מאמר שיטה

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

14.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/51898

⸱

19 בספטמבר 2014

 ,  , 
1Department of Psychology, Center for Studies in Behavioral Neurobiology, Concordia University

במאמר זה

סיכום

הליך ללמוד את היכולת של הקשר סביבתי אלכוהול קשור להפעלת החידוש של אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות מתוארת.

תקציר

הקשרים סביבתיים שבו תרופות של התעללות נצרכות יכולים לעורר תשוקה, תגובה ממוזג הפבלובית סובייקטיבית שיכול להקל על תרופת התנהגות מסוימת לקבלה וחזרה מהירה במשתמשים בסמים מתנזרים. פיתחנו הליך לחקור את התהליכים התנהגותיים ועצביים המתווכים את ההשפעה של הקשר על אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות. בעקבות הסתגלות לטעם והשפעות תרופתית של אתנול 15% בכלוב בבית, חולדות הארוכות אוונס גבריים לקבל הכשרה הפבלובית אפליה (PDT) בתאי אוויר. בכל מפגש (שני עד שישי) PDT יומי, 16 ניסויים כל אחד משני גירויים שמיעתיים 10 שניות שונות מותנים להתרחש. במהלך גירוי אחד, + CS, 0.2 מ"ל של 15% אתנול מועבר ליציאת נוזלים לצריכה דרך הפה. הגירוי השני, CS-, לא יחד עם אתנול. מעבר הפעלות, כניסות לנמל הנוזלים במהלך עליית CS +, ואילו ערכים במהלך CS- יתייצבו ברמה נמוכה יותר, מצביעים על כך שprediעמותת ctive בין + CS ואתנול נרכשה. במהלך PDT כל תא מצויד בתצורה ספציפית של גירויים חזותיים קונטקסטואליים, חוש הריח ומישוש. בעקבות PDT, אימון הכחדה מתבצע באותו חדר שכעת מצויד בתצורה של גירויים קונטקסטואליים שונה. + CS וCS- מוצגים כמו קודם, אבל אתנול הוא נמנע, מה שגורם לירידה הדרגתית בערכי נמל ב+ CS. בבדיקה, חולדות ממוקמות בחזרה לתוך הקשר PDT ומוצגות עם + CS וCS- כמו קודם, אך ללא אתנול. מניפולציה זו מעוררת עלייה חזקה ובררנית במספר כניסות נמל שבוצעו במהלך האלכוהול חזוי CS +, ללא שינוי בלהגיב במהלך CS-. אפקט זה, המכונה התחדשות מושרה הקשר, ממחיש את היכולת רבת עוצמה של הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול כדי לעורר התנהגות שוחרת אלכוהול בתגובה לרמזים אלכוהול הפבלובית.

מבוא

נותר מפוכח הוא אתגר משמעותי העומד בפני אנשים הסובלים מהפרעות שימוש באלכוהול. התנזרות היא זמן של פגיעות להשפעה התנהגותית, פסיכולוגית ופיזיולוגית של גירויים סביבתיים שאופן שיגרתי מלווים שימוש באלכוהול, אשר יכול, באמצעות אוויר הפבלובית, להיות קשור עם שהכרות 1,2. חשיפה לרמזים חזוי אלכוהול יכולה לעורר תגובה מותנית כמו כמיהה אלכוהול, אשר עשוי לקדם התנהגויות שוחרות אלכוהול המאפשרות 3,4 הישנות.

הרצפים הסטריאוטיפיים של התנהגות שיובילו לצריכת אלכוהול יכולים לגרום לסוגים מסוימים של גירויים שחוו באופן מיידי באופן שיגרתי לפני ההשפעות התרופתית של צריכת אלכוהול. לדוגמא, למראה, ריח והטעם של אלכוהול הם מאפיינים חושיים של אלכוהול שאופן מהימן להקדים שיכרון. בנוסף לרמזים כאלה, המכונים פרוקסימה 'הבדידה' או 'הרמזים 'l, הקשרים סביבתיים שבו תרופות משמשות באופן קבוע יכולה גם לעורר תשוקה 5,6. חשיפה למיקומים פיזיים שבו סמים בעבר בשימוש ולכן עשוי להיות גורם קריטי להישנות 7.

