ניטור רב-מערכתי של הפרעות אפילפטיות, בארנבת: שיטה לרישום וידאו סימולטני של EEG, אק"ג, קפנוגרפיה ואוקסימטריה במהלך התקפים מושרים

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. כדי לאפשר לארנבים להתאקלם במרסנים ולחוקר לאשר באופן אובייקטיבי ייצוב של קצב הלב וכלי הדם, מכשיר את כל הארנבים עם חיישני הלב והנשימה והעצבים ולבצע ניטור וידאו רציף במשך > שעה, 1 - 3 פעמים לכל חיה.

2. ניסוי תרופתי תוך ורידי (Pentylenetetrazol, PTZ)

1. כדי לדמיין את וריד האוזן השולי, לגלח את המשטח האחורי של האוזן של הארנב. השתמשו במגבון אתנול 70% לחיטוי האתר ולהרחבת וריד האוזן השולי. זה מצוין על-ידי האליפסה השחורה והמקווקו באיור 1F.
2. בשלב זה, בקש מנסיין אחד לכסות את פניו של הארנב עם היד שלהם כדי להפחית את הלחץ של ההליך לארנב. נסיין שני מקנן בזהירות את וריד האוזן השולי עם אנגיוקטטר סטרילי של 25 גרם.
3. ברגע שהקטטר נמצא בווריד, הניחו פקק הזרקה סטרילי בקצה הצנתר, כך שמחט תוכל להכניס תרופות לווריד. מיקום תקע ההזרקה מסומן על-ידי עיגול כחול באיור 1G.
4. צור סד על ידי עטיפת גזה 4 x 4 אינץ 'עם קלטת, כך שהוא יוצר צורת צינור והנחתו בתוך האוזן של הארנב. לאחר מכן הדביקו את הסד לאוזן כך שהקטטר מאובטח במקומו ונשאר זקוף, בדומה לאוזן שאינה צנתר.
5. להזריק 1 מ"ל של 10 יחידות USP לכל מ"ל של מלוחים heparinized.
   הערה: הצנתר וכלי הדם צריכים להיות נקיים באופן גלוי מהאוויר ולהישאר פטנט. אם הצנתר אינו בכלי השיט, המזרק לא ידחוף בקלות ותהיה הצטברות של מי מלח ברקמה התת עורית.
6. תן לארנבים מינונים מצטברים של PTZ תוך ורידי מ 1 מ"ג / ק"ג ל 10 מ"ג / ק"ג במרווחים של 1 מ"ג / ק"ג כל 10 דקות. רשום בתחילת כל מנה כדי לציין איזו חיה מוזרקת ואת ריכוז התרופה.
   הערה: זה מאפשר להעריך את ההשפעות החריפות והתוספים של מתן PTZ. לחלופין, כדי להעריך עוד יותר את ההשפעות הכרוניות של PTZ במינון נמוך, הארנב מקבל מנות חוזרות בכל ריכוז מינון נמוך, 7 מנות במינון 2 מ"ג / ק"ג, 3 מנות ב 5 מ"ג / ק"ג, ואז 3 מנות ב 10 מ"ג / ק"ג, כל מנה מופרדת על ידי 10 דקות.
7. לאחר כל מנה, עקוב בקפידה אחר וידאו-EEG-ECG-capnography-oximetry עבור כל הפרעות נוירו-לב, חשמליות ונשימתיות וראיות חזותיות לפעילות אפילפטיפורמית. שים לב לשינויים אלה בזמן אמת ובמהלך הניתוח.
   הערה: פעילות ההתקפים מתחילה לעתים קרובות תוך 60 שניות ממתן PTZ.

איור 1: ארנב מחובר לציוד.(A) מיקום אלקטרודות אק"ג, זרוע שמאל מסומנת בנקודה צהובה. זרוע ימין מסומנת בנקודה לבנה. רגל שמאל מסומנת בנקודה אדומה. הקרקע הקדמית לרגל ימין מסומנת על ידי נקודה ירוקה. (B) ארנב בריסון עם אלקטרודות אק"ג ו-EEG מחוברות. (C) ארנב צעיר במשענת עם שינויים מתאימים כדי להתאים לארנב קטן יותר, כולל מאיץ מתחת לארנב, קצף צוואר וצינור PVC חתוך. (D) ארנב בריסון עם מיקום אלקטרודות EEG. חזית ימין מסומנת בנקודה כתומה. חזית שמאל מסומנת בנקודה אדומה. עורפית ימנית מסומנת על ידי נקודה צהובה. עורפית שמאלית מסומנת על ידי נקודה כחולה. ההפניה מסומנת בנקודה שחורה. (E) ארנב בריסון עם מגרה פוטי והתקנת תא מראה. מקור האור מסומן על ידי נקודה לבנה. (F) וריד האוזן השולי לאחר שאוזן הארנב גולחה וניגוב באלכוהול. (G) ארנב עם אנגיוקטטר המודבק היטב בווריד האוזן השולית השמאלית. אתר תקע ההזרקה מסומן בנקודה כחולה. (H) ארנב עם מסכת פנים המחוברת לצינור הקפנוגרפיה על ידי חתיכת T המכילה שסתום חד-כיווני. (I) תרשים של מסיכת הפנים ופיסת T המחוברת לצינורות הקפנוגרפיה. במהלך ההשראה, אוויר החדר יכול להיכנס לחתיכת ה-T דרך שסתום חד-כיווני (חץ ירוק). במהלך התפוגה, CO2 עוזב את חתיכת T על ידי כניסה לצינור הקפנוגרפיה (חץ צהוב). בגלל הכמות הקטנה של שטח מת, מעט מאוד CO2 נשמר בחתיכת T והוא בדרך כלל פחות מ 5 מ"מ כספית.