$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. הכנת עכברים ואינטובציה
- מרדימים עכברים צעירים C57B1/J6 (20-25 גרם) על ידי שאיפה של 8% sevoflurane עם 0.5-1.0 L/min 100% O2 בצינור חרוט.
- בדוק את עומק ההרדמה באמצעות רפלקס הנסיגה של צביטת הבוהן.
- מניחים את העכבר בשכיבה גבית על צלחת משופעת וממשיכים לאינטובציה אורוטרכאלית.
- העבר את העכבר לכרית החימום וחבר במהירות את הצינור האורוטרציאלי למאוורר כדי להתחיל את האוורור המכני.
- התאימו את פרמטרי ההנשמה לתדירות של 160 נשימות לדקה ולנפח גאות של 10 מ"ל/ק"ג.
2. הכנה לניתוח (הן לניתוחי חבישה והן לניתוחי נטישה)
- יש לגלח ולמרוח את קרם הדפילטור מהצוואר ועד לאמצע החזה של העכברים.
- יש למרוח ג'ל עיניים על עיני בעלי החיים כדי למנוע התייבשות של הקרנית.
- הניחו בדיקה רקטלית ואת מד החמצן בכפה או בזנב לניטור טמפרטורה וחמצון דם, וקצב הלב, בהתאמה.
הערה: הרדמה גורמת להיפותרמיה משמעותית, ולכן חשוב לשמור על טמפרטורת גוף תקינה במהלך הניתוח כדי למנוע ירידה מהירה בקצב הלב.
- לשמור על הרדמה עם sevoflurane (2.0-3.0%). בדוק את רמת ההרדמה הנכונה על ידי היעדר רפלקס צביטת הבוהן.
- הניחו את העכברים בדקוביטוס ימני-צדדי על כרית חימום והדקו את הגפיים למערכת שליפת הקיבוע המגנטי בעזרת סרט הדבקה כדי לשמור על החיה בתנוחה הנכונה במהלך הניתוח (איור 1, איור 2A).
- יש לחטא את חזה העכבר עם 70% אלכוהול ואחריו תמיסת פובידון-יוד.
3. ניתוח פסים של אבי העורקים העולה
- בעזרת להב חד פעמי יש לבצע חתך עור קטן (~0.5 ס"מ) בצד שמאל ממש מתחת למפלס בית השחי ולנתח את העור.
- נתחו והפרידו בעדינות את שריר החזה ושכבות שריר אחרות עד שהצלעות הופכות גלויות. השתמשו במלקחיים עדינים והימנעו מחיתוך השריר.
- תחת מיקרוסקופ, לזהות את החללים intercostal ולפתוח חתך קטן בין 2nd ו3 rd intercostal החלל עם מלקחיים עדינים.
- משכו את הצלעות על-ידי הנחת ה-chest retractor (איור 1A).
- השתמש במלקחיים קטנים כדי לנתח ולהפריד בעדינות את האונות התימיות עד שאבי העורקים העולה הופך גלוי.
הערה: אפליקטורים כותנה צריך להיות שימושי במקרה של דימום. מי מלח סטריליים חמים צריכים להינתן תת עורית במקרה של דימום משמעותי (למשל, עורק החלב).
- השתמש במלקחיים קטנים כדי לנתח בעדינות את אבי העורקים.
הערה: אבי העורקים נחשב לנתח כאשר אין שומן או הידבקויות אחרות סביבו וניתן להקיף בקלות את הכלי במלקחיים עקומה קטנה.
- לאחר דיסקציה של אבי העורקים, מקמו ליגטורה של 7-0 פוליפרופילן סביב אבי העורקים באמצעות עזר קשירה ומלקחיים מעוקלים (איור 1B).
- מקמו את מחט 26G הקהה במקביל לאבי העורקים (קצה מכוון לכיוון ראש העכברים) (איור 1B). עבור עכברים במשקל 20-25 גרם, מחט זו גורמת להתכווצות אבי העורקים הניתנת לשחזור של 65-70%.
- צרו 2 קשרים רופפים סביב אבי העורקים ומחט 26G בעזרת 2 מלקחיים (איור 1B).
- הדקו את הקשרהראשון ומיד לאחר מכן את הקשרהשני. לאשר בקצרה את המיקום הנכון של התכווצות במהירות להסיר את המחט כדי לשחזר את זרימת הדם אבי העורקים. לבסוף, לעשות קשר3 rd (קבוצת BA).
- מקמו מחדש את בלוטת התימוס והשרירים למקומם הראשוני.
- בצע את הליך הדמה זהה להליך ההיצרות אך שומר על התפר רופף סביב אבי העורקים (קבוצת SHAM).
- חותכים את קצות התפר ומסירים את מחזיר החזה.
הערה: קצוות תפר קצרים עשויים להגדיל את ההסתברות לקשרים להתרופפות בלחץ אבי העורקים, בעוד שקצוות ארוכים הופכים את הליך הפירוק למסוכן יותר מכיוון שהידבקויות יכולות להתרחש בין התפר לאטריום השמאלי.
- סגור את דופן בית החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט קטוע או רציף באמצעות מספר התפרים הנמוך ביותר האפשרי. הדקו את קשר החזה האחרון כשהריאות מנופחות בסוף על ידי צביטה של יציאת מכונת ההנשמה למשך 2 שניות כדי לנפח מחדש את הריאות.
- סגור את העור בתפר משי/פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה.
הערה: אם נעשה שימוש במכונת הנשמה עדכנית יותר, ניתן לתכנת אותה כך שתשהה בהשראה (Setup-Advanced-Pause-Inspiration)
4. טיפול לאחר ניתוח
- יש למרוח תמיסת פובידון-יוד על אתר תפר העור.
- לשיכוך כאבים תקין, יש לתת בופרנורפין 0.1 מ"ג/ק"ג, פעמיים ביום, עד שבעל החיים מתאושש לחלוטין (בדרך כלל 2-3 ימים לאחר הניתוח).
- יש להזריק מי מלח סטריליים תוך צפקיים כדי למנוע התייבשות במקרה של דימום משמעותי במהלך הניתוח.
- כבו את ההרדמה (מבלי לנטרל את העכבר) והמתינו עד שבעל החיים ישחזר את הרפלקסים (תנועות שפם הן אות התעוררות) ויתחיל לנשום באופן ספונטני.
- הסר את צינורית קנה הנשימה.
- תן לחיה להתאושש באינקובטור ב 37 °C (77 °F).
- יש להחזיר את בעל החיים לחדר מחזור אור/חושך של 12 שעות לאחר החלמה מלאה.
5. ניתוח נטישת אבי העורקים
- שבעה שבועות לאחר מכן, לבצע את פירוק אבי העורקים במחצית החיות BA.
- חזור על כל השלבים 1.1 עד 2.6 שהוזכרו לעיל.
- יש לנתח בעדינות את הרקמות, ההידבקויות והפיברוזיס סביב אבי העורקים עד להתכווצותו נראית לעין.
- בזהירות לנתח את אבי העורקים ולהפריד את התפר מן אבי העורקים. חתכו את התפר בעזרת מספריים קפיציים זוויתיים בעלי בדיקה אחת (איור 2B).
- סגור את דופן בית החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט קטוע או רציף באמצעות מספר התפרים המינימלי האפשרי.
הערה: נסה להדק את תפר החזה האחרון כאשר הריאות מנופחות כדי למנוע דלקת ריאות.
- סגרו את העור בתפר משי/פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה.
- בצע את כל הליכי הטיפול שלאחר הניתוח כפי שהוזכר בשלב 4.
