מאמר שיטה

המאפיינים של מיקרוג'ל פוליאתילן גליקול שנוצר על ידי משקעים נשלטים על ידי משקל מולקולרי של מגיבים

11.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/51002

⸱

23 בדצמבר 2013

 ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, The University of Akron, 2Saint Vincent Saint Mary's High School

במאמר זה

סיכום

עבודה זו מתארת את היווצרותם של מיקרוג'לים פולי(אתילן גליקול) (PEG) באמצעות תגובת משקעים פוטופולימרית. הגדלת המשקל המולקולרי של PEG הגדילה את קוטר המיקרוג'ל ואת יחס הנפיחות. התאמות פשוטות לתגובת המשקעים של מיקרוג'ל PEG נחקרות ליישומים עתידיים של מיקרוג'לים ככלי להעברת תרופות ופיגומים להנדסת רקמות.

תקציר

עבודה זו מתארת את היווצרותם של מיקרוג'לים פולי(אתילן גליקול) (PEG) באמצעות תגובת משקעים פוטופולימרית. תגובות משקעים מציעות מספר יתרונות על פני טכניקות ייצור מיקרוספרה מסורתיות. בניגוד לטכניקות אמולסיה, השעיה ופיזור, מיקרוג'לים הנוצרים על ידי משקעים הם בעלי צורה וגודל אחידים, כלומר אינדקס פוליפיזור נמוך, ללא שימוש בממיסים אורגניים או מייצבים. התנאים הקלים של תגובת המשקעים, התכונות הניתנות להתאמה אישית של המיקרוג'לים והצמיגות הנמוכה לזריקות הופכים אותם לישימים למטרות in vivo. בניגוד לטכניקות ייצור אחרות, ניתן לשנות את מאפייני המיקרוג'ל על ידי שינוי המשקל המולקולרי ההתחלתי של הפולימר. הגדלת המשקל המולקולרי ההתחלתי של PEG הגדילה את קוטר המיקרוג'ל ואת יחס הנפיחות. מוצעים שינויים נוספים כגון עטיפת מולקולות במהלך קישור מיקרוג'ל. התאמות פשוטות לאבני הבניין של מיקרוג'ל PEG נחקרות ליישומים עתידיים של מיקרוג'ל ככלי להעברת תרופות ופיגומים להנדסת רקמות.

מבוא

בהגדרה, מיקרוג'לים הם הידרוג'לים מכל צורה בקוטר שווה ערך של כ-0.1-100 מיקרומטר1. בגלל גודלם ומאפייניהם, מיקרוג'לים פולימריים מהווים כלי רב-תכליתי לקידום אספקת תרופות ומערכות הנדסת רקמות. בעוד שהידרוג'לים בתפזורת נמצאים בשימוש נרחב כפיגומים להנדסת רקמות ורכבי אספקת תרופות בהצלחה רבה2-4, המעבר האחרון לשליטה בקנה מידה מיקרו של פיגומים מספק הזדמנות ייחודית למיקרוג'לים לשמש כחומרי בסיס לבניית פיגומים. בנוסף, למיקרוג'לים יש יחס שטח פנים לנפח גבוה לאינטראקציות תאיות ובתמיסה יש צמיגות נמוכה שהופכת אותם לאידיאליים להזרקות. לבסוף, ניתן ליצור מיקרוג'לים באמצעות פולימרים רבים במגוון שיטות התלויות במאפייני המיקרוג'ל הרצויים, מה שהופך אותם לניתנים להתאמה אישית עבור מגוון יישומים.

