יצירת מודל מורין של אוטם שריר הלב: הליך כירורגי לקשירה קבועה של עורק כלילי יורד קדמי שמאלי במודל עכבר

תקציר

מקור: Lugrin, J. et al. מודל אוטם שריר הלב באמצעות קשירה קבועה של עורק כלילי יורד קדמי שמאלי. J. Vis. Exp. (2019)

בסרטון זה, אנו מתארים הליך כירורגי ליצירת מודל עכבר של אוטם שריר הלב על ידי קשירת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הרדמה ושימורים בקנה הנשימה

1. שקול את העכבר כדי לקבוע את המינון של תרופות הרדמה, תרופות משככי כאבים לאחר הניתוח ואת נפח הגאות של מכונת ההנשמה. מחממים מראש את כרית החימום ב 37 מעלות צלזיוס. מערך הניתוח מתואר באיור 1.
2. יש להזריק לעכבר תערובת של קטמין וקסילזין במינון של 80 מ"ג/ק"ג ו-10 מ"ג/ק"ג, בהתאמה.
3. לגלח במהירות את פרוות העכבר על הגרון ואת הצד השמאלי של כלוב הצלעות באמצעות סכין גילוח חשמלי.
4. בדוק את עומק ההרדמה על ידי צביטת זנב ו / או רגליים אחוריות והושיב את בעל החיים במצב שכיבה על כרית החימום. מניחים דחיסת גזה קטנה מתחת לראש החיה כדי למנוע התחממות יתר של העיניים. יש למרוח ג'ל עיניים כדי למנוע יובש בעיניים.
5. הדביקו את ארבעת הגפיים בעזרת סרט הדבקה על פני כרית החימום. מעבירים לולאה של תפר משי 5-0 מתחת לשיניים החותכות העליונות ומדביקים את קצה הלולאה עם סרט הדבקה על כרית החימום. זה ישמור על הפה של החיה פתוח להקל על קנולציה.
6. יש למרוח קרם להסרת שיער על האזורים המגולחים מראש ולעסות בעדינות עם צמר גפן למשך דקה. נגבו את עודפי הפרווה והשמנת בעזרת גזה. השתמש טיפות של 0.9% תמיסת מלח וגזה כדי לנקות את אזורי החתך. החל חתיכות של גזה סטרילית על הגרון המגולח ואת בית החזה ולהשרות אותם iodopovidone.
   הערה: אנו ממליצים על שימוש בתרופת הרדמה מקומית (לידוקאין או בופיבקאין) לאתרי חתכים.
7. הגדר את מכונת ההנשמה לנפח גאות של 7 מ"ל/ק"ג וקצב אוורור של 140 פעימות לדקה
   הערה: מעתה, לעבוד תחת סטריאומיקרוסקופ מיקרוכירורגיה.
8. יש להחזיק את העור במרכז הגרון ולבצע חתך של 0.5 ס"מ בעקבות קו קאודלי/צפאלי באמצעות מספריים קטנים. להפריד את האונות של בלוטת הרוק, ולאחר מכן להפריד בעדינות fascia של שריר sternohyoid עם מלקחיים ניתוח מעוקל עד הגרון קנה הנשימה גלויים. הדק את קצוות הפתח באמצעות מחזירים המחוברים לרצועות אלסטיות.
   הערה: בצע שלב זה ללא חתך של השרירים. מפעיל מיומן יוכל לבצע אינטובציה לבעל החיים דרך חלל הפה ללא הדמיה של קנה הנשימה, מה שהופך צעד זה לאופציונלי.
9. החזיקו בעדינות את הלשון לצדדים. בעזרת מלקחיים, הכנס את המחט הפנימית הקהה של צינורית 16 גרם לתוך קנה הנשימה. דמיינו החדרה נכונה לקנה הנשימה דרך החתך בגרון.
10. חבר את הצינורית למכונת ההנשמה וודא אוורור נכון על ידי הכנסת צינורות הפליטה למים. נוכחות של בועות מצביעה על אינטובציה נכונה.
    הערה: על מנת לשמור על רקמות רטובות במהלך הפעולה, מניחים גזה סטרילית ספוגה בתמיסת מלח 0.9% ויודופובידון על חתך הגרון. לשלוט בלחות במהלך ההליך.

