תיקון: טיטראציה של קורונה-וירוסים אנושיים באמצעות בדיקת אימונו-פרוקסידאז

סיכום

בוצע תיקון במאמר: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. תקציר מעודכן פורסם מחדש עקב טעות של המוציא לאור.

תקציר

בוצע תיקון למאמר: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. תקציר מעודכן פורסם מחדש עקב טעות של המוציא לאור.

תקציר מעודכן:

קביעת טיטרים של נגיפים זיהומיים היא גישה ניסיונית בסיסית וחיונית עבור וירולוגים. לא ניתן להשתמש בבדיקות פלאק (plaque assays) קלאסיות עבור נגיפים שאינם גורמים להשפעות ציטופתית משמעותיות, כפי שקורה במקרה של זני הפרוטוטיפ 229E ו-OC43 של נגיף הקורונה האנושי (HCoV). לפיכך, פותחה בדילת אימונו-פרוקסידאז עקיפה (IPA) חלופית לזיהוי ולטיטרציה של נגיפים אלו, והיא מתוארת במסמך זה. תאים רגישים מוחדרים עם דילולים לוגריתמיים סדרתיים של דגימות המכילות נגיף בפורמט של פלטת 96 בארות. לאחר גדילת הנגיף, זיהוי נגיפי באמצעות IPA מניב את הטיטר של הנגיף הזיהומי, המבוטא כ-"מנה זיהומית בתרבית רקמה של 50 אחוז" (TCID50). ערך זה מייצג את הדילול של דגימה המכילה נגיף שבו מחצית מסדרת בארות מעבדה מכילה נגיף זיהומי משתכפל. טכניקה זו מספקת שיטה מהימנה לטיטרציה של HCoV-229E ו-HCoV-OC43 בדגימות ביולוגיות כגון תאים, רקמות ונוזלים. מאמר זה מבוסס על עבודה שדווחה לראשונה ב-Methods in Molecular Biology (2008) כרך 454, עמודים 93-102.

תקציר מקורי:

חישוב של טייטרים ויראליים זיהומיים מהווה גישה ניסויית בסיסית וחיונית עבור וירולוגים. לא ניתן להשתמש בבדיקות פלאק (plaque assays) קלאסיות עבור נגיפים שאינם גורמים לאפקטים ציטופתים משמעותיים, כפי שקורה בזני 229E ו-OC43 של קורונה-וירוס אנושי (HCoV). במאמר זה מתוארת בדיקה עקיפה של אימונו-פרוקסידאז (IPA) לצורך זיהוי וטיטרציה של נגיפים אלו. תאים רגישים מוחדרים עם דילולים לוגריתמיים סדרתיים של דגימות בלוח בעל 96 בארות. לאחר צמיחת הנגיף, זיהוי ויראלי באמצעות IPA מניב את הטייטר הויראלי הזיהומי, המבטא כ-"מינון זיהומי לתרבית רקמה" (TCID50). ערך זה מייצג את הדילול של דגימה המכילה נגיף שבו מחצית מסדרת בארות מעבדה מכילה נגיף משכפל. טכניקה זו היא שיטה אמינה לטיטרציה של HCoV בדגימות ביולוגיות (תאים, רקמות או נוזלים).

פרוטוקול

בוצע תיקון למאמר: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. תקציר מעודכן פורסם מחדש עקב טעות של המוציא לאור.

תקציר מעודכן:

קביעת טיטרים של נגיפים זיהומיים היא גישה ניסויית בסיסית וחיונית עבור וירולוגים. לא ניתן להשתמש במבחני פלאקים (plaque assays) קלאסיים עבור נגיפים שאינם גורמים לאפקטים ציטופתיים משמעותיים, כפי שקורה במקרה של זני הפרוטוטיפ 229E ו-OC43 של קורונה-וירוס אנושי (HCoV). לפיכך, פותח מבחן אימונו-פרוקסידאז (IPA) עקיף חלופי לזיהוי ולטיטרציה של נגיפים אלו, והוא מתואר במסמך זה. תאים רגישים מוחדרים עם דילול לוגריתמי סדרתי של דגימות המכילות נגיף בפורמט של פלטת 96 בארות. לאחר צמיחת הנגיף, זיהוי נגיפי באמצעות IPA מספק את טיטר הנגיף הזיהומי, המבוטא כ-"מינון זיהומי לתרבית רקמה של 50 אחוזים" (TCID50). ערך זה מייצג את הדילול של דגימה המכילה נגיף שבו מחצית מסדרת בארות המעבדה מכילות נגיף זיהומי משתכפל. טכניקה זו מספקת שיטה מהימנה לטיטרציה של HCoV-229E ו-HCoV-OC43 בדגימות ביולוגיות כגון תאים, רקמות ונוזלים. מאמר זה מבוסס על עבודה שדווחה לראשונה ב-Methods in Molecular Biology (2008) כרך 454, עמודים 93-102.

תקציר מקורי:

חישוב טיטרים של נגיפים זיהומיים מהווה גישה ניסיונית בסיסית וחיונית עבור Viroligists. לא ניתן להשתמש במבחני פלאק קלאסיים עבור נגיפים שאינם גורמים לאפקטים ציטופתיים משמעותיים, כפי שקורה עבור זני 229E ו-OC43 של קורונה-וירוס אנושי (HCoV). במאמר זה מתואר מבחן אימונו-פרוקסידאז עקיף (IPA) חלופי לזיהוי ולטיטרציה של נגיפים אלו. תאים רגישים מוחדרים עם דילולים לוגריתמיים סדרתיים של דגימות בלוח של 96 בארות. לאחר גדילת הנגיף, זיהוי נגיפי באמצעות IPA מניב את הטיטר של הנגיף הזיהומי, המובע כ-"Tissue Culture Infectious Dose" (TCID50). ערך זה מייצג את הדילול של דגימה המכילה נגיף שבו מחצית מסדרה של בארות במעבדה מכילה נגיף משכפל. טכניקה זו היא שיטה מהימנה לטיטרציה של HCoV בדגימות ביולוגיות (תאים, רקמות או נוזלים).