את פרטי גישת ההתקנה הבאות השמנה אופטית צריכת חשמל נמוכה של חלקיקי דיאלקטרי שימוש כפול nanohole בסרט מתכת.
מאמר שיטה
את פרטי גישת ההתקנה הבאות השמנה אופטית צריכת חשמל נמוכה של חלקיקי דיאלקטרי שימוש כפול nanohole בסרט מתכת.
אופטי שמן הוא טכניקה למשתקת ומניפולצית חפצים קטנים בצורה עדינה באמצעות אור, וזה כבר מיושם באופן נרחב בהשמנת ומניפולצית חלקיקים ביולוגיים קטנים. Ashkin ועמיתים לעבודה ראשונה הוכיחו פינצטה אופטית באמצעות קרן ממוקדת אחת 1. מלכודת הקרן האחת ניתן לתאר במדויק באמצעות גיבוש כוח שיפוע perturbative במקרה של חלקיקי משטר Rayleigh קטנים 1. במשטר perturbative, הכח האופטי דרוש ללכידת חלקיקים על מאזניים ככח הרביעי ההופכי של גודל החלקיקים. סמכויות אופטיות גבוהות יכולות לפגוע ולגרום לחלקיקים דיאלקטריים חימום. לדוגמה, ספירות לכודי לטקס של 109 ננומטר בקוטר נהרסו על ידי קרן mW 15 ב25 1 שניות, שבו יש השלכות חמורות על חומר ביולוגי 2,3.
חזרה לפעולת לכידה יזומה (SIBA) אופטית הוצעה ללכוד 50 כדורי פוליסטירן ננומטר במשטר לא perturbative 4. במשטר לא perturbative, אפילו חלקיק קטן עם ניגוד permittivity מעט הרקע יכול להשפיע באופן משמעותי את השדה האלקטרומגנטי הסביבה ולגרום לכוח אופטי גדול. כחלקיק נכנס צמצם מואר, העברת אור עולה באופן דרמטי בגלל הטעינה דיאלקטרי. אם החלקיק מנסה להשאיר את הצמצם, שידור ירד גורם לשינוי במומנטום החוצה מהחור, ולפי החוק השלישי של ניוטון, תוצאות בכוח על החלקיקים פנימה לתוך החור, לוכד חלקיקים. העברת האור יכול להיות במעקב, ולכן, יכולה להיות מלכודת חיישן. טכניקת לכידת SIBA ניתן לשפר עוד יותר על ידי שימוש במבנה הכפול nanohole.
המבנה הכפול nanohole הוכח לתת שיפור שדה מקומי חזק 5,6. בין שני קצוות החדים של פעמים nanohole, חלקיק קטן יכול לגרום לשינוי גדול באופטי transmission, וכך גורם לכוח אופטי גדול. כתוצאה מכך, חלקיקים קטנים יותר יכולים להיות לכודים, כגון 12 ננומטר תחומי סיליקט 7 ו 3.4 ננומטר חלבונים הידרודינמית רדיוס שור סרום אלבומין 8. בעבודה זו, בתצורה הניסיונית המשמשת ללכידת nanoparticle מתוארת. ראשית, אנחנו פירוט ההרכבה של התקנת ההשמנה המבוססת על ערכת פינצטה אופטית Thorlabs. בשלב הבא, אנחנו מסבירים את הליך nanofabrication של פעמים nanohole בסרט מתכת, הייצור של קאמרי microfluidic והכנת המדגם. לבסוף, אנו פרטי הליך רכישת נתונים ולספק תוצאות אופייניות להשמנת 20 nanospheres הקלקר ננומטר.
העיקרון של טכניקת לכידת SIBA מודגם באיור 1. איור 2 הוא סכמטי של מערך הניסוי.
1. התקנה אופטית שמנה
לסעיף זה של ההליך, מתייחס לערכת ההשמנה האופטית 9 ידניים או מדידת כוח מודול הידני האופטית 10 לפרטים על הגדרת הערכות. שים לב שphotodiode מפולת (APD) משמש במקום גלאי עמדה רבע. לברגים לא כלולים בערכת ההשמנה האופטית, להשתמש אלה בבורג הכובע וערכת חומרה (Thorlabs, HW-KIT2). הגנה על עין צריכה להיות משוחק בכל העת כאשר הליזר מופעל. ודא שהקרן כלולה בתוך אזור בטוח ואבזרים רעיוניים, כגון תכשיטים, יש להימנע. כמו כן, הגנת הפריקה אלקטרוסטטית מומלצת בעת טיפול בדיודות ליזר.
