$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. הכנת מודלים של זיהום עצם
- החזיקו ארנבים לבנים ניו זילנדים זכרים, בני 3 חודשים, בכלובים נפרדים, בתנאים מבוקרי אוויר (20 ± 1 מעלות צלזיוס) ובמחזורי תאורה בהירים-כהים של 12 שעות/12 שעות. הציעו תזונה שגרתית ומי ברז מדי יום.
- ודא כי בזמן הניתוח כי הארנב שוקל יותר מ 3 ק"ג.
- מרדימים ארנבים על ידי הזרקה intraperitoneal עם נתרן pentobarbital (3 מ"ג לכל 100 גרם של משקל הגוף). ודא שארנבים מורדמים לחלוטין על ידי כישלון להגיב לצביטת כפה. תקן ארנבים על שולחן הניתוחים במהלך הליך הניתוח.
הערה: ודא שמשך הליך המידול הוא פחות משעה אחת.
- יש לגלח את אזור השוקה הפרוקסימלי באמצעות מכונת גילוח חשמלית כנגד כיוון צמיחת השיער. לחטא את העור על ידי החלת תמיסת פובידון-יוד.
- סמן את הקצה העליון של השוקה ואת מיקום חור הקידוח להזרקה עם S. aureus (המרחק לקצה העליון של השוקה הוא 1.5 ס"מ) עם עט וסרגל. ודאו שמיקום חורי הקידוח נמצא במרכז הרמה הטיביאלית בצורה אופקית (איור 1A).
- חתכו את עור השוקה באמצעות אזמל מס' 11 ובצעו חתך של 1 ס"מ בפריאוסטאום (איור 1B, C). ניקבו חור בקוטר 2 מ"מ בשוקה באמצעות מקדח עצם חשמלי (איור 1D).
- לחץ על חורים בקוטר 2 מ"מ ברמה הטיביאלית בעזרת גליל של שעוות עצם בקוטר 2 מ"מ וגובה 2 מ"מ (איור 1E). הסירו את שעוות העצם הרזרבית לאורך המישור האופקי של הרמה הטיביאלית (איור 1F). בדקו שהחור בקוטר 2 מ"מ מלא בשעוות עצם (איור 1G).
הערה: ודא כי החורים מלאים שעווה עצם על ידי בדיקת החור עם או בלי הצפת דם.
- תפרו את הפריאוסטאום והעור עם תפר כירורגי נספג בתפר מזרן אנכי כדי למנוע מהחיה ללעוס את התפרים (איור 1H).
- הזריקו 1 x 108 CFU/מ"ל של תמיסות S. aureus (30 μL לכל 100 גרם משקל גוף) עם מזרק אספסיס 1 מ"ל (איור 1I). יש לוודא שהמחטים חודרות לשעוות העצם ולהזריק את תמיסת S. aureus למח העצם באיטיות.
- שמור על בעל החיים בתנאים חמים ונקיים כדי למנוע אובדן חום לאחר דוגמנות. עקוב אחר קצב הנשימה וקצב הלב. לאחר ההתעוררות, אכסנו את הארנבים בכלובים נפרדים עם גישה חופשית למזון ומים.
