מאמר שיטה

ביופסיית צביטה מונחית קולונוסקופית במודל עכבר: טכניקה לדמיין ולחלץ דגימות רקמה ממעי הגס של העכבר

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Montrose, D. C., et al. ביצוע ביופסיות צביטה מונחות קולונוסקופיות בעכברים והערכת שינויי רקמות עוקבים. J. Vis. Exp. (2021)

סרטון זה מדגים את הפרוטוקול לביצוע ביופסיית צביטה מונחית קולונוסקופ בעכבר. טכניקה זו מסייעת לנתח חזותית את לומן המעי הגס ולאסוף דגימות רקמות למחקרים מפורטים.

פרוטוקול

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. קולונוסקופיה והשראת פצע

  1. הרכיבו מראש את מרכיבי האנדוסקופ על-ידי החדרת אנדוסקופ קשיח בקוטר 1.9 מ"מ לתוך הנדן (איור 1A-B). חברו את משאבת האוויר (כדי לספק ספיקה של המעי הגס) באמצעות הצינור שסופק, לשסתום הגז בצד שמאל של הנדן ליד תעלת העבודה (איור 1C).
    הערה: למרות שהעדשה המתוארת כאן היא 0°, עדשת 30° יכולה לשמש גם למטרה זו.
  2. ודא שתעלת העבודה נמצאת במצב פתוח והכנס 3 מלקחיים ביופסיה Fr דרך תעלת העבודה וקדם אותה עד לקצה הנדן (תוך הקפדה שהיא לא תבלוט מתוך הנדן) (איור 1C). חבר את האנדוסקופ המורכב למקור האור ולמכשיר הדמיית הווידאו בהתאם להוראות היצרן.
  3. מרדימים את העכבר עם 5% isoflurane עם חמצן בתא אינדוקציה. לאחר מכן העבירו את העכבר למשטח היערכות אנדוסקופי המכיל מערכת חימום (למניעת היפותרמיה) בצד הגחוני שלו ושמרו תחת הרדמה באמצעות חרוט אף עם 2% איזופלורן עם חמצן. יש להוסיף משחה וטרינרית לעיניים כדי למנוע יובש בזמן הרדמה. ודא שהעכבר מורדם לחלוטין על ידי צביטה עדינה של כף הרגל האחורית כדי לבדוק אם יש רפלקס.
    הערה: ניתן להשתמש בכל זן או מין של עכברים בטכניקה זו; עם זאת, עדיף כי עכברים הם לפחות 8 שבועות של גיל, ולכן הם גדולים מספיק עבור ההליך.
    1. יש להוסיף משחה וטרינרית לעיניים כדי למנוע יובש בזמן הרדמה.
    2. ודא שהעכבר מורדם לחלוטין על ידי צביטה עדינה של כף הרגל האחורית כדי לבדוק אם יש רפלקס.
  4. מלאו מזרק בנפח 3 מ"ל במחט מחוברת של חולדה במי מלח חוצצים פוספט (PBS) בטמפרטורת החדר. הכנס מחט בגודל של כ-1 ס"מ לפי הטבעת של העכבר וחדיר בעדינות PBS כדי לנקות חומר צואתי. מספר כדורי צואה צריכים לצאת מהעכבר יחד עם PBS שהוחדר.
    הערה: החדרה של נפח מוגזם של PBS עלולה לגרום להיווצרות קצף בלומן אשר עלול לטשטש את הצפייה בלומן.
  5. הכנס את האנדוסקופ המורכב 0.5 ס"מ לפי הטבעת של העכבר. מקדמים את המלקחיים בביופסיה לתוך לומן פי הטבעת עד שה"לסתות" המלאות (כולל ציר) של המלקחיים נמצאות מעבר לקצה הנדן (כפי שנצפה על צג הווידאו). סובבו את המלקחיים ב-90° כך שהלסתות ייפתחו בכיוון מזרח-מערב.
  6. לביופסיה פותחים את המלקחיים ומתקדמים כ-1 ס"מ, סוגרים את המלקחיים ובתנועה אחת חלקה מושכים במהירות את המלקחיים תוך השארתם סגורים.
    1. הימנע לחלוטין insufflating המעי הגס בעת ביצוע הביופסיה. לכן, השאר את הצד הימני של שסתום הגז פתוח במהלך שלב זה; אמנם יש לציין כי עם פתיחת המלקחיים קיים סיכון של פגיעה ברירית כאשר המעי הגס נמצא במצב זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1: פריטים הדרושים לביצוע ביופסיות. (A) תמונת עדשה (a), נדן (b) ומלקחיים ביופסיה (c). (B) החדרת העדשה לנדן. (C) החדרת מלקחיים דרך תעלת העבודה של הנדן (חץ מוצק). חץ מקווקו מציין מיקום נכון לחיבור משאבת אוויר.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מלקחיים ביופסיה, 3 Frקרל סטורץ61071ZJ
מערכת מגדל קולווויוקרל סטורץצור קשר עם החברה
נדן בדיקה, 9 Fr, ערכהקרל סטורץ61029DK
טלסקופ הופקינס, 0', 1.9 מ"מ x 10 ס"מקרל סטורץ64301AA
איזופלואורןקובטרוס2905
משאבת אקווריום Pawfly MA-60אמזוןלא ישים

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים