עיכוב פעילות עצבית ואיתור שלה באמצעות אלקטרופיזיולוגיה בחולדה

תקציר

מקור: Lai, J., et al. רישום אלקטרופיזיולוגי בו זמנית ומיקרו-הזרקות של חומרים מעכבים במוח המכרסמים. J. Vis. Exp. (2015)

סרטון זה מדגים טכניקה מבוססת מיקרו-הזרקה להקלטה ועיכוב עצביים בו זמנית בקוליקולוס העליון של החולדה. ההליך כולל מיקוד סטריאוטקסי, קידוח גולגולת והחדרת מזרק, המספק נוירוטרנסמיטר מעכב תוך רישום פעילות עצבית. גירוי אור מעורר פוטנציאל פעולה, בעוד שמיקרו-הזרקת סמים מדכאת את הריגוש העצבי. ככל שרמות המוליכים העצביים יורדות, הפעילות העצבית חוזרת לנקודת ההתחלה, ומאפשרת לחקור הן את העיכוב והן את ההתאוששות.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הרכבת פיפטת הזרקת הקלטה

1. משוך נימי זכוכית באורך של כ-7 ס"מ (קוטר חיצוני של 1 מ"מ) באמצעות מושך פיפטה.
2. שברו את קצה הנימים ובדקו את הצמצם תחת מיקרוסקופ אור. ודא שהקוטר הפנימי הוא בין 30 מיקרומטר ל -40 מיקרומטר.
3. הכנס חוט כסף באורך 7 ס"מ לתוך נימי הזכוכית עם כ-1 ס"מ בולט מהקצה הלא מחודד של פיפטת הזכוכית.
4. כופפו את החוט העודף בצורה אורתוגונלית לנימים הזכוכית.
5. מרחו טיפה של דבק פלסטי גמיש על הפיר של מחט היפודרמית 30 גרם.
6. הכנס מחט היפודרמית של 30 גרם לפיפטת הזכוכית בהתאם לסכמות המוצגות באי....

תוצאות

איור 1: ייצוג סכמטי של מכלול ההזרקה. מזרק מיקרו (A) מחובר לפיפטה ההקלטה-הזרקה, המורכבת ממחט תת-עורית של 30 גרם (B) המודבקת לחוט כסף (C) בתוך פיפטת זכוכית (D). אזורים מוקפים בע.......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
משאבת הזרקה (UltraMicroPump III)	WPI
קונסולת הזרקה (בקר Micro4)	WPI	#SYS-MICRO4
מזרק המילטון	Hamliton	(80301) 701LT 10 μL SYR	מזרקים בין 5 ל -10 מיקרוליטר משומשים
דבק ג'ל ציאנואקרילט	Krazy Glue	KG86648R	קל יותר ליישם את צורת הג'ל על פיר המחט ההיפודרמית 30G
פיפטות זכוכית	WPI	#TW100F-4	קיר דק, 1 מ"מ OD, 0.75 מ"מ מזהה עם פיפטות נימה בשימוש
720 חולץ פיפטות מחט	Kopf	720
חוט כסף	A-M Systems, Inc.	782500	חשוף "0.010

#UMP3