מדידות של נכסי הולכה עצביות in vivo מדגימות כלי רב עוצמה כדי לאפיין מודלים של בעלי חיים שונים של מחלות neuromuscular. כאן, אנו מציגים פרוטוקול קל ואמין, שבאמצעותו ניתן לבצע ניתוח אלקטרו על עצבי הירך של עכברים מורדמים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
מחקרי אלקטרו יאפשר סיווג רציונלים של מחלות שונות ותוקפת הם של עזרה, יחד עם טכניקות נוירו, בהבנה של הפתופיזיולוגיה הבסיסית 1. כאן אנו מתארים שיטה לביצוע מחקרי אלקטרו על עצבי הנשה עכבר in vivo.
החיות מורדמים עם isoflurane כדי להבטיח שיכוך כאבים לעכברים שנבדקו וללא הפרעת סביבת עבודה במהלך המדידות שתיקחנה בערך 30 דקות / בעלי חיים. טמפרטורת גוף קבועה של 37 ° C מתוחזק על ידי צלחת חימום והיא נמדדת באופן רציף על ידי בדיקה רקטלית תרמו 2. בנוסף, רל (אק"ג) נרשם באופן שיגרתי במהלך המדידות על מנת לפקח על המצב הפיזיולוגי של בעלי החיים נחקרים ברציפות.
קלטות אלקטרו מבוצעות על העצב השת, העצב הגדול ביותר של הדואר מערכת עצבים היקפי (PNS), המספקת את הגפיים האחוריות עכבר עם קטעי סיבים הן מוטוריים וחושיים. בפרוטוקול שלנו, עצבי הנשה יישארו באתר ולכן לא צריכים להיות חילוץ או חשוף, המאפשרים מדידות ללא כל גירויים עצביים שליליים יחד עם הקלטות בפועל. באמצעות אלקטרודות מחט מתאימות 3 לבצע את שני הפרוקסימלית וגירויים עצביים דיסטלי, הרשמה הפוטנציאלים מועברים עם אלקטרודות חישה בשרירי הגסטרוקנמיוס. לאחר עיבוד הנתונים, אמין וערכים עקביים ביותר עבור מהירות ההולכה העצבית (NCV) ופוטנציאל הפעולה מוטורית המורכב (CMap), הפרמטרים המרכזיים לכימות של תפקוד עצבים היקפי ברוטו, יכולים להיות מושגת.
מבוא
מדידות אלקטרו הן כלי הכרחי לחקירה את השלמות הפונקציונלית של עצבים היקפיים בשתי סביבות קליניות ומעבדתיים. בבני אדם, במספר רב של הפרעות ונוירופתיה התוקפת אבחנה מסתמך על מדידות אלקטרו. על ידי מדידת תכונות עצב כמהירות הולכה או אמפליטודות פוטנציאל של האות, ניתן לאפיין את המקור הגס של מחלות עצבים היקפיים.
מהירות ההולכה העצבית תלויה מאוד בהתפשטות אותות מהירה מופעלת על ידי myelination. לכן, תהליכי demyelinating בדרך כלל להראות ירידת מהירויות הולכה 4. פוטנציאל מתחם פעולת מנוע (CMap) - מקשר עם מספר אקסונים פונקציונליים - הוא אינדיקטור לנזק באקסון כאשר צמצמו ב....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
המחקר הנוכחי בוצע על פי חוק ההגנה על בעלי חיים של הרפובליקה הפדרלית של גרמניה (גרמניה המערבית דר Tierschutzgesetz Deutschland) ואושרה על ידי משרד מדינת תורינגיה לבטיחות מזון והגנת הצרכן (Thüringer Landesamt für Lebensmittelsicherheit und Verbraucherschutz).
1. הגדרת המדידות
- להרדים את העכברים על ידי isoflurane / O 2 שאיפה - לחניכה של הרדמה 3%, לisoflurane 2% אחזקה ב100% חמצן (איור 1). לאשר הרדמה מספיק על ידי בדיקת רפלקסים פשוטים כמו רפלקסים תנו....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
ערכנו סדרה של in vivo מדידות אלקטרו על עצבי הנשה של 12 עכברים בסך הכל במחקר זה: 6 בעלי חיים של כל מין. המדידות בוצעו עם הפרוטוקול שהוצג ונמסרו התוצאות הבאות:
שני עכברי זכרים ונקבה להציג מהירות ממוצעת הנשה הולכה העצבית של כ 20 מ '/ שנייה (איור 5). זה עולה בקנה אחד עם מדידות אחרות בספרות. יתר על כן, זה מראה שאין הבדלים רלוונטיים במהירות הולכה עצבית בין זכרים ונקבות על פי הנתונים .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
הפרוטוקול המתואר מספק שיטה קלה ואמינה כדי לקבוע מאפייני הולכה עצב השת בעכברים מורדמים ללא הצורך לחשוף את העצב של עניין. עם זאת, הליך ניסיוני זה גורם לפגיעה ברקמות על ידי נקב מחט. לכן אפשרות סבירה להקריב בעלי החיים לאחר שסיים את ההקלטות. עם זאת, בהשוואה לפרוצדורות פולשניות יותר אחרות, שדורשות החשיפה של העצב לפני הקלטות, נזק לרקמות היא comparably קטן 3,14. לכן, מדידות חוזרות ונשנות הן אפשריות ותלויות בעיצוב של המחקר, בהתאמה. עם זאת, בנקודות מסוימות צריכים להיחשב כדי להבטי.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
יש המחברים אין לחשוף.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי 604 SFB, DFG MO 1421/2-1 וKrebshilfe 107,089 (לHM). AS הוא נמען בפרס חוקר צעיר של מגידול הילדים קרן (ניו יורק, ארה"ב).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| אלקטרודות מחט קונצנטריות (גירוי) | Natus Medical Incorporated, סן קרלוס, קליפורניה, ארה"ב | 9013S0901 | |
| אלקטרודות טבעת דיגיטליות (הקלטה) | Natus Medical Incorporated, סן קרלוס, קליפורניה, ארה"ב | 9013S0302 | |
| ToM - מגדל מדידה (ממיר A/D) | GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, גרמניה | ||
| AtisaPro, תוכנה לרכישת וניתוח נתונים | GJB Datentechnik GmbH , Langewiesen, גרמניה | ||
| HSE-Stimulator T | Hugo Sachs Elektronik, Hugstetten, גרמניה |
מקורות
- Kimura, J. 3rd ed. Electrodiagnosis in Diseases of Nerve and Muscle. , Oxford University Press. (2001).
- Rutkove, S. B. Effects of temperature on neuromuscular electrophysiology. Muscle Nerve. 24, 867-882 (2001).
- Xia, R. H., Yosef, N., Ubogu, E. E.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
