מיקום בדיקת דופלר לייזר: טכניקה להשתלת בדיקה מעל עורק מוחי אמצעי למדידת זרימת דם במודל מורין

תקציר

מקור: Llovera, G., et al. Modeling Stroke in עכברים: חסימת עורק מוחי אמצעי חולף דרך עורק התרדמה החיצוני. J. Vis. Exp. (2021).

סרטון זה מתאר את ההליך הכירורגי לשיתוק בדיקת דופלר לייזר מעל עורק המוח האמצעי של המוח המוריני, או MCA. הגשושית מסייעת למדוד את זרימת הדם בכלי הדם הזעירים במוח על ידי מדידת שינוי דופלר הנגרם עקב תנועת תאי הדם האדומים בתוך העורק.

פרוטוקול

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הביקורת הווטרינרית JoVE.

1. הכנה ומיקום של דופלר לייזר

1. הכינו מחזיק לבדיקת דופלר לייזר על ידי חיתוך קצה צינור 10 μL (אורך 3-5 מ"מ).
   הערה: כל המכשירים מעוקרים באמצעות מעקר חרוזים חם. משטחים גם מחוטאים לפני ואחרי ניתוח עם תרסיס חיטוי מיקרוביאלי. לפני הניתוח, האזורים סביב הראש והחזה של עכברים מחוטאים בתרסיס לחיטוי פצעים.
2. להזריק שיכוך כאבים לעכבר 30 דקות לפני הניתוח (4 מ"ג / ק"ג Carprofen ו 0.1 מ"ג / ק"ג Buprenorphine, intraperitoneally).
3. מרדימים את העכבר על ידי הצבתו בתא האינדוקציה עם קצב זרימה איזופלורני של 4% עד להפסקת תנועת הגוף הספונטנית והויבריסה.
4. הניחו את העכבר במצב נוטה באזור הניתוח עם אפו במסכת ההרדמה. שמרו על ריכוז איזופלורן של 4% למשך דקה נוספת, ואז הפחיתו אותו ושמרו אותו על 2%.
5. הגדר את כרית החימום מבוקרת המשוב המשויכת לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר ב -37 מעלות צלזיוס, והכנס בעדינות את הבדיקה הרקטלית כדי לפקח על הטמפרטורה לאורך כל ההליכים הכירורגיים.
6. החל משחת עיניים dexpanthenol על שתי העיניים.
7. יש לחטא את העור והשיער סביב עין שמאל ואוזן שמאל באתנול 70%.
8. חותכים את הקרקפת בין האוזן השמאלית לעין (1 ס"מ אורך) כדי לחשוף את עצם הגולגולת.
9. חתכו ופרשו את השריר הרקתי כדי לדמיין את ה-MCA מתחת לגולגולת.
10. תקן עם דבק את החלק החיצוני של הקצה מחזיק את בדיקת דופלר לייזר / סיב על גבי MCA שמאל עם דבק. לאחר מכן, הדביקו את העור כדי לסגור את הפצע סביב מחזיק הקצה. מרחו 2-3 טיפות של דבק מקשה כדי לזרז את התהליך. יש לוודא כי סיב דופלר הלייזר אינו מודבק וניתן להסיר אותו בקלות ממחזיק החוד בכל עת.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
רמפה של 45°	H&S Kunststofftechnik		גובה: 18 ס"מ
5 מ"ל מזרק	בראון
מערכת הרדמה לאיזופלורן	דראגר
Bepanthen pomade	באייר
עכברי C57Bl/6J	Charles נהר	000664
אתנול 70%	CLN Chemikalien Laborbedorf	521005
אתנול 96%	CLN Chemikalien Laborbedorf	522078
אתנול 99%	CLN Chemikalien Laborbedorf	ETO-5000-99-1
חוטים	דוקקול	602112PK5Re
מלקחיים זוויתיים עדינים 45	FST	11251-35
מלקחיים עדינים	FST	11252-23
מספריים עדינים	FST	14094-11
דבק	אורכסלן	BSI-112
דבק קשיח	דרכסלן ומהר	BSI-151
שמיכת חימום	בקר טמפרטורה DC FHC
איזופלורן	אבוט	B506
דופלר לייזר	פרימד	PF 5010 LDPM, מערכת Periflux 5000
בדיקת דופלר לייזר	פרימד	91-00123