צביעת ספרנין-O: שיטה להמחשת השלמות המבנית והסלולריות של הסחוס

תקציר

מקור: Zhao, Y., et al. הקמת מודל המושרה בניתוח בעכברים כדי לחקור את התפקיד המגן של progranulin בדלקת מפרקים ניוונית. J. Vis. Exp. (2014).

בסרטון זה אנו מדגימים הליך צביעה לסחוס באמצעות ספרנין-תפוז. שיטה זו מסייעת לדמיין את הסחוס ולזהות כל נזק.

פרוטוקול

1. ספרנין O צביעה

1. נתחיל בשקופיות הזכוכית המכילות קטעי קשת סדרתיים המשתרעים על פני אזור ממרכז הקונדיל הלטרלי ועד למרכז הקונדיל המדיאלי של מודל עכבר שעבר המתת חסד עם המניסקוס המדיאלי המעורער.
2. לאחר מכן, deparaffinize שקופיות ב oxylene, ולחות אותם בשיפוע אתנול למים מזוקקים. לאחר מכן, השקופיות מוכתמות באמצעות תמיסת ברזל המטוקסילין של Weigert, תמיסת 0.05% ירוק מהיר (FCF), תמיסת 1% חומצה אצטית ותמיסת 0.1% ספרנין O. הרכבה של המגלשות באמצעות מדיום שרף.
3. ציון שקופיות מוכתם O ספרנין מבוסס על אובדן פרוטאוגליקן (צבע אדום) בסחוס ואחוז הרס במבנה הסחוס, לעשות ניתוח סטטיסטי עבור ציון היסטולוגי.