2. Nanofabrication
3. Microfluidic קאמרי
תרשים זרימת תהליך לבודה הקאמרית microfluidic מוצג באיור 4.
4. לדוגמא הכנה
5. רכישת נתונים
עקבות רכישה טיפוסיות מוצגות באיור 5 א. אירוע השמנה הוא אופייני פתאומי, עם קצה חד, מראה מתג ברור בין שתי רמות ספק שידור. כמו חלקיקים כפופים לתנועה הבראונית, האירועים לוכדים יתרחשו באופן אקראי. במשך 20 חלקיקים ננומטר, שינויי הולכה מהשמנה היו בדרך כלל סביב 5-10% ולעתים השמנה, סביב 10-300 שניות. הזמן האופייני להשגת אירוע השמנה לכוח והריכוז שתואר לעיל הוא על סדר דקה. בשל הפרעה סטרית זה נדיר לראות לוכדי חלקיקים מרובים בו זמנית, אם כי פעם בחלקיק הוא שוחרר, אותה הוא מלווה בדרך כלל על ידי אירוע השמנה שלאחר מכן. תלויה באיכות של התוצאות, ייתכן שיש עלייה באות לרעש במדינה הלכודה. עליית הרעש הזה מגיעה מהתנועה הבראונית של החלקיקים הלכודים. בלא החלקיקים הלכודים, מקור רעש זה אינו קיים.
_content "> חפצים מסוימים עשויים להופיע בתוצאות שאינן מעידים על אירועי השמנה. תוצאות מראות שינויים נסחפים, איטיים בשידור על פני תקופה של דקות כפי שמוצג באיור 5b, אמורות להיות מושלכות. חפצים אחרים יכולים להיות גם כאלה נוכחיים כשינויים עקביים הילוכים, רעש מוגזם או לא שמן בכלל. לדוגמה, יכולים לגרום לבועות קפיצות עצמה רציפות אם טיפול לא נלקח על מנת להבטיח כי הקאמרי הוא ללא בועות. בועות אלה תגבנה בצורה שונה לאירועי ההשמנה במונחים של דינמי שינוי התנהגות ועוצמתם, ולכן הם לזיהוי בקלות. סימפטומים כאלה יכולים להיגרם על ידי מבנה עניים הכפול nanohole, מזהמים או תנודות מכאניות. סביבה שקטה, פעילות נמוכה, מומלצות מאוד למקום התקנה זו. כמו כן, מאפשרים לליזר ו שלב להתיישב כמה דקות לאחר היישור יכול לעזור גם כן.s/ftp_upload/4424/4424fig1.jpg "/>
איור 1 שידור subwavelength צמצם אופטי:) ללא חלקיקים; ב) תמסורת מוגברת בשל חלקיק דיאלקטרי; ג) אם ניסיונות חלקיקים לעזוב, הירידה במומנטום אור (ΔT) תגרום לכוח (F) על החלקיק כאל. למשוך אותו בחזרה לחור; ד) האדום העוברת שינוי של עקומת ההולכה נגרמת על ידי החלקיקים, שיוביל לשינוי בΔT שידור.

. איור 2) בסך הכל סכמטי של השמנת התקנה, הגדלה של העיגול האדום מוצג בב); ב) הרחבה מראה כפול nanohole, ואת nanospheres בתוך PDMS הקאמרי; ג) תמונת SEM של המבנה הכפול nanohole. ראשי תיבות בשימוש: LD = דיודת ליזר; ODF = צפיפות מסנן אופטית; HWP = צלחת חצי גל; BE = קורה הרחבה; MR = ראי; MO = אובייקטיבי מיקרוסקופ; OI MO = השמן immerמטרת מיקרוסקופ שיאון; ד"ה = הכפול nanohole; APD = מפולת photodetector.

איור 3) דמות מפה סיבית לדוגמה השתמשה בFIB הייצור;. ב) תמונת SEM של פעמים nanohole.

איור 4. תרשים תהליך לבודה הקאמרית microfluidic.

