מאמר שיטה

רישום תגובות שמיעתיות בגזע המוח אצל גור חולדות

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Chang, A. et al., Auditory Brainstem Response and Outer Hair Cell Patch Patch Patch Recording in Postnatal Rats. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מדגים שיטה להקלטת תגובות גזע המוח השמיעתיות (ABRs) מגורי חולדות. הוא מתאר את השלבים למיקום אלקטרודות, יישום גירוי קול וניתוח עיבוד אותות בגזע המוח כדי להעריך תגובות עצביות.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הקלטת תגובת גזע המוח השמיעתי (ABR)

  1. הרדימו חולדות Sprague Dawley (SD) (גורים בני 1-14 יום ובוגרים בני חודשיים, שני המינים) בזריקה אחת של 1.5% נתרן פנטוברביטל (22 מ"ג/ק"ג לגורים ו-30 מ"ג/ק"ג לבוגרים, תוך צפקית).
  2. הניחו את בעל החיים המרדים בתבנית פוליאתילן-קצף כדי לשתק את גוף החיה. הניחו את בעל החיים על שולחן נגד רטט בחדר להחלשת קול. שמור על טמפרטורת הגוף של בעל החיים על 37.5 °C (75 °F) עם כרית חימום.
  3. נגבו את אזור הראש באתנול 70% (vol/vol). על ידי שימוש במספריים עדינים, בצע חתך 1-2 מ"מ ונטרולטרלי לפינה החיצונית כדי למקם את אלקטרודת הייחוס או הקרקע. אלקטרודת מחט תת-עורית (אלקטרודת הקלטה) ממוקמת מעל קודקוד הגולגולת (איור 1A).
  4. באמצעות מחולל הפונקציות, צור התפרצויות טונים מכוילות (1 אלפיות השנייה עלייה/ירידה, 3 מילישניות מישור) בתדרים שונים (2, 4, 8, 16, 24 ו-32 קילוהרץ) ובעוצמות שונות (ירדו מ-85 ל-10 dB SPL בשלב של 5 dB). שנה את התדר והמשרעת באופן ידני או באמצעות מחשב. העבר גירויי קול דרך רמקול אלקטרוסטטי הממוקם במרחק של 10 ס"מ לכיוון ראש החיה.
  5. סנן (100-1,000 הרץ), הגבר וממוצע (פי 256) את פוטנציאל הצליל באמצעות מעבד רב-תכליתי כדי לקבל את ה- ABR. עקבות ABR מנוטרים באופן מקוון ומאוחסנים לניתוח לא מקוון. לוקח בערך 40 דקות להשלים את הקלטת ABR מחיה אחת.
    הערה: בדרך כלל ניתן לזהות שלוש עד שבע פסגות (גל I עד גל VII) עם השהיות של פחות מ-15 מילישניות (איור 1B). סף ABR מוגדר כרמת הצליל המינימלית שבה ניתן לזהות גלים I ו- II.
  6. המתת חסד לפני שהחיות מתעוררות מהרדמה (עם הזרקה intraperitoneal של 0.3 מ"ל 1.5% נתרן pentobarbital).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1. הקלטת תגובה שמיעתית בגזע המוח. (A) אלקטרודת ההקלטה הוחדרה לקרקפת בין שתי אוזניים. אלקטרודות הארקה ואלקטרודות ייחוס הונחו מתחת לפינה השמאלית והימנית, בהתאמה. רמקול שדה פתוח הוצב במרחק של 10 ס"מ מקצה האף של החולדה. (B) שתי צורות גל מייצגות של ABR בתגובה להתפרצויות טונים SPL של 16 קילוהרץ, 80 dB. עקבות עליונות תועדו מגור P8. עקבות תחתונות שתועדו מחולדה בוגרת. המ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Pentobarbital נתרןסיגמאP37611.5% במים
חולדת SDמרכז חיות ניסוי של האוניברסיטה הרפואית הדרומית
רמקול ES1טאקר-דיוויס טכנולוגיות
מערכת TDT 3טאקר-דיוויס טכנולוגיות
תוכנת SigGenRPטאקר-דיוויס טכנולוגיות
תוכנת BioSigRPטאקר-דיוויס טכנולוגיות
jClampפתרונות מדעיים
מערכת איסוף נתונים עם רעש נמוךאקסון 1440א

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים