אוסף מחסן שומן לבן וחום מגור עכבר: הליך כירורגי לקצירת רקמת השומן הלבנה ורקמת השומן החומה מגור עכבר

תקציר

מקור: Galmozzi, A. et al. בידוד והבחנה של פרדיפוציטים לבנים וחומים ראשוניים מעכברים שזה עתה נולדו. ג'יי ויס. הוצאה (2021)

בסרטון זה, אנו מדגימים את ההליך הכירורגי לבידוד רקמת השומן הלבן התת עורית ורקמת השומן החומה הבין-סקפולרית מעכבר שזה עתה נולד.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. איסוף ועיכול מחסני שומן (יום 1)

1. הכינו שתי צינוריות של 1.5 מ"ל לכל גור: אחת לרקמת שומן חומה (BAT) ואחת לרקמת שומן לבנה (WAT). הוסף 250 μL של מלח חוצץ פוספט (PBS) + 200 μL של 2x מאגר בידוד (123 mM NaCl, 5 mM KCl, 1.3 mM CaCl₂, 5 mM גלוקוז, 100 mM 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic חומצה (HEPES), פניצילין-סטרפטומיצין, ו 4% חומצות שומן ללא חומצות שומן אלבומין בסרום בקר) לכל צינור. שמור על פתרונות סטריליים ועל קרח.
2. הכניסו את הגורים לתאים קטנים (למשל, באר ....

תוצאות

איור 1: איסוף ועיבוד של רפידות שומן. (A) ייצוג סכמטי של בידוד אדיפוציט ראשוני לבן (למעלה) וחום (למטה). (B) מחסני שומן תת-עוריים לבנים (למעלה) וחומים (תחתונים). בעכברי P0, WAT תת עורי הוא כמעט בלתי נראה, אך ניתן להבחין בו ביום ~ 2 לאחר הלידה. לעומת זאת, ל-BAT יש צבע כהה מובהק אפילו ב-P0. אצל גורים מבוגרים יותר, העטלף מוקף בשכבה שטחית דקה של WAT, הדורשת הסרה בעת ניתוח .......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
צלחות 6 בארות	קורנינג	353046
BSA ללא חומצות שומן	סיגמא-אולדריץ'	A8806
CaCl2	סיגמא-אולדריץ'	C4901
גלוקוז	סיגמא-אולדריץ'	G7021
HEPES	סיגמא-אולדריץ'	H3375
KCl	סיגמא-אולדריץ'	עמ' 9333
NaCl	סיגמא-אולדריץ'	S7653
עט/סטרפ	גיבקו	15140122
מלקחיים כירורגיים	ROBOZ כלי ניתוח Co	RS-5158
מספריים כירורגיים	ROBOZ כלי ניתוח Co	RS-5880
DPBS, ללא סידן, ללא מגנזיום	גיבקו	14190144