In Vivo רישומים אלקטרופיזיולוגיים של פעילויות מוחיות מאתרים מרובים בחולדות

תקציר

מקור: Haumesser, J. K., et al. Acute In Vivo הקלטות אלקטרופיזיולוגיות של פוטנציאלי שדה מקומיים ופעילות רב-יחידתית מהמסלול ההיפר-ישיר בחולדות מורדמות. J. Vis. Exp.(2017).

סרטון זה מדגים את ההליך המפורט להכנת חולדה מורדמת להקלטות אלקטרופיזיולוגיות של פעילות מוחית מאתרים מרובים. הקרקפת מנותחת כדי לגשת לגולגולת, וחורים נקדחים במקומות מדויקים כדי להתקין ולאבטח אלקטרודות. אלקטרודות מיקרו-חוט טונגסטן מוכנסות לאחר מכן למיקום היעד כדי להקליט את הנתונים.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. כירורגיה

1. לרישומים אלקטרופיזיולוגיים, יש להשתמש באורתן (CAUTION) להרדמה.
   זהירות: אורתאן הוא רעיל ומסרטן, ולכן יש להקפיד תמיד על תקנות הבטיחות ודף הנתונים שניתן על ידי יצרן החומר.
2. הכינו תמיסה של 200 מ"ג/מ"ל אורתן בתמיסת מלח רפואית 0.9% נתרן כלורי (NaCl).
3. יש לתת אורתן תוך צפקי במשקל גוף כולל של 1.3 גרם/ק"ג. בהתאם לזן החולדה, ייתכן שיהיה סביר לפצל את המינון לשתי מנות עם מרווח של 15 דקות בין הזריקות על מנת לשפר את בטיחות ההרדמה.
4. בדוק....

תוצאות

איור 1: פעילות רב-יחידתית אופיינית ממסלול אלקטרודות דורסו-ונטרלי המכוון ל-STN. (A) רישומים מרובי יחידות של הגרעין התלמי הפוסט-מדיאלי הגחוני (VPM), הזונה אינסרטה (ZI), הגרעין התת-תלמי (STN) והחומר השחור pars reticularis (SNr). ה- VPM מציג קוצים דלילים ומרווחים באופן לא סדיר באמפליטודה גבוהה. דפוס זה של קוצים נפסק כאשר מתקרבים ל- ZI. כאשר האלקטרודה נכנסת ל-STN ניתן להבחין בדפוס ירי טיפוסי בתדר גבוה עם .......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
אלקטרודות אפידורליות מותאמות אישית Ag/AgCl	Goodfellow GmbH D-61213 באד נאוהיים, גרמניה info@goodfellow.com	מזהה מוצר AG005127 עבור חוט כסף 99.99%	אלקטרודות Ag/AgCl יאפשרו איכות אות טובה יותר, אך ניתן להשתמש בהן רק בניסויים חריפים. החלפה אפשרית: אלקטרודות נירוסטה
מחזיק סטריאוטקסי עם בלוק אקרילי	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, ארה"ב	מזהה מוצר דגם 1770 מחזיק אלקטרודות סטנדרטי	יש לוודא שלבלוק האקרילי יש גומחות המתאימות למערך האלקטרודות למטרה הרצויה. בלוקים אקריליים ניתן לשנות בקלות עם קובץ כדי לקבל את התצורה הרצויה. החלפה אפשרית: מחזיקי אלקטרודות בבנייה עצמית
אלקטרודות מיקרו-חוט טונגסטן 1.5 MΩ עכבה	Microprobes.com 18247-D דרך פלאוור היל גייטרסבורג, מרילנד, 20879 ארה"ב	מזהה מוצר: WE3ST31.5A5-250um	1.5 MΩ יש צורך להקליט MUA ו- LFP בו זמנית. החלפה אפשרית: ניתן להשתמש במיקרואלקטרודות מחומרים שונים. האלקטרודות צריכות להיות ישרות, חזקות ודקות ככל האפשר.
כלי יישור חולדות	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, ארה"ב	מזהה מוצר: דגם 944 כלי יישור חולדות	מאפשר את הכיוון המדויק של המוח כדי להתאים אטלסים סטריאוטקסיים. החלפה אפשרית: מחזיק סטריאוטקסי עם צינורית
אקריליק דנטלי דו-רכיבי	Associated Dental Products Ltd. Kemdent Works, Purton, Swindon Wiltshire, SN5 4HT, בריטניה	אבקה מהירה חד-צדדית שקופה 225 גרם, קוד מוצר: ACR803; נוזל מהיר סימפלקס 150 מ"ל, קוד מוצר: ACR920	בהתאם לאלקטרודות בהן נעשה שימוש, דבק-על עשוי להיות חלופה קלה, אם האלקטרודות קטנות וקלות משקל. תחליף אפשרי: דבק-על (על בסיס ציאנקרילט)
כלוב פאראדיי	בנייה עצמית		כלוב פאראדיי ראוי יהיה ההגנה הטובה ביותר מפני ממצאים אלקטרומגנטיים, אבל כל מה שניתן ליצור בצורת קופסה או להחיל על מסגרת ועשוי מחומר מוליך עשוי לעזור. החלפה אפשרית: רדיד אלומיניום או רשת נחושת
מערך אלקטרופיזיולוגי עם תוכנת הקלטה ויכולות מיון דוקרנים מקוונות	OmniPlex® Neural Data Acquisition System Plexon Inc 6500 Greenville Avenue, סוויטה 700<של/> דאלאס, טקסס 75206 ארצות הברית		תוכנת מיון לא מקוונת היא חלופה פוטנציאלית, סקריפטים ותוכנות מרובים ניתן למצוא בחינם בקהילת הקוד הפתוח.