טכניקות לייצור מיקרוג'ל כוללות פילמור תרחיף, אמולסיה, פיזור או משקעים. פילמור תחליב ותרחיף דורש בדרך כלל ממיסים אורגניים ופעילי שטח או מייצבים כדי ליצור את המיקרוג'לים. אופי השיטות הללו מניב התפלגות גודל חלקיקים מפוזרת מאוד5. תגובות פיזור ומשקעים הופכות חלקיקים לפוליפיזוריות נמוכה יותר6; עם זאת, חלקיקים הנוצרים על ידי פילמור פיזור עדיין דורשים שימוש בחומרים מייצבים6. מיקרוג'לים הנוצרים על ידי תגובות משקעים הם ייחודיים בכך שהם יוצרים חלקיקים בגודל וצורה אחידים ללא שימוש במייצבים או פעילי שטח. היווצרות מיקרוג'ל מושגת כאשר גידול שרשראות פולימר נפרדות מהשלב הרציף על ידי משקעים אנטלפיים או אנטרופיים7. פילמור משקעים הוא לרוב בטמפרטורות גבוהות שניתן להוריד על ידי שימוש במלחים קוסמוטרופיים, המפחיתים את מסיסות הפולימר בממס8. עבודה זו מתמקדת במיקרוג'לים הנוצרים מפולי (אתילן גליקול) (PEG) על ידי תגובת משקעים פוטופולימרית בתנאים תואמים ביולוגית, עם וריאציות לשינוי תכונות המיקרוג'ל ועטיפת מולקולות ליישומי העברת תרופות.

מחקרים קודמים עם הידרוג'לים PEG מראים שתנאי הפילמור משפיעים מאוד על התכונות הפיזיקליות והמכניות של הידרוג'לים, כלומר תכולת מי ההידרוג'ל ומודול הדחיסה3,9. חומרים צולבים אלה מעניינים מכיוון שניתן להשתמש בקשר בין תכונות מבניות ופיזיקליות המתוארות על ידי Flory10 כדי להתאים את ההידרוג'ל המקושר ליישומים ספציפיים. עקרונות אלה דומים למיקרוג'לים. מיקרוג'ל PEG שנוצר על ידי משקעים נמצא כבעל פוטנציאל לרפואה רגנרטיבית11, אולם חקירה נוספת של תכונות המיקרוג'ל הייתה נחוצה כדי לשפר את הרפרטואר שלהם ליישומים ביו-רפואיים עתידיים. דוח זה מתאר את ההליך לייצור מיקרוג'לים על ידי תגובת משקעים ושינוי מאפיינים, כגון קוטר מיקרו-חלקיקים, אינדקס פוליפיזור (PDI), צפיפות ונפיחות, שיהיו חשובים להמשך פיתוח חומרים אלה לאספקת תרופות או רפואה רגנרטיבית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת פתרונות לשימוש בייצור מיקרוג'ל

  1. לפני שמתחילים בתגובת המשקעים, הכינו את הפתרונות הדרושים וחממו אותם ל -37 מעלות צלזיוס. הפתרונות הנדרשים כוללים 0.5% פוטו-יוזם, 1.5 M Na2SO4, תמיסת חיץ, תמיסת PEG-diacrylate של 200 מ"ג/מ"ל (PEG-DA) ותמיסת מלח חוצצת פוספט 1x (PBS). הערה: אקרילט את כל קודמני ה-PEG לפי השיטות שפורסמו ואחסן בטמפרטורה של -20 מעלות צלזיוס מתחת לארגון עד לשימוש12.
  2. שקלו את הפוטו-יוזם והתמוססו ב-H2O נטול יונים (DI) לקבלת תמיסה של 0.5% (w/v). חשוב להגן על התמיסה מפני חשיפה לאור UV.
    1. לאחר פירוק מלא, יש לסנן דרך מסנן של 0.22 מיקרומטר. ניתן להכין פתרון זה מראש ולאחסן בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס בחושך. הערה: הפחת את זמן הערבוב לכשעה על ידי חימום התמיסה ל-40 מעלות צלזיוס תוך כדי ערבוב.
  3. עבור 1x PBS, הוסף טבליה אחת PBS ל-1 L DI H2O וסנן דרך מסנן של 0.22 מיקרומטר. ניתן להכין PBS מראש ולאחסן בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  4. מדדו 39.4 מ"ל של מי מלח חוצצים פוספט (PBS, pH=7.4) והוסיפו 612 מיקרוליטר טריאתנולאמין (TEOA), ו-260 מיקרוליטר של חומצה הידרוכלורית 6 M (HCl). הערה: TEOA צמיג מאוד; יש לחמם מראש את TEOA ל-37 מעלות צלזיוס לפני הפיפטה.
    1. כוונן את ה-pH של המאגר כך שיהיה כ-7.7 וסנן דרך מסנן של 0.22 מיקרומטר (pH סופי ~ 7.8). ניתן להגדיל את תמיסת החיץ, להכין מראש ולאחסן ב-37 מעלות צלזיוס.
  5. הכינו את תמיסת ה-PEG-DA לפני תחילת התגובה בכל פעם; נצפתה תגובתיות מופחתת אם התמיסה מאוחסנת. שקלו את PEG-DA והוסיפו מאגר PBS/TEOA/HCl לריכוז הסופי של 200 מ"ג/מ"ל. הערה: הוסיפו את המאגר באיטיות כדי לשלוט בזהירות בריכוז ה-PEG מכיוון ש-PEG מתנפח בתמיסה.
    הערה: פתרון זה ניתן להתאמה אישית רבה. האפשרויות להתאמה אישית של מיקרוג'לים כוללות: שינוי המשקל המולקולרי ההתחלתי של PEG כדי לשנות את תכונות המיקרוג'ל, שימוש במבשר PEG מתכלה לייצור מיקרוג'לים מתכלים, סינון סטרילי של כל התמיסות למיקרוג'לים סטריליים ביולוגית, השלמת תהליך ההיווצרות במכסה זרימה למינרית, ולבסוף הוספת קבוצות פונקציונליות לפני השטח על ידי שילובם בתמיסת ה-PEG.
  6. שקלו Na2SO4 והתמוססו ב-DI H2O לקבלת תמיסה של 1.5 מ'. לקבלת התוצאות הטובות ביותר, יש להכין את תמיסת הנתרן הגופרתי ממש לפני תחילת התגובה.
    1. מחממים ומערבלים את התמיסה עד להמסה מלאה של Na2SO4. סנן דרך מסנן 0.22 מיקרומטר לפי הצורך.