2. קשירת העורק הכלילי LAD

1. שחרר את הכף הקדמית השמאלית מסרט הדבקה והזז בזהירות את העכבר למיקום דקוביטוס בצד ימין. אבטח את הגפה הקדמית השמאלית ברגע שהחיה נמצאת במצב הנכון.
2. לזהות את הקו בין שרירי החזה השמאלי הקטן לשריר הראשי ולבצע חתך עור אלכסוני על 1 ס"מ עם מספריים בעקבות הקו. בעזרת ניתוח מספריים זעירים קהים, יש להפריד את הפאשיה של שרירי החזה ללא חתך. שמור על שרירי החזה מופרדים באמצעות retractors מחובר רצועות אלסטיות.
3. הגדר את מכונת ההנשמה עם לחץ סוף תפוגה חיובי (PEEP) של 3 ס"מ H₂O.
4. פתח את חלל החזה באמצעות מלקחיים קהים בחלל הבין-קוסטלי השלישי בין הצלעות השלישית והרביעית. הימנע מלגעת בעורק החזה הפנימי מכיוון שיש סכנה לדימום. אין לגעת בלב או בריאה. מרחו שני משחזרים לתוך כלוב הצלעות, אחד על כל צלע (איור 2A).
5. בעזרת מלקחיים עדינים מעוקלים, הסירו בזהירות את קרום הלב ופרקו אותו מבלי לפגוע בלב ובריאות.
6. אתר עורק כלילי יורד קדמי שמאלי (LAD). עורק LAD מופיע כקו אדום בוהק שטחי העובר מקצה האאוריקל השמאלי לכיוון הקודקוד.
7. השתמש במחזיק מחט כדי להעביר תפר משי 7-0 מתחת ל- LAD 2 עד 3 מ"מ מתחת לאטריה השמאלית. משוך את המשי באיטיות כדי למנוע קריעה של רקמת הלב. קשרו את הרצועה בשלושה קשרים. החלק השמאלי התחתון של החדר השמאלי יחוויר מיד עם הקשירה (איור 2B-E).
   הערה: חשוב לא להיכנס עמוק מדי לתוך חלל החדר או להישאר שטחי מדי. עבור בעלי חיים המופעלים על ידי דמה, משוך את משי התפר מתחת ל- LAD והסר אותו לאט תוך הימנעות מקרע רקמות.
8. שחררו את מחזירי הצלעות, החזיקו את הצלע השלישית במלקחיים ובצעו שני מעברים עם תפר משי 6-0 מתחת לצלעות 3 ו-4.
   זהירות: אין לנקב את הלב או הריאה. אל תהדק קשרים עדיין.
9. יש לטפטף שלוש טיפות של תמיסת מלח 0.9% בטמפרטורה של 37°C על הפתח ולסגור את צינור הפליטה למשך 2 או 3 מחזורי נשימה כדי לנפח את הריאות כראוי. הדקו את התפר והדקו בשתי זריקות.
10. שחררו את המחזירים האוחזים בשרירים ועזרו להם לשלוף את מקומם הנכון.
11. סגור את עור החזה עם שני תפרים של משי 5-0 תפרים ומאובטח בשתי זריקות. סגור את עור הגרון בתפר אחד של משי תפר 5-0 ומאובטח בשתי זריקות.

תוצאות

איור 1: תיאור המערך הכירורגי. (A) מערך כירורגי כולל כרית חימום מותאמת, מאוורר ומחזירים המחוברים לרצועות אלסטיות. (B) סט מספריים, מלקחיים ומחזיק מחטים שנעשה בהם שימוש במהלך הניתוח. (ג) צילום תקריב של המיני-חוזרים. לא מוצג: סטריאומיקרוסקופ כירורגי.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מחט 30 גרם	BD מיקרולנס 3	304000
מסירים קהים	כלים מדעיים משובחים	18200-09
מקלוני צמר גפן	SA מיושם	6001109
מספריים מנתחים, מעוקלים	אסקולאפ	BC603R
סכין גילוח חשמלי	רמינגטון	HC720
קרם להסרת שיער, Veet	משי ופרש טק.	8218535
מיקרו מספריים, מעוקל קהה/קהה	אסקולאפ	FM013R
מזרק 1 סמ"ק, Omnifix-F	ב. בראון	9161406V
תפר משי 5-0, BB	אתיקון	K880H
תפר משי 6-0, P-1	אתיקון	639H
תפר משי 7-0, BV-1	אתיקון	K804
סטודנט Dumont #7 מלקחיים	כלים מדעיים משובחים	91197-00
מלקחיים עדינים לסטודנטים, זוויתיים	כלים מדעיים משובחים	91110-10
כפפות כירורגיות	וייטקארה	834301
כרית חימום כירורגית	הגדרה מותאמת אישית
Temgesic סול 0.3 מ"ג / מ"ל Buprenorphine	Indivior Schweiz AG	N02AE01
מחט פנימית של צינור קנה הנשימה של חתול 16G i.v.	אבוקת-ט	G714-A01
מיקרוסקופ S3 אוניברסלי, OMPIMD	זייז
מכונת הנשמה, MiniVent דגם 845	מכשיר הרווארד	73-0043
ויסקוטרים	אלקון	1551535
70% אתנול
בטאדין 60 מ"ל	מונדיפארמה