התנהגות ניווט של זחלי דרוזופילה בתגובה לגירוי אופטוגנטי של נוירוני חוש הריח

תקציר

מקור: Clark, D. A., et al. מעקב אחר התנהגות זחלי דרוזופילה בתגובה לגירוי אופטוגנטי של נוירוני ריח. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מדגים מחקר על התנהגות הניווט של זחלי דרוזופילה בתגובה לגירוי אופטוגנטי של נוירונים חושי ריח (ORN). זחלי דרוזופילה טרנסגניים המבטאים תעלות יונים רגישות לאור ב-ORN ממוקמים על אגרוז בתוך זירת התנהגות. גירוי אופטוגנטי עם אור פותח את הערוצים, גורם לזרם קטיון שמפעיל את העברת האות למוח, והתנהגות הניווט נרשמת.

פרוטוקול

1. בניית זירת התנהגות והכנת חומרה שתאפשר גירוי אופטוגנטי בזירת ההתנהגות

1. כדי לבנות זירת התנהגות נטולת אור, בנו קופסה במידות של 89 x 61 x 66 ס"מ³ (אורך 35 אינץ' x רוחב 24 אינץ' x גובה 26 אינץ') עשויה מיריעות אקריליק פרספקס בצבע שחור (בעובי 3 מ"מ) (ראה טבלת חומרים). חומרים לבניית קופסה כזו צריכים להיות זמינים בחנויות חומרי בניין מקומיות. הניחו את התיבה הזו על משטח עליון בחדר ההתנהגות (איור 1A).
2. הרכיבו מצלמת CCD (ראשי תיבות של Universal Universal Serial Bus (USB) 3.0 עם אפיק טורי אוניברסלי בשחור-לבן (USB) המצוידת במסנן אינפרא-אדום (IR) בעל מעבר ארוך של 830 ננומטר ובעדשת הרכבה F1.4 C בגודל ....

תוצאות

איור 1: זירת התנהגות ומדיום זחילה של זחלים. (A) מבט קדמי על זירת ההתנהגות של הקופסה השחורה. הדלת הפתוחה של הזירה חושפת מצלמת CCD התלויה מתקרת הקופסה. (B) מבט תחתון על משטח מתכת המכיל פסי תאורת LED אדומים המשמשים לגירויים אופטוגנטיים מותקן סביב מצלמת CCD. (C) מבט מלמעלה על אמצעי הזחילה של הזחל המשמש בבדיקה. לפני תחילת רישום תנועת הזחל, ~ 20 זחלים שטופים מונחים לאורך מ.......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מצלמת וידאו ללכידת תנועת הזחל
מצלמת CCD	אדמונד אופטיקה	106215
מתאם חוט מסנן M52 ל- M55	אדמונד אופטיקה	59-446
מחזיק מסנן בעל הברגה מרובעת בגודל 2 אינץ' לעדשות הדמיה	אדמונד אופטיקה	59-445
RG-715, מסנן מעבר ארוך בגודל 2 אינץ' רבוע	אדמונד אופטיקה	46-066
אלקטרוניקה להתקנה אופטוגנטית
פטל פאי 2B	RASPBERRY-PI.org	RPI2-MODB-V1.2
ספק כוח ניתן לתכנות של 3 ערוצים	newegg.com	9SIA3C62037092
ממסר מצמד אופטי 8 ערוצים	amazon.com	6454319
630nm רצועות נורות LED עם ארבע שורות	environmentallights.com	אדום3528-450-סליל
פסי LED 850nm	environmentallights.com	wp-4000K-CC5050-60x2-kit
תוכנה
אובונטו MATE v16.04	נובונטו	https://github.com/yslo/nubuntu
פריטים אחרים
פרספקס שחור אקריליק	הום דיפו	MC1184848bl
מזון זבובים וריאגנטים אחרים
מזון זבובים Nutrifly	ג'נסי סיינטיפיק	66-112
אבקת אגרוז	ג'נסי סיינטיפיק	20-102
צלחת פטרי מרובעת בגודל 22 ס"מ על 22 ס"מ	VWR בע"מ	25382-327
DMSO	סיגמא-אולדריץ'	D2650
סוכרוז	סיגמא-אולדריץ'	84097
כל הטרנס-רטינל	סיגמא-אולדריץ'	₪600
זבובים
UAS-IVS-CsChrimson	מרכז בלומינגטון דרוזופילה סטוק	55134
אורקו-גל4	מרכז בלומינגטון דרוזופילה סטוק	26818
OR42A-Gal4	מרכז בלומינגטון דרוזופילה סטוק	9970
Or7a-Gal4	מרכז בלומינגטון דרוזופילה סטוק	23907