מאמר שיטה

ספקטרוסקופיית מתאם מפוזרת להערכת זרימת דם מוחית במודל עכבר

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Brothers, R. O., et al. ניתוח מערכות של התגובה הנוירו-דלקתית וההמודינמית לפגיעה מוחית טראומטית. J. Vis. Exp. (2022)

בסרטון זה אנו מדגימים את טכניקת ספקטרוסקופיית המתאם המפוזר למדידת זרימת דם מוחית במודל עכברי של פגיעה מוחית טראומטית קלה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE

1. הערכת זרימת הדם במוח באמצעות ספקטרוסקופיית מתאם מפוזר

  1. רכישת נתוני DCS
    1. הסירו שיער על הקרקפת. מכיוון ש- DCS פועל בצורה הטובה ביותר בהיעדר שיער, יש צורך להסיר פרווה על הראש לפני תחילת הניסויים. בדרך כלל, הסרת שיער נעשית 1-3 ימים לפני תחילת המחקר.
      1. גרמו לעכברים עם 4.5% איזופלורן ב-100% חמצן למשך 45 שניות ושמרו עם 1-2% איזופלורן ב-100% חמצן.
      2. לגלח את הראש בין העיניים לאוזניים. לאחר מכן, השתמשו בקרם מסיר פרווה כדי להסיר פרווה על הראש כמו באיור 1.
      3. לאפשר לבעל החיים להתאושש מהרדמה על כרית חימום ולאחר מכן לחזור לכלוב.
    2. למדוד את זרימת הדם במוח עם DCS. כדי למזער את התנועה במהלך המדידה, חקרו עכברים תחת הרדמה איזופלורנית קצרה.
      הערה: נטר חזותית את תגובת הנשימה וצביטה בבוהן לאורך המדידות והתאם את ריכוז האיזופלורן לפי הצורך כדי להבטיח עומק הרדמה עקבי. שינויים משמעותיים בעומק ההרדמה עלולים לשנות את זרימת הדם בהתחשב בהשפעות הוואסומולטוריות הידועות של איזופלורן.
      1. יש להשרות עם 4.5% איזופלורן ב-100% חמצן למשך 45 שניות, ולאחר מכן לשמור עם איזופלורן 1.0-1.75% ב-100% חמצן. ודא עומק מספיק של הרדמה על ידי היעדר תגובת צביטה בבוהן ונשימה רגילה (בין ~ 60-80 נשימות לדקה).
      2. לאחר פרק זמן של 2 דקות של ייצוב, הניחו בעדינות את חיישן DCS מעל האונה הימנית, כך שהקצה העליון של החיישן האופטי יתיישר עם החלק האחורי של העין והצד של החיישן יסתדר לאורך קו האמצע (איור 1). הנח יד על החיישן כדי להגן עליו מפני אור החדר. רכוש 5 שניות של נתונים (רכישה של 1 הרץ).
      3. מקם מחדש את החיישן מעל ההמיספרה השמאלית, וקבל 5 שניות של נתונים.
      4. חזור על הפעולה 3 פעמים / חצי כדור כדי להסביר הטרוגניות מקומית מתחת לפני הרקמה.
    3. שחזור
      1. הוציאו את העכבר מההרדמה והניחו אותו על משטח חימום.
      2. לאחר שהעכבר חוזר לרפלקס הנכון שלו, החזירו אותו לכלוב.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1: מדידת זרימת דם מוחית באמצעות ספקטרוסקופיית מתאם מפוזר. (A) חיישן אופטי מוחזק ידנית בעדינות מעל ההמיספרה הימנית כדי למדוד את זרימת הדם בעכבר מורדם. (B) מיקום חיישן מייצג על ההמיספרה הימנית. קווי המתאר של החיישן מיוצגים כמלבן שחור מקווקו, ומיקום סיבי המקור והגלאי הם בעיגולים אדומים וכחולים, בהתאמה. החיישן ממוקם כך שהקצה הקצר של החיישן מתיישר עם החלק האחורי של העין והקצה הארוך ש...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
קרם דפילטוריאמזוןנאיר
DiH2OVWRVWRL0200-1000
לוח מתאם אוטומטי לחומרהwww.correlator.comדגם Flex05-8ch
איזופלורן 250 מ"לMED-VET הבינלאומיRXISO-250
מגבון (11.2 x 21.3 ס"מ)VWR21905-026
מערבל מערבולות מעבדהVWR10153-838
LabViewמכשירים לאומייםLabVIEW
Luminex 200, HTS, FLEXMAP 3D או MAGPIX עם תוכנת xPONENTחברת לומינקס
שפת תכנות R
RStudiowww.rstudio.com
סוניקטור
1 מטר צינור מדריך אקרילימקמאסטר-קאר49035K85
4 פוטודיודת מפולת פוטוניםפרקין-אלמרSPCM-AQ4C-IO
400 סיב מקור רב-מצבי של UMThorlabs Inc.FT-400-EMT
בורג 54 גרםאייס חומרהקוטר גוף בסיסי 0.95 ס"מ, קוטר ראש 2 ס"מ, אורך 10.2 ס"מ אורך
סיב גלאי חד-מצבי 780 ננומטרThorlabs Inc.780 כ"ס
לייזר באורך קוהרנטיות ארוכה של 852 ננומטרTOPTICA PhotonicsiBeam חכם

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Avalanche

מאמרים קשורים