורית עם הסרת העכבר מתא האינדוקציה עבור שיכוך כאבים מונע.
הערה: בפרוטוקול זה משתמשים בנקבות עכברים, שכן קל יותר לעבוד איתן במהלך צנתור שופכה. הפרוטוקול עובד גם עבור עכברים זכרים, אך נדרשת זהירות יתרה.
- החל משחה אופתלמית על העיניים של החיה כדי למנוע יובש. הניחו את העכבר המורדם עם הפנים כלפי מעלה על כרית חימום כשאפו בתוך חרוט האף. סובב את מתג מעגל האוויר כדי לאפשר לאיזופלורן לעבור דרך חרוט האף.
- לרסן את הראש ואת חרוט האף עם סרט דבק. כוונן את וופורייזר האיזופלורן ל-2% לצורך תחזוקה.
- לרסן את הגפיים עם סרט דבק. בצעו בדיקות צביטת אצבעות כדי לוודא שבעל החיים נמצא בהרדמה עמוקה ולאחר מכן גלחו את אזור הבטן.
2. דלדול שתן ושטיפת שלפוחית השתן
- יש למרוח חומר סיכה על הצנתר (24G, אורך 2.11 ס"מ, קוטר חיצוני של 0.045 ס"מ) ולוודא שפני השטח החיצוניים שלו מכוסים במלואם.
- הכניסו את הצנתר לפתח השופכה ודחפו אותו באיטיות עד שהוא מגיע לשלפוחית השתן, ואז השתן אמור לזרום החוצה דרך הצנתר. לחץ בעדינות על הבטן כדי לסייע לדלדול השתן.
- בדוק אם הצנתר מוחדר כראוי לשלפוחית השתן על ידי צפייה בזרימת שתן אוטומטית החוצה. יש להימנע מפירסינג בשופכה ובדופן שלפוחית השתן ולמרוח חומר סיכה מספר פעמים במידת הצורך.
- יש להשליך את השתן עם פיפטה לכוס פסולת.
- פיפטה 80 μL של מלח חוצץ פוספט (PBS) לתוך הקצה החיצוני של הצנתר, כאשר הקצה השני עדיין בשלפוחית השתן. יש לחבר בזהירות מזרק בנפח 1 מ"ל לקטטר. דחפו בעדינות את המזרק כדי להזריק את PBS לשלפוחית השתן. השאירו חלק מה-PBS בצנתר כדי למנוע יצירת בועות אוויר בשלפוחית השתן.
- מוציאים את המזרק. המתן עד ש-PBS יתנקז משלפוחית השתן. לחץ בעדינות על הבטן כדי לפנות PBS.
- יש להשליך את ה-PBS בצנתר עם פיפטה לתוך כד הפסולת.
- חזור על שטיפת PBS (שלבים 2.4 עד 2.6) פעמיים נוספות.
הערה: חיוני לעבוד בעדינות במהלך שלבי כביסה אלה. דם בצנתר או כשל של זרימה אוטומטית של נוזל בדרך כלל מצביע על כך שהשופכה מנוקבת דרך