2. ייצור מיקרוג'ל

  1. הנח 127.5 מיקרוליטר של מאגר PBS/TEOA/HCl, 10 מיקרוליטר של 0.5% פוטו-יוזם ו-25 מיקרוליטר של תמיסת PEG של 200 מ"ג/מ"ל לתוך הצינורות שבהם ייווצרו המיקרוג'לים; בדרך כלל צינורות מיקרו-צנטריפוגה של 2 מ"ל.
    1. מחממים את הצינורות הללו יחד עם תמיסת 1.5 M Na2SO4 ל-37 מעלות צלזיוס.
    2. מערבבים את הצינורות בזמן החימום. הערה: ניתן להרחיב את פרוטוקול המיקרוג'ל הזה.
  2. כדי לעטוף מולקולות במיקרוג'לים, הוסף את המולקולה הרצויה (למשל אובאלבומין) למאגר PBS/TEOA/HCl, פוטו-יוזם ותמיסת PEG. לאחר קישור צולב המולקולה תילכד ברשת המיקרוג'ל.
  3. השלם כל תגובת מיקרוג'ל אחת בכל פעם. קח את הצינור הראשון והוסף 87.5 מיקרוליטר של 1.5 M Na2SO4.
  4. יש לערבב את השפופרת על ידי פיפטינג פי 3-5; לחלופין, יש להמתין 30 שניות. לאחר הערבוב, ריכוז המלח יתפזר באופן שווה והתמיסה צריכה להיות ברורה.
  5. הנח את הצינור מתחת לאור ה-UV וקישור צולב למשך 30 שניות. לאחר קישור צולב צריכה להיות שכבה עכורה על גבי התמיסה, שכבה זו מכילה את המיקרוג'לים. ראה איור 1 לתוכנית תגובה.
  6. מוסיפים 750 מיקרוליטר PBS ליצירת כדור בצנטריפוגה ומערבבים היטב.
  7. שטפו את המיקרוג'ל פי 5 על ידי צנטריפוגה למשך 2 דקות ב-4,000 x גרם ליצירת כדור והחלפת הסופרנטנט ב-PBS. הערה: אל תפריע לכדור המיקרוג'ל בזמן החלפת המאגר, ייתכן שלא ניתן יהיה להסיר את כל הסופרנטנט.

