הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
3.7K צפיות
⸱
8 ביולי 2025
מקור: Jacquier, A. et al. דוגמנות מחלת שיניים Charcot-Marie-Tooth במבחנה על ידי Transfecting עכבר Motoneurons ראשוני. J. Vis. Exp. (2019)
בסרטון זה אנו מדגימים טרנספקציה מונחית מגנטית של דנ"א פלסמיד בתרבית תאים עצבית ראשונית. מגנטופקציה משתמשת בשדה מגנטי חיצוני כדי להנחות את העברת הפלסמידים הקשורים לננו-חלקיקים מגנטיים לתוך הציטופלסמה של התא.
1. הכן מבנה רטרו-ויראלי
2. יצירת קווי תאי יצרן רטרו-ויראליים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| DMEM, גלוקוז גבוה + גלוטמין | קורנינג סלגרו | 10-013-CV | Dulbecco של שינוי של Eagle's Medium עם 4.5 גרם / ליטר גלוקוז, L-גלוטמין ונתרן פירובט |
| פ.ב.ס. | אטלנטה ביולוגיק | S11550 | |
| טריפסין-וורנה | לונזה | 17-161F | |
| 0.45 מיקרומטר מסנן מזרק | תרמו סיינטיפיק | 194-2545 | |
| פוליברן | סיגמא | H9268-10G | סטרילי מסונן ב-dH2O |
| ציפרופלוקסצין | VWR | AAJ61970-06 | |
| נתרן פירובט | קורנינג סלגרו | 25-000-CI | |
| MEM חומצות אמינו לא חיוניות | קורנינג סלגרו | 25-025-CI | |
| HEPES 1 M פתרון | קורנינג סלגרו | 25-060-CI | |
| ל-גלוטמין | קורנינג סלגרו | 25-005-CI | |
| כלי תרבית רקמה 150 מ"מ | גריינר ביו-וואן | 639160 | |
| צלחת שטוחה 6 בארות שטופלה בתרבית Tisue | גריינר ביו-וואן | 657160 | |
| מסננות תאי ניילון 70 מיקרומטר | בז | 352350 | |
| עכבר IL-3 | Invitrogen | PMC0033 | |
| IL-6 אנושי | Invitrogen | PHC0063 | |
| גורם תאי גזע של עכבר | Invitrogen | PMC2113L | |
| 10x PBS | קורנינג סלגרו | 46-D13-ס"מ | |
| חיץ הנקס | קורנינג סלגרו | 21020147 | |
| BD 10 מ"ל מזרק | ב.ד. | 300912 | |
| BD 1 מ"ל מזרק | ב.ד. | 309659 | |
| 27 G x 1/2 BD מחט גלישה מדויקת | ב.ד. | 305109 | |
| 30 G x 1/2 BD מחט גלישה מדויקת | ב.ד. | 305106 |
