Method Article

Decellularization קומפלקס לב ריאה: טכניקה עבור decellularizing הלב והריאות מ מודל Murine

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Mayorca-Guiliani, A. E. et al. Decellularization of the Murine Cardiopulmonary Complex. J. Vis. Exp. (2021)

סרטון זה מדגים שיטה לייצור מטריצה חוץ-תאית דה-תאית או פיגומים ECM על ידי יישום זילוח מקדים של דטרגנטים דרך כלי הדם. לאחר מכן ניתן להשתמש בפיגומי ECM המבניים כדי לנתח עיצוב מחדש של ECM הקשור למחלת לב-ריאה.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. מיקרו-כירורגיה לאחר המוות

  1. הרדימו את העכבר באמצעות תא CO2.
    1. הכניסו את העכבר לתא של 4 ליטר, והתחילו למלא ב-100% CO2, החל מ-0.2 ליטר/דקה למשך 2 דקות, והגדילו עד שהגיעו לזרימה של 0.8 ליטר/דקה אחרי 3 דקות. העכבר צריך לאבד את ההכרה במהלך 2 הדקות הראשונות, ואז הנשימה צריכה להפסיק (בדרך כלל בסביבות 5 דקות, אבל זרימה ניתן לשמור לפי הצורך). אשר את המוות לפני שתמשיך לשלב הבא.
  2. לגלח את בית החזה, הבטן והגב של העכבר עם קוצץ השיער ולחטא עם ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מיקרוכירורגיה
תפר 6-0, מחט חתך משולש (Vicryl)אתיקון6301124
9-0 מיקרו-תפר (Safil)בי בראוןG1048611
מלקחיים אדסוןכלים מדעיים משובחים11006-12
אדסון מלקחיים עם שינייםכלים מדעיים משובחים11027-12
מחזיק מיקרו-מחט Castroviejoכלים מדעיים משובחים12061-01
תא אוורור CO2 להמתת חסד של עכבר
מים שעברו דה-יוניזציה (Milli-Q IQ 7000, מערכת מים אולטרה-טהורה במעבדה)מרקZIQ7000T0
מגש פוליסטירן חד פעמי (~ 30 × 50 ס"מ)
מיקרוסקופ דיסקציה (Greenough, עם צוואר אווז בעל שתי זרועות)לייקהS6 D
מיקרו-מרית דו-צדדיתכלים מדעיים משובחים10091-12
מיקרו-מלקחיים Dumont (שניים)כלים מדעיים משובחים11252-20
מיקרו-מלקחיים של Dumont עם קצוות של 45°כלים מדעיים משובחים11251-35
גוזז שיעראוסטר76998-320-051
מחזיק מחט Halsey (עם לסתות טונגסטן קרביד)כלים מדעיים משובחים12500-12
צנתר תוך ורידי 24 מד (Insyte)ב.ד.381512
צנתר תוך ורידי 26 מד (Terumo)Surflo-WSR+DM2619WX
מספריים מאיו (גזירה קשה, ישרה)כלים מדעיים משובחים14110-15
מיקרו-מלקחיים עם קצוות טבעתייםאסקולאפFM571R
מספריים מיקרו-קפיציים (Vannas, מעוקלים)כלים מדעיים משובחים15001-08
מחטים (27 מד; מיקרולנס)ב.ד.21018
מגבת נייר (סטרילית) או מפית כירורגית
מספריים משוננים (CeramaCut, ישר)כלים מדעיים משובחים14958-09
Spatula (Freer-Yasargil)אסקולאפOL166R
מזרקים (1 מ"ל; פלסטיפק)ב.ד.3021001
מזרקים (10 מ"ל; פלסטיפק)ב.ד.3021110
מספריים לגיד (וולטון)כלים מדעיים משובחים14077-09
דה-סלולריזציה
70% אתנול (אלכוהול מוחלט 99.9%); יש להתאים את האלכוהול האבסולוטי ל-70% (vol/vol) באמצעות מים שעברו דה-יוניזציהשזיף1680766
מים שעברו דה-יוניזציה (Milli-Q IQ 7000, מערכת מים אולטרה-טהורה במעבדה)מרקZIQ7000T0
אביזרי Luer ל-Tubing לגברים (1/8 אינץ')מכשירים מדויקים בעולם13158-100
אביזרי Luer ל-Tubing לגברים (1/8 אינץ')מכשירים מדויקים בעולם13158-100
PBS (pH 7.4, 10×, Gibco)תרמו פישר סיינטיפיק70011044
פניצילין-סטרפטומיציןגיבקו15140122
משאבה פריסטלטית (עם 12 ערוצים)אולה דיץ'110AC(R)20G75
צינורות סיליקון (עם תעודת זהות 2 מ"מ ו-4 מ"מ o.d.)אולה דיץ'31399
נתרן אזידסיגמא-אולדריץ'08591-1ML-F
נתרן דאוקסיכולאט (DOC)סיגמא-אולדריץ'D6750-100G

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Cardiopulmonary ComplexDecellularization TechniqueMurine ModelAntegrade PerfusionDetergent SolutionsDeionized WaterDOC PerfusionSDS PerfusionTracheal CatheterizationAortic Arch Catheter

Related Articles