איור 5. (א) רכישה אופיינית של השמנת אירועים עם 20 כדורי פוליסטירן ננומטר. (ב) רכישה עניה מראה נסחף חריף.
ההתקנה הנוכחית יש יכולות השמנה יעילות בשל מבנה nanohole. מלכודות nanohole זה חלקיקים דיאלקטריים ~ 10 ננומטר בקנה מידה בעוצמות אופטיות נמוכות. מלכודות אופטיות רומן אחרות כוללות אנטנות אופטיות דיפול 11, תהודה אופטית לחישה-גלריה במצב 12,13 וגלבו 14, אולם הם בדרך כלל פועלים במשטר perturbative, המוגבל על ידי קנה מידת הסדר הרביעי ההופכי של הכח האופטי הנדרש לעומת החלקיק גודל, בניגוד SIBA והמלכודת הכפולה nanohole. צורות צמצם אלטרנטיביות גם הוצגו ללכידה, כגון 15 nanopore plasmonic מלבני. תכונות חיוביות אחרות שמוצגות על ידי המלכודת הכפולה nanohole לכלול התנהגות חלקיקים סלקטיבית בגודל 7, מיקום השמנה יחידה (להגביל השמנה מרובה חלקיקים) וקלויות 16 דיה. כחלופה לשימוש בFIB, כפול nanoholes יכול להיות מפוברק באמצעות ליטוגרפיה colloidal6 y.
לכידה של חומרים ביולוגיים של קיטוב גדול וגודל כללה 3 חיידקים, תאי חי 17,2,18, 3 נגיף פסיפס הטבק ומניפולציה ומתיחה של גדילי דנ"א נקשרים בקצוות עם חלקיקים דיאלקטריים גדולים 19, אולם השמנה, ישירה של קטן דגימות ביולוגיות ללא קשירה נותרות מאתגרות. תצורת השמנה זה מסוגלת ללכוד חלקיקים דיאלקטריים קטנים בעוצמות אור נמוכות יותר מאשר פינצטה אור הקונבנציונלית וnanohole המעגלי, המאפשר לחלקיקים ביולוגיים קטנים שייערכו לתקופות זמן ארוכים ללא ניזק או קשירה. כמו כן, אירועי ההשמנה מפגינים יחס אות לרעש גבוה ומאפשר התקנה זו כדי לעבוד כחיישן רגיש ולזהות את החלקיקים הקטנים ביותר הביולוגיים, כגון וירוסים וחלבונים. למעשה, 20 כדורי פוליסטירן ננומטר שמקדמים שבירה של 1.59 אשר ניתן להשוות את החלקיקים הביולוגיים הקטנים ביותרכגון וירוסים. שיטה זו יכולה להיות טכניקה אמינה ובוגרת לקיבוע ומניפולציה של חלקיקים, כולל חלקיקים ביולוגיים.
יישומים של טכניקה זו כוללים אינטגרציה לתוך סביבת microfluidic. במקום קאמרי microfluidic יחידה, ערוץ יהיה בשימוש דינמי לשלוט בסביבה, אידיאלי לחישה שבירה. כגון התקנה תהיה להגדיר בשבב microfluidic יחיד שמוביל להתקנה יציבה וחזקה יותר ומהר יותר ניתוח של מומסים. אפשרות נוספת היא פיתוח ערכת זיהוי פלואורסצנטי לאפיון של אחת וירוסי ניאון מתויג-, נקודות קוונטיות של מוליכים למחצה וחלבוני ניאון ירוקים. התקנה זו יש גם פוטנציאל לשינוי לbiosensor לוירוס או חלבון מסוים, וכך דגימות קטנות מאוד כדי להיות מנותחות. תרופות 21 גילוי וזיהוי מחלות וזיהומים 22 ירוויחו מגלאי חלבון אחת. ראמאן spectroscopy ניתן לשלב לגילוי אותות ראמאן של חלקיקים ואירועים מחייבים יחידים. המבנה הכפול nanohole מאפשר שיפורים חזקים מקומיים שדה בקצוות, מתאימים לראמאן ספקטרוסקופיה 23 קצה משופר. שיטה מאוד ספציפית ללא תווית של אפיון חומר גם תהיה אפשרית באמצעות ראמאן ספקטרוסקופיה 24.