3. גודל מיקרוג'ל ופיזור פולי

  1. פיפטה 30 מיקרוליטר של מיקרוג'ל מהגלולה שנוצרה מצנטריפוגה ב -1 מ"ל של DI H2O. לקבלת התוצאות הטובות ביותר, סוניקטור את תמיסת המיקרוג'ל בסוניקטור אמבט מים למשך שעה אחת (50-60 הרץ ו-1.4 A) או ערבב במרץ כדי להשעות את המיקרוג'לים.
  2. פיפטה 15 מיקרוליטר של תמיסת המיקרוג'ל על מגלשת זכוכית נקייה והניחו מעליה את החלקת הכיסוי #1.5. הפוך את החלקת השקופית והמכסה על רקמת מעבדה ודחף כלפי מטה את השקופית כדי להסיר תמיסה עודפת ולוודא שהמיקרוג'לים נמצאים בשכבה אחת.
  3. צלם מספר תמונות של המיקרוג'לים באמצעות מטרת שמן DIC 100X. בדרך כלל נלקחות 5 תמונות לכל דגימה ומומלץ 3 דגימות לכל אצווה בסך הכל 15 תמונות. הערה: עד כה לא נצפו שינויים בין אצווה לאצווה.
  4. מדוד את המיקרוג'לים כדי לקבל קוטר מייצג.
  5. חשב PDI באמצעות המשוואה מבוססת הנפח הבאה שבה N הוא המספר הכולל של מיקרוג'ל ו- Vi הוא נפח המיקרוג'ל i.

4. צפיפות מיקרוג'ל

  1. הכן תמיסות דקסטרן 7, 6, 5, 4, 3 ו-1 (w/v)% ב-DI H2O כדי לקבוע את צפיפות המיקרוג'ל. צפיפויות אלה חושבו ל-1.022, 1.020, 1.018, 1.016, 1.014 ו-1.010 גרם/סמ"ק, בהתאמה.
  2. הוסף 1 מ"ל של תמיסת דקסטרן 7% לצינור צנטריפוגה של 15 מ"ל.
    1. פיפטה לאט 1 מ"ל של תמיסת דקסטרן 6% ליצירת שכבה מובחנת על גבי הדקסטרן 7%.
    2. המתן 5 דקות ואז הוסף 1 מ"ל מתמיסת 5%.
    3. המשך עד שכל תמיסות הדקסטרן מרובדות לפי סדר הפחתת ריכוז הדקסטרן.
  3. שכבו בזהירות את המיקרוג'לים מעל תמיסת הדקסטרן 1%.
  4. צנטריפוגה בשיפוע למשך 10 דקות ב-4,000 x g ו-5 °C. מיקום מיקרוג'ל לאחר צנטריפוגה איפשר חישוב פשוט של צפיפות13.

5. נפיחות בשיווי משקל מיקרוג'ל

  1. כדי למדוד את המסה הנפוחה (Ms) של המיקרוג'לים, המוגדרת כמסה לאחר נפיחות שיווי משקל (48 שעות), יש לשטוף תחילה את המיקרוג'לים פי 5 ב-DI H2O ולהתנפח למשך 48 שעות לפחות בצינורות מיקרו-צנטריפוגה שקולים מראש.
  2. צנטריפוגה את המיקרוג'לים למשך 10 דקות ב -4,000 x גרם.
  3. הסר את כל הסופרנטנט ורשום את המסה הרטובה. השתמש בשיטות סינון כדי להבטיח שכל עודפי המים יוסרו כדי להשיג תוצאות מדויקות יותר.
  4. הקפיאו את המיקרוג'לים בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס ואז ליופיליזציה למסה קבועה כדי להשיג את המסה היבשה (Md).
  5. חשב את תכולת המים במיקרוג'לים לפי Water% = (Ms - Md) / Md x 100.
  6. קבע את תכולת הפולימר לפי פולימר% = 100 - אחוז מים.
  7. בצע ניתוח סטטיסטי על כל הנתונים באמצעות SAS עם מבחן n-way ANOVA ו-Tukey. הבדלים נרשמים כאשר p<0.05.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

