אפנון סינפטי בדרוזופילה לאחר חשיפה לאור ממושך

תקציר

מקור: Sugie, A., et al. ניתוח אפנון סינפטי של פוטורצפטורים מסוג Drosophila melanogaster לאחר חשיפה לאור ממושך. J. Vis. Exp. (120)

סרטון זה מדגים את גידולו של Drosophila melanogaster בתנאי אור ספציפיים כדי לחקור את תפקידם של חלבוני Bruchpilot בשחרור מוליכים עצביים ואת המודולציה הנובעת מכך של פעילות סינפטית.

פרוטוקול

1. תנאי חשיפה לאור

1. משלב הזחל ועד האקלוסיה, שמרו על הזבובים במחזור אור של 12 שעות/12 שעות חושך (LD) בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס (איור 1A).
2. אספו את הזבובים 0 - 6 שעות לאחר האקלוסיה והכניסו אותם לבקבוקון חדש המכיל מזון לזבובים.
3. הכניסו את הבקבוקונים למתלה שרף אקרילי שקוף בעל שלוש מדרגות (גובה של 41 ס"מ, בסיס של 21 ס"מ, עובי של 4 ס"מ וגובה של 13 ס"מ לכל מדרגה) (איור 1B).
4. כוונן את המרחק בין ארון התקשורת ללוח LED כדי לספק תאורה בעוצמה ממוצעת של 1,000 לוקס באמצעות מד אור דיגיטלי (איור 1C).
5. שמרו על הזבובים למשך 1-3 ד' באחד מהתנאים הבאים: חושך קבוע (DD), מחזור אור של 12 שעות/12 שעות חושך (LD), או אור קבוע (LL) ב-25°C באינקובטור קטן (איורים 1A ו-1C).

תוצאות

איור 1: הכנת תנאים לחשיפה לעוצמת אור מוגדרת. (A) פרוטוקולי חשיפה לאור לאחר אקלוסיה. DD, חושך מתמשך; LD, 12 שעות אור / 12 שעות כהות; LL, חשיפה מתמדת לאור. מוחות של זבובים נותחו בזמנים שצוינו בסוגריים (הותאם מפרסום קודם9). (B) בקבוקונים מיושרים במדף אקרילי שקוף מותאם אישית. (C) מתלה האקריליק ושני לוחות LED מוכנסים לאינקובטור קטן ומותאמים לחשיפת הזבובים לעוצמת אור של 1,000 לוקס.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
הבקבוקון	Hightech, יפן	MKC-20
תקע	Thermo Fisher Sciehtific, ארצות הברית	AS-275
מתלה שקוף בהתאמה אישית עשוי שרף אקרילי	תאגיד שין-שין, יפן		גובה 41 ס"מ, בסיס 21 ס"מ, עובי 4 ס"מ וגובה 13 ס"מ לכל מדרגה
אינקובטור מגניב	MITSUBISHI ELECTRIC, יפן	CN-40A
פאנל LED	MISUMI, יפן	LEDXC170-W
מד אור דיגיטלי	CEM	DT-1301
משטח טיסה	Tokken, יפן	TK-HA03-S