הייצור והגישה חופשיה למאמר זה הוא בחסות Thorlabs.
אנו מכירים Thorlabs לחסות פרסום זה ומימון ממדעי הטבע והנדסת מועצת המחקר (NSERC) של קנדה הגילוי גרנט. אנו מודים לרייס סיר ודאגלס Rennehan לסיוע ייצור בהתהוותו של מאמר זה וידאו.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שם | יצרן | מספר סידורי | תגובות |
| שמן טבילה | מעבדות Cargille | 16484 | כמות: 1 |
| ערכת אלסטומר Sylgard 184 סיליקון | Dow Corning קנדה | כמות: 1 מכיל גם בסיס PDMS וסוכן ריפוי | |
| שקופיות בדיקה מצופית זהב | EMF קורפ | Cr / Au | כמות: 1 שכבת הדבקת טי ניתן להשתמש גם |
| אין 1.5 Coverslips | הפישר סיינטיפיק | 12-541-B | כמות: 1 |
| מערכת קרן ממוקדת יון | היטאצ'י | FB-2100 | |
| נתוני מודול רכישה נייד | אומגת הנדסה | USB-4711A | שuantity: 1 |
| שלב ינארי | פרקר | 4034M | כמות: 1 |
| ראש בקר ודיודות ליזר | סאקר Lasertechnik קבוצה | TEC 120 | כמות: 1 ידנית מתכוונן Littrow ליזר מערכת |
| אוסצילוסקופ הדיגיטלי | Tektronics | TDS1012 | כמות: 1 |
| תקני גודל 20 ננומטר NanoSphere | Thermo Scientific | 3020A | כמות: 1 |
| 1 "עדשת הר | Thorlabs | LMR1 | כמות: 1 |
| 0.3 "העדשה Tube | Thorlabs | SM1L03 | כמות: 2 |
| ND קליטה 4.0 סינון | Thorlabs | NE40A | כמות: 1 |
| האלומיניום Breadboard | Thorlabs | MB1824 | כמות: 1 |
| המפולת photodiode | Thorlabs | APD110A | כמות: 1 |
| מד כוח אופטי דיגיטלי | Thorlabs | PM100 | כמות: 1 אחרים, מיושנים יעשו |
| מודול חיל המדידה | Thorlabs | OTKBFM | כמות: 1 |
| Kinematic מירור הר | Thorlabs | KM200-E03 | כמות: 1 עם מראה איכותי בIR ליזר |
| דיודות ליזר Driver זרם קבוע | Thorlabs | LD1255R | כמות: 1 |
| פלייט טבלת הרכבה אופטי LD1255 | Thorlabs | LD1255P | כמות: 1 |
| פלייט achromatic רכוב חצי גל | Thorlabs | AHWP05M-980 | כמות: 1 690 - 1200 ננומטר |
| ערכת פינצטה אופטית | Thorlabs | OTKB / M | כמות: 1 מטרייה או קיסרי |
| הודעת מחזיק מאגר | Thorlabs | BA2 | כמות: 2 |
| ספק כוח | Thorlabs | PS-12DC-US | כמות: 1 |
| כבל חשמל | Thorlabs | LD1255-CAB | כמות: 1 |
| זכות פלייט זווית | Thorlabs | AP90 | כמות: 1 |
| זכות קלאמפ הודעת זווית | Thorlabs | RA90 | כמות: 1 |
| הודעה אופטית נירוסטה | Thorlabs | TR3 | כמות: 1 |
| קלאמפ טבלה | Thorlabs | CL1 | כמות: 2 אחרים, מיושנים יעשו |
| חיישן תרמי | Thorlabs | PM210 | כמות: 1 למד כוח אופטי דיגיטלי |
| קבל 100 pF | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| 200 Resistor KOhm | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| גיליון אקריליק | כמות: 3 "x 1" כל מותג, לא קריטי | ||
| מבחר של כבלים קואקסיאליים, חוטים ומחברים | לפי צורך | ||
| ארובה | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| עדשה קעורה | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| חותך יהלומים | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| סרט דו צדדי | כל מותג, לא קריטי | ||
| סכין גילוח | כמות: 1 כל מותג, לא קריטי | ||
| מלקט | כמות: 1 כל מותג, הקנס הטה |
בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה
בקש הרשאה