הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
1.1K צפיות
⸱
8 ביולי 2025
מקור: Kumar, S. B. et al., דלדול גלוקוז חוץ-תאי כמדד עקיף לספיגת גלוקוז בתאים וברקמות ex vivo.J. Vis. Exp.(2022)
בסרטון זה, אנו מדגימים טכניקת ex vivo למדידת דלדול אנלוגי של גלוקוז חוץ-תאי באיברי עכבר שנקצרו. זה כרוך לדגור על רקמת העכבר בתמיסה המכילה deoxyglucose מסומן פלואורסצנטי, אשר נלקח על ידי התאים. ספיגת הגלוקוז האנלוגית יכולה להיקבע בעקיפין על ידי מדידת הפלואורסצנטיות של המדיום המודגר.
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
הערה: כל ההליכים חייבים להיעשות בארון בטיחות ביולוגית Class II עם המפוח דולק והאורות כבויים.
1. הכנת חומרים
הערה: כל החומרים מפורטים בטבלת החומרים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
איור 1: קינטיקה של דלדול חוץ-תאי של גלוקוז FD באיברים שונים ex vivo. (A-C) עכברי Lepob הוזרקו עם רכב (PBS, n = 4), אינסולין (12 IU/kg BW, n = 3) ו- AAC2 (1 nmol/g BW, n = 3). לאחר 15 דקות, רקמות נותחו ובודדו. חצילים של (A) שומן בטני, (B) כבד ו-(C) מוח הודגרו ב-FD-גלוקוז (0.29 מילימול). הקינטיקה של דלדול ג.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| צלחות 96 בארות | בז | 353227 | כלי פלסטיק |
| ב6. עכברים זכרים V-Lepob/J | מעבדת ג'קסון | מספר מניה 000632 | עכברים |
| BioTek Synergy H1 קורא מיקרו-צלחות מודולרי רב-מצבי (Fisher Scientific, ארה"ב) | Fisher Scientific, ארה"ב | Fisher Scientific, ארה"ב | מכשיר |
| אינקובטור תאים | פורמה | מעיל מים סדרה II | מכשיר |
| דיאטה (דיאטת עכברים/חולדות, מוקרן) | אנוויגו | Teklad LM-485 | דיאטה |
| איזופלורן, 5% | הנרי שיין | NDC 11695-6776-2 | מרדים |
| תמיסת אגירה פוספט | סיגמא-אולדריץ' | DA537-500 מ"ל | תרבית תאים |
| פניצילין/סטרפטומיצין (P/S) | Gibco/ThermoFisher | 15140-122 | תרבית תאים |
| DMEM ללא גלוקוז ופנול אדום | Gibco/ThermoFisher | A14430-01 | תרבית תאים |
| פלואורסצנטי 2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3- benzoxadiazol-4-yl) amino]-Dglucose) | סיגמא | 72,987-1 מ"ג | בדיקת מעבדה |
| מדיום הנשר המותאם של דולבקו | Gibco/ThermoFisher | 11965-092 | תרבית תאים |
| סרום בקר | Gibco/ThermoFisher | 161790-060 | תרבית תאים |
| אתנול | סיגמא-אולדריץ' | E7023-500 מ"ל | מגיב |
