מאמר שיטה

הקלטת תגובות סינפטיות CA3-CA1 בפרוסה היפוקמפוסית של חולדה

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Shetty, M. S. et al., Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from מכרסמים.J. Vis. Exp. (2015).

סרטון זה מדגים שיטה לתיעוד תגובות סינפטיות CA3-CA1 בפרוסת היפוקמפוס של חולדה. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהצבת אלקטרודות הגירוי וההקלטה על פרוסת ההיפוקמפוס ובמדידת הפוטנציאל הפוסט-סינפטי מעורר השדה (fEPSP) כדי להעריך את עוצמת התגובה הסינפטית.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הנוגעים לדגימות בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המתאימה לבדיקה אתית של בעלי חיים.

1. הקלטה של תגובות סינפטיות CA3-CA1

הערה: מערך האלקטרופיזיולוגיה המשמש לרישום פוטנציאלי שדה מוצג באיור 1A. כלוב פאראדיי מומלץ בחום אם ההפרעה החשמלית אינה בשליטתה לאחר הארקה נכונה של ההגדרות החשמליות. סוגים רבים ושונים של תאים שקועים ותאי ממשק זמינים באופן מסחרי. עם זאת, תאי ממשק מועדפים מכיוון שפרוסות מציגות בהן תגובות סינפטיות חזקות יותר.

  1. מיקום אלקטרודות
    1. הפעל את המנגנון החשמלי (ממריצים ומגברים) לשימוש. הרכיבו ואבטחו את אלקטרו....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1.מערך אלקטרופיזיולוגי להקלטות בעלות פוטנציאל שדה המורכב מ- (A) ממריצים, (ב) מגבר דיפרנציאלי (c) ממיר אנלוגי-לדיגיטלי, (d) מחשב אוסצילוסקופ (e) עם תוכנת רכישה, (f) מיקרוסקופ שולחני עמיד בפני רעידות (g) עם הגדלה של >4x (h), ממשק תא פרוסת מוח (i) מערכת זילוח עבור ACSF ואספקת קרבוגן (j), בקר טמפרטורה (k) מקור תאורה (l) מניפולטורים עם מחזיקי אלקטרודות. (B) תא פרו.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
I. כימיקלים של רכיבי ACSF
1. נתרן כלורי (NaCl)סיגמא-אולדריץ'S5886
2. אשלגן כלורי (KCl)סיגמא-אולדריץ'עמ' 9541
3. מגנזיום סולפט heptahydrate (MgSO4.7H20)סיגמא-אולדריץ'M1880
4. סידן כלורי דיהידרט (CaCl2.2H2O)סיגמא-אולדריץ'C3881
5. אשלגן פוספט monobasic (KH2PO4)סיגמא-אולדריץ'עמ' 9791
6. סודיום ביקרבונט (NaHCO3)סיגמא-אולדריץ'S5761
7. D-גלוקוז נטול מים (C6H12O6)סיגמא-אולדריץ'G7021
II. מכשירים אלקטרופיזיולוגיים
1. מיקרוסקופאולימפוס, יפןדגם SZ61
2. בקר טמפרטורהעיצוב מערכות מדעיות בע"מ קנדהPTC03
3. מגבר AC דיפרנציאליAM Systems, ארצות הבריתדגם 1700
4. ממריץ דופק מבודדAM Systems, ארצות הבריתדגם 2100
5. אוסצילוסקופרוד אנד שוורץHM0722
6. ממיר דיגיטלי-אנלוגיקיימברידג' עיצוב אלקטרוני בע"מ קיימברידג', בריטניהCED-הספק 1401-3
7. תא פרוסת מוח ממשקעיצוב מערכות מדעיות בע"מ קנדהBSC01
8. משאבת צינורותIsmatec, Idex Health & Science, גרמניהREGLO-אנלוגי
9. מד זרימה קרבוגןקול-פרמר03220-44
10. מאיר אור סיביםדולן-ג'נר תעשיותFiber Lite MI-150
11. מיקרומניפולטוריםMarzhauser Wetzlar, גרמניה00-42-101-0000 (MM-33)
00-42-102-0000 (MM-32)
12. אלקטרודותAM Systems, ארצות הברית571000 (פלדת אל-חלד; 0.010, 5MΩ, 8 מעלות)

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

EPSP

מאמרים קשורים