Method Article

גירוי שורש עצב שמיעתי והקלטות זרם פוסט-סינפטי בפרוסת טריז במוח עכבר

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Fischl, M. J., et al. In Vitro Wedge Slice Preparation for mimiking in vivo Neuronal Circuit Connectivity. J. Vis. Exp.(2020)

סרטון זה מדגים פרוטוקול לגירוי שורש עצב השמיעה ולרישום זרמים פוסט-סינפטיים בנוירונים אוליבוקוכלריים מדיאליים בפרוסות טריז במוח עכבר.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הנוגעים לדגימות בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המתאימה לבדיקה אתית של בעלי חיים.

1. הגדרה והקלטה של אלקטרופיזיולוגיה

  1. מניחים את פרוסת הטריז בתא ההקלטה ומהדקים את הפרוסה בעזרת נבל או מערכת ייצוב. יש לנקב את הרקמה ברציפות בקצב של 7-10 מ"ל/דקה עם ACSF חם (35°C) מבעבע בקרבוגן.
  2. זהה נוירונים MOC אוליבוקוכלריים מדיאליים מסומנים גנטית בגרעין הגחון של גוף הטרפז VNTB באמצעות אפיפלואורסנציה עם מסנני פליטה של 561 ננומטר לרישומי מהדק טלאי. הפוך פרוסה אם אין תאים הניתנים לתיקון.
  3. באמצעות אופטיקת DIC, התמקדו בשורש עצב השמיעה בצד העבה של הפרוסה והשתמשו במיקרומניפולטור כדי להעביר את האלקטרודה ה....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מיקרוסקופ קונפוקלי זקוף A1RNikon Instrumentsאלקטרופיזיולוגיה ומיקרוסקופ הדמיה, יכול להיות כל מיקרוסקופ תואם אלקטרופיזיולוגיה
אלקטרודה זכוכית בורוסיליקט עם נימה OD 1.5 מ"מ, מזהה 1.1 מ"מ, אורך 10 ס"מסאטר אינסטרומנטBF150-110-10זכוכית פיפטה מהדקת טלאי
מילוי אלקטרודות MicroFilWPICMF20Gמילוי פיפטה אלקטרודת טלאי
מחמם פתרון מובנהוורנר אינסטרומנטס (GSAdvantage)SH-27Bמחמם מערכת זילוח פרוסה
מערכות מולטי-מיקרומניפולטורחדירות סאטרMPC-200 עם MP285מיקרומניפולטורים למהדק טלאי ומיקום אלקטרודות גירוי
P-1000 מושך פיפטה אופקי עבור מיקרופיפטות זכוכיתכלי נגינה של סאטרFG-P1000Patch מהדק pipetter puller
מגבר מהדק תיקון ותוכנההקהEPC-10 / Patchmaster הבאיכול להיות כל מגבר/תוכנה
תא הקלטהוורנר אינסטרומנטסRC26Gפורסים "אמבטיה" במהלך ההקלטה
נבל קאמרי הקלטהוורנר אינסטרומנטס640253מייצב פרוסה במהלך הקלטה אלקטרופיזיולוגית
תא דגירה פרוסבנייה מותאמת אישיתתא אחיזה מחומם ומחומצן לפרוסות במהלך ההתאוששות לאחר החיתוך
יחידת בידוד גירוייםא.מ.פ.י.איזו-פלקסיחידת בידוד גירוי לאלקטרופיזיולוגיה
מזרק 60CCפישר סיינטיפיק (אינטרקניונים)14-820-11אלקטרופיזיולוגיה טיפול בנוזל זילוח
בקר טמפרטורהוורנר אינסטרומנטס (GSAdvantage)TC-324Cבקר טמפרטורה של מערכת זילוח פרוסות
אבובים 1/8 OD 1/16 IDפישר סיינטיפיק (אינטרקניונים)14-171-129אלקטרופיזיולוגיה טיפול בנוזל זילוח
Tugsten מיקרואלקטרודה דו קוטבית קונצנטריתWPITM33CCINSאלקטרודה מגרה לאלקטרופיזיולוגיה

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Auditory Nerve RootPostsynaptic Current RecordingsMouse Brain Wedge SliceMedial Olivocochlear NeuronsPatch Clamp ElectrophysiologyElectrical StimulationExcitatory Inhibitory SignalsCochlear Nucleus CellsWhole Cell ConfigurationEpifluorescence Microscopy

Related Articles