מאמר שיטה

שיטת צביעה כפולה: טכניקה להמחשת אינטראקציות צמחים-פטריות באמצעות אדום רותניום וכותנה כחולה לקטופנול

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Marques, J. P. R. ו- Nuevo, L. G. שיטת צביעה כפולה לזיהוי פקטין באינטראקציה בין צמח לפטרייה. J. Vis. Exp. (2022).

סרטון זה מדגים שיטת צביעה כפולה באמצעות אדום רותניום וכחול כותנה לקטופנול כדי להמחיש פקטין וכיטין במהלך אינטראקציות צמחיות-פטרייתיות בצמח חלודת קפה. ההליך מסייע להבין את מנגנוני ההגנה של צמחים במהלך זיהומים פטרייתיים.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. תהליך צביעה כפולה

  1. התחילו עם קטעי עלים דקים במיוחד משובצים שרף של Coffee arabica cv. Catuaí נגוע בחלודת קפה. כסו את המקטעים ב-2 מ"ל של 5% כותנה כחולה בלקטופנול (40% גליצרול, 20% פנול ו-20% חומצה לקטית במים) וחממו אותם על פלטה חמה בטמפרטורה של 45°C במשך 5 דקות (איור 1A).
  2. הסירו את עודפי הצבע על-ידי שטיפת המגלשה שלוש פעמים בכוס מלאה במים מזוקקים (איור 1B-D).
  3. כתם עם 2 מ"ל של 0.01% רותניום אדום במים למשך דקה אחת (איור 1E).
  4. הסירו את עודפי הצבע על-ידי שטיפת המגלשה שלוש פעמים בכוס מלאה במים מזוקקים (איור 1F,G).
  5. הניחו טיפת מים מזוקקים על המקטעים וכסו את המקטעים בכיסוי בגודל 24 מ"מ x 60 מ"מ לביצוע ניתוח מיקרוסקופ אור.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1: פרטים על השלבים הבודדים של פרוטוקול הצביעה הכפולה. (A) כסו את החלקים בטיפות לקטופנול כחול כותנה וחממו את המגלשות על פלטה חמה בטמפרטורה של 45°C. (B-C) הסירו את עודפי הצבע על ידי שטיפה במים מזוקקים. (D) קטעים על מגלשות הזכוכית לאחר הכביסה (מסומנים בחצים). (E) כסו את החלקים בטיפות של רותניום אדום. (פ-ג) הסירו את עודפי הצבע על ידי שטיפה במים מזו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
פלטה חמהדובסרSSCD25X30-110Vצביעה
כותנה כחולה לקטופנולמטאקווימיקה70SOLSIG024629צביעה
מיקרוסקופזיס#490040-0030-000לכידת תמונות
מגש כוסות יציקה מפלסטיקEMS10176-30צביעה
רותניום אדוםלבהוס#006004צביעה
חזון אקסיון תוכנהזיס#410130-0909-000לכידת תמונות

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים