בדיקת סינון של מולקולות קטנות Nematicides: שיטת תפוקה בינונית לסינון נמטיקוטים פוטנציאליים נגד דיפסאצ'י דיפסאצ'י

Abstract

מקור: Cammalleri, S. R., et al. גידול והקרנה של צמח נמטודה טפילית Ditylenchus dipsaci. J. Vis. Exp. (2022).

בסרטון זה אנו מדגימים בדיקת סקר לזיהוי היעילות של נמטידים של מולקולות קטנות נגד נמטודות. Nematicides נחשבים יעילים אם הם גורמים לירידה במספר הנמטודות הניידות במדגם לאחר החשיפה.

Protocol

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE

1. מסך מולקולה קטנה במבחנה

1. הכינו את לוחות הבדיקה לפי השלבים הבאים.
   1. יוצקים מים מזוקקים אוטוקלאביים לתוך שוקת סטרילית, ובאמצעות פיפטה רב ערוצית, פולטים 40 מיקרוליטר מים מזוקקים מהשוקת לכל באר של צלחת שטוחה בעלת 96 בארות.
2. הכינו את כלי ההצמדה והוסיפו את הכימיקלים.
   1. הציבו מגשי פינר (ראו טבלת חומרים) ליד להבת מבער בונזן על ספסל במעבדה. הוסף את הפריטים הבאים למגשי פינרים עוקבים: 25 מ"ל של תמיסת ניקוי פינים, 35 מ"ל של 5....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
50 מ"ל	פירקס	CLS100050
96 צלחת באר	זארשטדט	83.3924
רדיד אלומיניום	אלקאן פלוס
ניתוח היקף	לייקה	Leica MZ75
DMSO	סיגמא-אולדריץ'	472301-500 מ"ל
מגלשת זכוכית	מאגנה	60-1200
נייר ניקוי ללא סיבים	סמנכ"ל מדעי	סמנכ"ל 522-100
קצוות פיפטה עם שמירה נמוכה (200uL)	LABFORCE	1159M44
פיפטה רב ערוצית	מחקר אפנדורף פלוס	3125000036
נאוה	סיגמא-אולדריץ'	S8045-500G
פרפילם	במיס	PM-996
פתרונות ניקוי פינים	סמנכ"ל מדעי	VP110A
פינר	סמנכ"ל מדעי	VP381N
מגשי שטיפה PINNER	סמנכ"ל מדעי	סמנכ"ל 421
מאגר מגיב עם מכסה עבור פיפטות רב ערוציות	סיגמא-אולדריץ'	BR703459
טלטול אינקובטור	ניו ברנזוויק סיינטיפיק	I26