$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. ניתוח והתקנת טבעת הגולגולת
הערה: התמיכה המלאה בהתקנת עכבר כוללת 4 חלקים, בלוק וצלחת, הטבעת להחזקת ראש העכבר ובורג לקיבוע הטבעת לבלוק (איור 1A). כל מרכיבי התמיכה הושגו i.materialise.com על ידי הדפסה תלת מימדית. הלוח עשוי מפולימר אקרילוניטריל בוטאדיאן סטירן (ABS), בלוק ובורג מפלדת אל-חלד, וטבעת מפלדת אל-חלד ברמה גבוהה (נירוסטה מפורטת גבוהה) (ראו איור 2 למידות וחומרים עבור קובצי הדפסה תלת-ממדית). הבלוק מקובע לצמיתות לתמיכה, מוברג או מודבק. ברגע שהטבעת מקובעת על גולגולת העכבר, יש להבריג אותה למחזיק הבלוק (איור 1A).
- להרטיב את השיער על הקרקפת עם מגבת נייר רטובה עם אתנול 70% לחיטוי. הסירו את כל השיער הרפוי בעזרת מגבת נייר רטובה.
הערה: לנוחיותכם, ניתן לגלח את הקרקפת לפני הניתוח.
- חותכים את הקרקפת על ידי יצירת T בקו האמצע עד 1 ס"מ ובין האוזניים כדי לחשוף את הקלבריום באמצעות מספריים עדינים סטריליים ופינצטה.
הערה: הטבעת תמוקם כך שתחפוף בין העצמות המצחיות והקודקודיות (איור 1B).
- השתמשו בפינצטה סטרילית כדי לחשוף את הגולגולת. בזהירות להסיר את periosteum עם מספריים פינצטה. השתמש בצמר גפן סטרילי ספוג במי מלח פיזיולוגיים כדי להסיר את כל periosteum וכל פסולת או שיער, אשר יכול לשנות את ההדמיה.
הערה: כדי להגביל תגובות דלקתיות, יש להיזהר מאוד שלא לפגוע בעצם.
- הסר עקבות דם על ידי שטיפה במי מלח, וייבוש מהיר של העצם עם צמר גפן יבש. מרחו את ג'ל הדבק על הטבעת, הניחו אותו על העצם החשופה ותחזקו אותו למשך מספר שניות כך שהטבעת תהיה מחוברת היטב לגולגולת.
הערה: שום דבק לא חייב להיכנס לשדה התצפית מכיוון שהוא עלול להוביל לאוטופלואורסצנטיות לא רצויה.
- מרטיבים קלות את הגולגולת עם צמר גפן שקוע במי מלח פיזיולוגיים.
- הכינו את משחת השיניים מסיליקון על ידי ערבוב זהיר של רכיבים כחולים וצהובים ביחס 1:1. יש למרוח משחת שיניים מסביב לטבעת לאיטום למניעת דליפה במהלך ההדמיה. הסירו בזהירות כל משחת שיניים או דבק שאולי נכנס לזירה.
- ממלאים את הרינג במי מלח ובודקים אם יש נזילה.
הערה: המלח משמש כמדיום טבילה למטרה של המיקרוסקופ. דימום עשוי להיות קריטי יותר בעת שימוש בעכברים עם פגמים הקשורים hemostasis. חיוני למנוע מדם להיכנס לזירה מכיוון שהוא עלול לטשטש הדמיה נוספת.
- הניחו את העכבר על התמיכה והבריגו את הטבעת על מחזיק הבלוק (איור 1C). מניחים קומפרסים מקופלים מתחת לראש החיה כדי להרים את הראש ולמנוע ניתוק של הטבעת מהגולגולת.
הערה: הראש מקובע ישירות כך שהוא מונע תנועות תמונה עקב נשימה.
- מקמו את התמיכה ואת מכלול העכבר בתא המיקרוסקופ המחומם (איור 1D).
הערה: יש להיזהר שלא להוציא את הצנתר המוחדר בכל עת.