גודל המיקרוג'ל תלוי בתנאי הפולימריזציה. איור 2A ממחיש כיצד קוטר המיקרוג'ל גדל עם עלייה במשקל המולקולרי ההתחלתי של ה-PEG ובזמן הצמירה (crosslinking). תמונות מייצגות של מיקרוג'לים ששימשו למדידת גודל עבור משקלים מולקולריים שונים ושעברו צמירה למשך 30 sec מוצגות ב-איורים 2C-G. עבור PEG בעל משקל מולקולרי של 3,000 Da, הקוטר הממוצע של המיקרוג'ל עלה מ-1.65±0.26 ל-2.20±0.54 μm ככל שזמן החשיפה ל-UV עלה מ-30-600 sec (איור 2B). עם עליית המשקל המולקולרי מ-3,000-10,000 Da תוך שמירה על ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

התכונות הפיזיקליות של מיקרוג'ל PEG נבדקו לשינויים בתנאי הפילמור. עבור תגובת משקעים זו, תמיסת חיץ, תמיסת PEG-diacrylate של 20% (w/v) (MW 3,000, 4,600 או 6,000 Da) ופוטו-יוזם עורבבו והתחממו ל-37 מעלות צלזיוס. תוספת של 1.5 M Na2SO4, מלח קוסמוטרופי המגביר את האינטראקציות בין מולקולות מים, גרמה ל-PEG לשקע לרגע עם הוספתו. השפעה זו בולטת יותר עם משקל מולקולרי גבוה יותר PEG8, מה שמרמז על כך שהיווצרות מיקרוג'ל בפועל היא שילוב של צמיחת שרשרת ומשקעים. מיקרוג'לים התקבלו מפוטופולימריזציה עם אור אולטרה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

המימון לפרויקט זה היה באמצעות NSF CBET Award 1061834. המחברים רוצים להודות ל-CIBA על דגימה של פוטו-יוזם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מי מלח חוצץ פוספט (PBS)2810305ביו-רפואי
טריאתנולאמין (TEOA)J.T. Baker9468-01מחממים מראש ל-37 מעלות; C לפני פיפטינג
חומצה הידרוכלורית (HCl)BDH AristarBDH3028
נתרן גופרתיJ.T. Baker3891-01
Irgacure 2959Ciba029891301PS04
Ovalbumin (OVA)Invitrogen34782
PEG 1,500Alfa AesarA16241
PEG 3,000Fluka03997-1KG
PEG 4,000אלפא AesarA16151
PEG 4,600Sigma373001-250G
PEG 6,000Fluka03394-1KG
PEG 10,000אלפא AesarB21955
דקסטרן 70TCID1449
MP

