כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE
1. השתלה כירורגית של מערכת ניטור טמפרטורה טלמטרית
- עם ההגעה מהמוכר, לאפשר לבעלי החיים לנוח בויבריום לפחות שבוע לפני הניתוח כדי למזער את הלחץ של התחבורה.
- הקבוצה מאכלסת את העכברים (מקסימום 5 בכלוב על פי הנחיות IACUC המקומיות) עד ליום הניתוח להשתלת מכשיר טלמטרי בטמפרטורה. אחסנו אותם בכלובים סטנדרטיים בגודל 7.25 אינץ' (רוחב) x 11.75 אינץ' (אורך) x 5 אינץ' (ג) המכילים מצעי קלחי תירס. שמור על מחזור האור במחזור אור של 12 x 12 (ב: 7 בבוקר; כבוי: 19:00). שמור על טמפרטורת הדיור ב 20-22 ° C ואת הלחות היחסית (RH) ב 30%-60%. ספק את דיאטת הצ'או הסטנדרטית ואת המים עד פרוטוקול EHS.
הערה: הרציונל לדיור פרטני הוא להימנע מפציעות לחימה תכופות בעכברי C57bl/6J זכרים ולספק הזדמנויות רבות לריצת גלגלים ספונטנית עבור כל עכבר.
- למיקום מכשירי הטלמטריה, יש להרדים את העכבר באמצעות איזופלורן (4%, 0.4-0.6 ליטר/דקה של זרימת O2) בתא אינדוקציה. לאחר מכן, הניחו את העכבר תחת הרדמה רציפה באמצעות חרוט אף (1.5%, 0.6 ליטר/דקה).
- השתמש בחומר סיכה לעיניים, כגון משחה וטרינרית, כדי להגן על עיני בעל החיים מפני נזק או פציעה במהלך הניתוח.
- כדי להכין את אתר הניתוח, יש לגלח את הבטן התחתונה בעזרת קוצצי שיער קטנים של בעלי חיים או להשתמש במסיר שיער מסחרי. מתן המנה הראשונה של buprenorphine תת עורית (0.1 מ"ג / ק"ג) במהלך תקופה זו.
- יש לקרצף את האזור בשלוש שטיפות של פובידון-יוד (או פילינג חיידקי דומה) ולאחר מכן לשטוף 70% אלכוהול איזופרופיל (או מי מלח סטריליים בהתאם לדרישות הווטרינריה המקומית). לאחר מכן, העבר את העכבר לאזור הניתוח.
- השתמש בוילון דבק כדי לבודד את אתר הניתוח בעכבר. באמצעות מכשירים סטריליים וטכניקה אספטית, לבצע חתך ~ 1 ס"מ על קו האמצע לאורך linea alba, כ 0.5 ס"מ מן השוליים costal. לאחר מכן, להפריד את העור משכבת השריר ולעשות חתך קצת יותר קטן על linea alba, נזהר לא לפגוע במעיים או איברים פנימיים.
- לאחר ששכבת השריר פתוחה, מקם את הטלמטר הסטרילי (מכשיר רדיוטלמטריה זעיר לשימוש חוזר ללא סוללה; 16.5 x 6.5 מ"מ) לתוך החלל התוך צפקי לפני העורקים והוורידים הקאודליים והגבי לאברי העיכול כדי לאפשר לו לצוף בחופשיות.
הערה: כל הטלמונים מנוקים במים וסבון, נשטפים ביסודיות ומעוקרים בגז עם אתילן אוקסיד בין שימושים. אם עיקור בגז אינו זמין, תתקבל טבילה בתמיסות עיקור (בעקבות המלצת היצרן לדילול וזמן טבילה) לחיטוי וחיטוי הטלמונים.
- סגור את פתח הבטן בתפר סטרילי נספג 5-0 וסגור את העור באמצעות תפר פשוט קטוע עם תפר פרולין 5-0.
הערה: מתן אפשרות לטלמטר לצוף בתא הבטן מבלי לקשור אותו לדופן הבטן (שיטה המומלצת על ידי היצרן) הוכחה כמוצלחת ומועדפת על ידי המחברים כדי למנוע מתח עודף בדופן הבטן במהלך הריפוי. יתר על כן, אין לכך השפעה על יכולתו של המקלט לקבל את האות מהפולט.
- הניחו את העכבר בכלוב הנקי שלו עם כרית חימום ניידת מתחת לכלוב. עקוב אחר העכבר כל 15 דקות במהלך השעה הראשונה של ההתאוששות מהרדמה, ולאחר מכן חזור למתקן הדיור לבעלי חיים.