גרימת התקף נזעי חשמל חריף במודל חולדה

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. אינדוקציה של ECS חריף

הערה: ראה איור 1B, הפאנל העליון.

1. הרטיבו את אטבי האוזניים במי מלח סטריליים וודאו שהם רוויים.
2. הרטיבו את אוזני החולדה במי מלח סטריליים על ידי עטיפתם בגזה ספוגה במי מלח. לאחר שהם רטובים, הסר את הגזה.
3. חבר קליפ אחד לכל אוזן ומקם מעבר לרצועת הסחוס הראשית.
4. ודא במכשיר ECS שנוצרה לולאה אמיתית; אם לא, תופיע במכשיר הודעת שגיאה או קריאה של "1".
5. יש ללבוש כפפה עבה שאינה מתכתית. תוך כדי החזקת החולדה בעדינות ביד עטויה כפפה, לחץ על כפתור "SHOCK" למשך מספר שניות ושחרר לאט את האחיזה בחולדה כדי לצפות בהתקף. עבור בקרת "ללא התקף" (NS) מזויפת, טפל בחולדה באופן זהה, אך אל תעביר את הזרם.
6. נתק את אטבי האוזניים עם תחילת הקלונוס ורשום את התנהגות ההתקף על פי סולם רסין מתוקן הכולל "תנועות פה ופנים" (שלב 1), "הנהון ראש" (שלב 2), "קלונוס גפיים קדמיות" (שלב 3), "גידול עם קלונוס הגפיים הקדמיות" (שלב 4), ו"גידול ונפילה עם קלונוס הגפיים הקדמיות" (שלב 5). ההתקף אמור להימשך כ-10 שניות; רשום את משך ההתקף באמצעות טיימר.
7. לאחר סיום ההתקף, החזירו את החולדה לכלוב הביתי שלה. עקבו אחר החולדה במשך 5 דקות נוספות כדי לוודא את התאוששות החולדה מההתקפים. שמור אותו בודד בכלוב והחזיר את הכלוב לחדר ההתאוששות.
8. חזור על השראת ECS על החולדה הבאה.
9. עקוב אחר החולדות לאורך שארית היום ולפחות פעם אחת בבוקר ופעם אחר הצהריים למחרת עד שהן מורדמות לניסויים.
   הערה: שיטת האינדוקציה ECS עלולה להוביל לסימנים קליניים כתופעת לוואי מקרית, הדורשת תשומת לב. לדוגמה, פרוטוקול האינדוקציה ECS יכול לגרום להתקפים שנמשכים יותר מ-15 שניות ולגרום למצוקה מיותרת לחולדות. במקרה זה, יש לסיים את ההתקף באמצעות דיאזפם (10 מ"ג/ק"ג, i.p.) או פנטוברביטל (25-30 מ"ג/ק"ג, i.p). אם החולדות מפתחות מצוקה נשימתית או הפרעות התנהגות חמורות לאחר הפסקת ההתקפים, המתת אותן על ידי שאיפת פחמן דו חמצני ואחריה עריפת ראש.

איור 1: סכימה לאינדוקציה של ECS חריף ו-ECS כרוני. (A) חולדה חוברה למחולל פולסים באמצעות אלקטרודות מהדק אוזניים, ושוק חשמלי (55 mA, 100 פולסים/שנייה למשך 0.5 שניות) הופעל כדי לעורר התקפים טוניים-קלוניים בשלב 4-5. (ב) ECS חריף נגרם על ידי שוק חשמלי אחד. ECS כרוני נגרם על ידי התחשמלות אחת ביום במשך 7 ימים רצופים. נקודות הזמן המוצגות מייצגות את משך הזמן שלאחר השראת ECS חריף או ה-ECS האחרון לזירוז ECS כרוני לפני דיסקציה של ההיפוקמפוס. חולדות הביקורת "ללא התקף" (NS) טופלו באופן זהה אך לא קיבלו שוק חשמלי.