$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הביקורת הווטרינרית JoVE.
1. הכנת החומר והמכשירים
- חבר את שמיכת החום כדי לשמור על טמפרטורת אזור הניתוח וטמפרטורת גוף העכבר במהלך ההרדמה ב 37 ° C.
- מספריים ומלקחיים אוטוקלאבים, מכינים תמיסת אתנול 70% ושומרים על משחת עיניים דקספנתנול זמינה, מספר חתיכות כותנה ותפר פוליאסטר קלוע 5-0 מצופה מוכן לשימוש. הכינו מזרק 1 מ"ל עם תמיסת מלח 0.9% (ללא מחט) כדי לשמור על אתר החתך של החיה hydrated. הכינו את גז ההרדמה (100% O2 + isoflurane).
- הכינו מחזיק לגשושית דופלר לייזר על ידי חיתוך קצה צינור 10 μL (אורך 3-5 מ"מ).|
הערה: כל המכשירים מעוקרים באמצעות מעקר חרוזים חם. משטחים גם מחוטאים לפני ואחרי ניתוח עם תרסיס חיטוי מיקרוביאלי. לפני הניתוח, האזורים סביב הראש והחזה של עכברים מחוטאים בתרסיס לחיטוי פצעים.
2. הכנת דופלר לייזר
- להזריק שיכוך כאבים לעכבר 30 דקות לפני הניתוח (4 מ"ג / ק"ג Carprofen ו 0.1 מ"ג / ק"ג Buprenorphine, intraperitoneally).
- מרדימים את העכבר על ידי הצבתו בתא האינדוקציה עם קצב זרימה איזופלורני של 4% עד להפסקת תנועת הגוף הספונטנית והויבריסה.
- הניחו את העכבר במצב נוטה באזור הניתוח עם אפו במסכת ההרדמה. שמרו על ריכוז איזופלורן של 4% למשך דקה נוספת, ואז הפחיתו אותו ושמרו אותו על 2%.
- הגדר את כרית החימום מבוקרת המשוב המשויכת לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר ב -37 מעלות צלזיוס, והכנס בעדינות את הבדיקה הרקטלית כדי לפקח על הטמפרטורה לאורך כל ההליכים הכירורגיים.
- החל משחת עיניים dexpanthenol על שתי העיניים.
- יש לחטא את העור והשיער סביב עין שמאל ואוזן שמאל באתנול 70%.
- חותכים את הקרקפת בין האוזן השמאלית לעין (1 ס"מ אורך) כדי לחשוף את עצם הגולגולת.
- חתכו ופרשו את השריר הרקתי כדי לדמיין את ה-MCA מתחת לגולגולת.
- תקן עם דבק את החלק החיצוני של הקצה מחזיק את בדיקת דופלר לייזר / סיב על גבי MCA שמאל עם דבק. לאחר מכן, הדביקו את העור כדי לסגור את הפצע סביב מחזיק הקצה. מרחו 2-3 טיפות של דבק מקשה כדי לזרז את התהליך. יש לוודא כי סיב דופלר הלייזר אינו מודבק וניתן להסיר אותו בקלות ממחזיק החוד בכל עת.
3.מודל MCAo חולף (חסימה)
- סובב את העכבר למצב שכיבה. הכניסו את החוטם לקונוס ההרדמה וקיבעו את הכפות בנייר דבק.
- יש לחטא את העור והשיער המקיפים את החזה ולבצע חתך בקו האמצע בצוואר באורך 2 ס"מ.
- השתמש במלקחיים כדי למשוך את העור ואת בלוטות submandibular בנפרד. השתמש retractors להחזיק את שריר sternomastoid , לחשוף את שדה כירורגי ולמצוא את עורק התרדמה המשותף השמאלי (CCA). יש לנתח את ה-CCA ללא רקמת חיבור והעצבים הסובבים אותו (מבלי לפגוע בעצב הואגלי) ולבצע קשירה חולפת לפני הביפורקציה.
- יש לנתח את עורק התרדמה החיצוני (ECA) ולקשור קשר קבוע בחלק הדיסטלי ביותר הנראה לעין. מניחים תפר נוסף מתחת ל-ECA, קרוב לביפורקציה, ומכינים קשר רופף לשימוש מאוחר יותר.
- נתחו את עורק התרדמה הפנימי (ICA) והניחו עליו אטב מיקרו-וסקולרי, 5 מ"מ מעל הביפורקציה. הקפד לא לפגוע בעצב הואגלי.
- חתכו חור קטן לתוך ECA בין הקשירה ההדוקה לקשירה הרופפת; היזהרו לא לחתוך את כל ECA.
- הציגו את חוט הלהט וקדמו אותו לכיוון CCA. הדקו את הקשירה הרופפת ב-ECA סביב הלומן כדי לאבטח בקצרה את חוט הלהט במצב זה ולמנוע דימום בעת הסרת הקליפ המיקרו-וסקולרי.
- הסר את האטב המיקרו-וסקולרי והכנס את חוט הלהט דרך האגודה למלחמה בסרטן עד שתגיע למקור ה-MCA על ידי זיהוי ירידה חדה (>80%) בזרימת הדם במוח כפי שנמדדה בדופלר הלייזר. תקן את חוט הלהט במצב זה על ידי הידוק נוסף של הקשר סביב ECA.
הערה: כאשר חוט הלהט הולך לכיוון המתאים, הוא מתקדם בצורה חלקה, ואין לראות התנגדות.
- הקלט ערכי דופלר לייזר לפני ואחרי החדרת חוט להט.
- הסר את retractor ולהעביר את שריר sternomastoid ואת בלוטות submandibular לפני תפירת הפצע. הסר את בדיקת דופלר הלייזר והנח את בעל החיים בתא התאוששות ב 37 ° C למשך 1 שעה (עד להסרת חוט להט).