פסים רוחביים של קשת אבי העורקים במודל עכבר: טכניקה זעיר פולשנית בעכברים להשראת לחץ גבוה בחדר השמאלי

תקציר

מקור: Zaw, A. M. et al. Minimally Invasive Transverse Aortic Conquetion in עכברים. J. Vis. Exp. (2017)

בסרטון זה אנו מדגימים פרוטוקול ניסיוני להתכווצות זעיר פולשנית של אבי העורקים הרוחבי בעכברים כדי לבחון אי ספיקת לב הנגרמת כתוצאה מעומס יתר.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הכנת אתר הפעולה

1. יש לחטא את אתר הפעולה עם 75% אלכוהול איזופרופיל. התאימו את טמפרטורת כרית החימום ל-37°C כדי למנוע שינויים בקצב הלב והנשימה של בעל החיים הנבדק.
2. השתמש בכלי ניתוח מעוקרים במעקר עקירה כוח הכבידה ב 121 ° C במשך 30 דקות או בשיטות מתאימות אחרות.
3. קחו 2-4 מחטים באורך 30 מד ועקמו אותן עם מחזיק מחט, כפי שניתן לראות באיור 1, כדי ליצור כלי לקשירה ולהפרדת רקמות ולשימוש כמחזיר. הרכיבו את המחט המעוקלת כעת על מוליך כותנה לשימוש בניתוח.
4. מקהים מחט באורך 27 מעלות ומעקמים אותה ב-90 מעלות עם מחזיק המחט. החליקו את הקצה על ידי שפשוף משטח קשה ליצירת מרווח של 0.4 מ"מ בשלב הקשירה.

2. הכנת בעלי חיים

1. מרדימים עכבר בן חודשיים, זכר, 22-25 גרם C57BL/6N עם תערובת קטמין וקסילזין מתאימה ביחס למשקל הגוף: 100 מ"ג/ק"ג + 10 מ"ג/ק"ג I.P. אשרו את ההרדמה עם רפלקס צביטת הזנב השלילי.
2. הסר את השיער על הצוואר הקדמי והחזה עם יישום 2 עד 3 דקות של קרם depilatory. מוציאים את הקרם עם מים חמים ומוליך כותנה.
3. החל משחה אופתלמית או ג'ל על העיניים של החיה כדי למנוע התייבשות של הקרנית.
4. הניחו את בעל החיים על כרית חימום במצב שכיבה ובצעו ניטור תוך ניתוחי, תוך הקפדה על תיעוד מתאים בכל מרווח של 15 דקות.
5. השתמש בנייר דבק כירורגי כדי להצמיד את הגפיים לכרית החימום על מנת לשמור על בעל החיים בתנוחה הנכונה במהלך הניתוח.
6. לחטא את העור לסירוגין עם אלכוהול ותמיסת פובידון-יוד שלוש פעמים.
7. השתמש בוילון סטרילי עם שדה ניתוח חשוף כדי למנוע זיהום. השתמש בכפפות סטריליות חדשות לכל עכבר ולפי הצורך.

3. הליך קשירה

1. פתח את עור העכבר במיקום קו האמצע של הצוואר והחזה בעזרת אזמל.
2. משוך את בלוטת התריס לכיוון הראש על ידי הפרדה עדינה של רקמות החיבור עם מספריים קהים.
3. הפרידו את שכבת השריר על קנה הנשימה בקו האמצע לכיוון שני הצדדים בעזרת המחטים המעוקלות.
4. בעזרת המספריים הקהות חותכים את עצם החזה לצלע השנייה (כ-5 מ"מ). פתח את החתך עם retractor או מלקחיים מעוקלים.
5. הפרידו את אונות בלוטת התימוס זו מזו ואת דופן בית החזה התחתון על ידי הפרדת רקמת החיבור עם המחט המעוקלת; קשת אבי העורקים הרוחבית ושני עורקי התרדמה ייראו בבירור בשלב זה.
6. מניחים את המחט המעוגלת מתחת לקשת ומנקבים בין דופן כלי הדם לרקמת החיבור בצד השני על ידי דחיפת הראש המעוגל החוצה.
7. באמצעות המחט המעוקלת, משוך את תפר מונופילמנט 6-0 מתחת לקשת אבי העורקים.
8. הניחו את הספייסר בלולאה וקיבעו את התפר במקומו בעזרת קשר כפול. הסר את המרווח בעדינות.
9. לאשר כיווץ מוצלח עם מיקום הקשר לחתוך את הקצוות של התפר.
10. סגור את דופן החזה באמצעות תפר משי 6/0 עם תבנית תפר קטועה פשוטה. סגור את העור עם תפר מונופילמנט 6/0 בתבנית תפר רציפה.

4. טיפול לאחר ניתוח

1. יש למרוח תמיסת פובידון-יוד על אתר התפרים ולהכניס את בעל החיים לכלוב שחומם מראש לצורך התאוששות וניטור לאחר הניתוח.
2. הזריקו בופרנורפין (0.05-0.1 מ"ג/ק"ג כל 12 שעות) לאחר שבעל החיים חזר להכרה כדי להקל על הכאב ולספק לעכבר מזון רך מתאים.
3. יש להחזיר את בעל החיים לחדר מחזור אור/חושך של 12 שעות לאחר החלמה מלאה.

תוצאות

איור 1: תהליך יצירת ווי המחט הרצויים על-ידי כיפוף קצה מחט בגודל 1 אינץ' ו-30 אינץ'. (A) קצה המחט המקורי בגודל 1 אינץ', 30 מד. (B) אחזו בקצה המחט עם מחזיק המחט והתכופפו בערך באמצע הדרך. כופפו את המחט לתוך לולאה, באמצעות מחזיק המחט והידיים, לפי הצורך, כדי ליצור את הלולאה בתמונה בפינה הימנית העליונה של האיור. (C) כסו את המחט בצינור פו...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
1 אינץ '30 מד מחטים	BD, פרנקלין לייקס, NJ 07417, ארה"ב	305128	מעוקל כמו בפרוצדורה ובאיור 1
מחט 27 מד	BD, פרנקלין לייקס, NJ 07417, ארה"ב	301629	הפוך לבוטה וחלק עבור ספייסר
6/0 דפילון	B. Braun, 34212 Melsungen , הסן, גרמניה	C0933066
6/0 סילקם	B. Braun, 34212 Melsungen , הסן, גרמניה	C0762067
כפפות סטריליות	A.R. Medicom, Inc (Asia), הונג קונג
אפליקטור כותנה	Mannings, Quarry Bay, הונג קונג		מרכז קניות מקומי
קרם דפילטורי	Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, הונג קונג		מרכז קניות מקומי
מספריים לקסר-בייבי	FST , בריטיש קולומביה V7H 0A6, קנדה	14078-10
קשתית מעוקלת Forcep	FST , בריטיש קולומביה V7H 0A6, קנדה	11065-07
מחזיק מחט מיקרו אולסן-הגר	WPI, סרסוטה, FL 34240, ארה"ב	501989
מיקרוסקופ סטריאו	WPI, סרסוטה, FL 34240, ארה"ב	PZMIII-BS
ג'ל עיניים GenTeal	נוברטיס, מזרח הנובר, NJ 07936, ארה"ב		בית מרקחת מקומי
כרית חימום	Kent Scientific Corporation, טורינגטון, CT 06790, ארה"ב	DCT-20
סרט כירורגי	היחידה לחיות מעבדה
קטמין וקסילזין	היחידה לחיות מעבדה
בטדין	היחידה לחיות מעבדה
בופרנורפין	היחידה לחיות מעבדה