מקורות

  1. McNaught, A. D., Wilkinson, A. IUPAC Compendium of Chemical Terminology (The Gold Book). 2nd edn. , Blackwell Scientific Publications. (1997).
  2. Lu, S. X., Anseth, K. S. Release behavior of high molecular weight solutes from poly(ethylene glycol)-based degradable networks. Macromolecules. 33, 2509-2515 (2000).
  3. Peppas, N. A. Hydrogels in Medicine. 1, CRC Press, Inc. (1986).
  4. West, J. L., Hubbell, J. A. Photopolymerized hydrogel materials for drug delivery applications. React. Polym. 25, 139-147 (1995).
  5. Hunkeler, D., et al. Theories and Mechanism of Phase Transitions, Heterophase Polymerizations, Homopolymerization, Addition Polymerization. Advances in Polymer Science. 112, Springer. Berlin Heidelberg, Ch. 115-133 (1994).
  6. Arshady, R. Suspension, emulsion, and dispersion polymerization: A methodological survey. Colloid Polym. Sci. 270, 717-732 (1992).
  7. Bai, F., Yang, X. L., Huang, W. Q. Synthesis of narrow or monodisperse poly(divinylbenzene) microspheres by distillation-precipitation polymerization. Macromolecules. 37, 9746-9752 (2004).
  8. Bailey, F., Callard, R. W. Some properties of poly(ethylene oxide) in aqueous solution. J. Appl. Polym. Sci. 1, 56-62 (1959).
  9. Cruise, G. M., Scharp, D. S., Hubbell, J. A. Characterization of permeability and network structure of interfacially photopolymerized poly(ethylene glycol) diacrylate hydrogels. Biomaterials. 19, 1287-1294 (1998).
  10. Flory, P. Principles in Polymer Chemistry. , Cornell University Press. (1953).
  11. Flake, M. M., et al. Poly (ethylene glycol) microparticles produced by precipitation polymerization in aqueous solution. Biomacromolecules. 12, 844-850 (2011).
  12. Sawhney, A. S., Pathak, C. P., Hubbell, J. A. Bioerodible hydrogels based on photopolymerized poly(ethylene glycol)-co-poly(.alpha.-hydroxy acid) diacrylate macromers. Macromolecules. 26, 581-587 (1993).
  13. Scott, R. A., Elbert, D. L., Willits, R. K. Modular poly(ethylene glycol) scaffolds provide the ability to decouple the effects of stiffness and protein concentration on PC12 cells. Acta Biomaterialia. 7, 3841-3849 (2011).
  14. Ianeselli, L., et al. Protein-Protein Interactions in Ovalbumin Solutions Studied by Small-Angle Scattering: Effect of Ionic Strength and the Chemical Nature of Cations. J. Phys. Chem. B. 114, 3776-3783 (2010).
  15. Scott, R., Marquardt, L., Willits, R. K. Characterization of poly(ethylene glycol) gels with added collagen for neural tissue engineering. J. Biomed. Mater. Res. A.. 93, 817-823 (2010).
  16. Lin, H., Kai, T., Freeman, B. D., Kalakkunnath, S., Kalika, D. S. The Effect of Cross-Linking on Gas Permeability in Cross-Linked Poly(Ethylene Glycol Diacrylate). Macromolecules. 38, 8381-8393 (2005).
  17. Mellott, M. B., Searcy, K., Pishko, M. V. Release of protein from highly cross-;linked hydrogels of poly(ethylene glycol) diacrylate fabricated by UV polymerization. Biomaterials. 22, 929-941 (2001).
  18. Bryant, S. J., Anseth, K. S., Lee, D. A., Bader, D. L. Crosslinking density influences the morphology of chondrocytes photoencapsulated in PEG hydrogels during the application of compressive strain. J. Orthop. Res. 22, 1143-1149 (2004).
  19. Padmavathi, N. C., Chatterji, P. R. Structural Characteristics and Swelling Behavior of Poly(ethylene glycol) Diacrylate Hydrogels. Macromolecules. 29, 1976-1979 (1996).
  20. Ross, A. E., Tang, M. Y., Gemeinhart, R. A. Effects of molecular weight and loading on matrix metalloproteinase-2 mediated release from poly(ethylene glycol) diacrylate hydrogels. AAPS J. 14, 482-490 (2012).
  21. Sun, G., Zhang, X. -Z., Chu, C. -C. Effect of the molecular weight of polyethylene glycol (PEG) on the properties of chitosan-PEG-poly(N-isopropylacrylamide) hydrogels. J. Materi. Sci. Mater. Med. 19, 2865-2872 (2008).
  22. Zustiak, S. P., Leach, J. B. Characterization of Protein Release From Hydrolytically Degradable Poly(Ethylene Glycol) Hydrogels. Biotechnol. Bioeng. 108, 197-206 (2011).
  23. Ruan, G., Feng, S. S. Preparation and characterization of poly(lactic acid)-poly(ethylene glycol)-poly(lactic acid) (PLA-PEG-PLA) microspheres for controlled release of paclitaxel. Biomaterials. 24, 5037-5044 (2003).
  24. Loxley, A., Vincent, B. Equilibrium and kinetic aspects of the pH-dependent swelling of poly(2-vinylpyridine-co-styrene) microgels. Colloid Polym. Sci. 275, 1108-1114 (1997).
  25. Vivaldo-Lima, E., Wood, P. E., Hamielec, A. E., Penlidis, A. An updated review on suspension polymerization. Ind. Eng. Chem. Res. 36, 939-965 (1997).
  26. Ritger, P. L., Peppas, N. A. A simple equation for description of solute release I. Fickian and non-fickian release from non-swellable devices in the form of slabs, spheres, cylinders or discs. Journal of Controlled Release. 5, 23-36 (1987).
  27. Matsumoto, A., Kitazawa, T., Murata, J., Horikiri, Y., Yamahara, H. A novel preparation method for PLGA microspheres using non-balogenated solvents. J. Controlled Release. 129, 223-227 (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

PEG

מאמרים קשורים