מודלים של בעלי החיים פותחו כדי לחקור את המנגנונים העצביים המתווכים את ההשפעה של הקשרים הקשורים לסמים בסמי התנהגות מסוימות לקבלה 8-13. ההליך המתואר במסמך זה מאפשר לחקירה כמה הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול יכולים לווסת שוחר אלכוהול התנהגות שהושרה על ידי אות בדידה, אלכוהול חזויה הפבלובית.

הכשרת אפליה הפבלובית מתנהלת בהקשר סביבתי ספציפי, שבו חולדות מאומנים התנהגותית להבחין בין שני גירויים שמיעתיים מותנים, + CS שהוא זיווג עם אלכוהול, וCS- שאינו. לאחר מכן מפגשי הכחדה מתבצעים בהקשר אחר, שבו מגיב לCS+ מפחית כתוצאה מאלכוהול נמנעת. בהמשך לכך, reexposure ל, הקשר אימון הפבלובית האלכוהול קשור מפעיל עלייה סלקטיבית בהתנהגות שוחרת אלכוהול שהושרו על ידי + CS, ללא שינוי בתגובה לCS-. תוצאה זו, שיש לנו לשכפל 9,14-16 באופן עקבי, מרחיבה ממצאים מהליכי האוויר סייעו שבהקשרי תרופה כבר נמצאו כדי לעורר את ההתחדשות של תגובות אופרנטית הקשורים למשלוח הסמים 10,13.

פרוטוקול

כל הנהלים מאושרים על ידי ועדת האתיקה למחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה ומסכימים עם המלצות מהמועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים.

.1 בעלי חיים

  1. להשיג חולדות הזכרים הארוך אוונס (220 - 240 גרם ביום הגעה).
  2. לשמור על חולדות בטמפרטורה (21 ° C) ולחות (44%) שבשליטת מתקן טיפול בבעלי חיים, במחזור אור כהה 12 שעות עם אורות דולקים בשעה 7:00.
  3. חולדות זוג בית בעת הגעה. לאחר 3 ימים, חולדות בית בנפרד בכלובי קופסת נעליים פלסטיק עם מצעי beta-שבב, עצם ניילון, וגישה חופשית לאוכל עכברוש סטנדרטי ומים. השתמש במכסי כלוב שיש לי לולאות כפולות כדי לאפשר למיקום הבא של בקבוק שני, בנוסף לבקבוק המים. הערה: חולדות עשויים להיות מאוחסנות בנפרד ברגע שהם מגיעים למתקן טיפול בבעלי החיים.
  4. להתחיל לנהל את חולדות יומיות. הערה: כמדריך, בשבוע של טיפול אחד הוא בדרך כלל מספיק כדי לסגל אותם להיותו picked ומטופלים על ידי הנסיין.

.2 לסירוגין גישה אתנול בכלוב בבית

הערה: גישת אתנול לסירוגין התנהגות בכלוב בבית כדי להבטיח שחולדות תשתה כמויות רלוונטיות מבחינה פיזיולוגית של אתנול לפני שלב אימון התנהגותי של הניסוי מתחיל 17-19. ליזום הליך זה בשלב האור, למרות שזה יכול להיות יזם בכל עת במהלך מחזור האור או חושך.

  1. הכן שני בקבוקים לכל חולדה.
    1. השתמש בפלסטיק 100 מ"ל סיים גליל כבקבוק אתנול ובקבוק מים מפלסטיק סטנדרטי 473 מ"ל. השתמש בבקבוק אתנול קיבולת קטן יחסית, מלא כמעט עד אפס מקום בנפח מרבי, כדי להקטין את איבוד של אתנול עקב דליפה ואידוי.
    2. מלא בקבוק אחד עם 15% אתנול, שנעשה על ידי דילול 95% אתנול במים ברז. הערה: ריכוזי אתנול אחרים, כגון 10% או 20%, ניתן להשתמש במקום של 15% אתנול.
    3. Fill הבקבוק השני במים ברז.
    4. הכנס פקק גומי, עם צינור קשית המכיל מיסב למזעור זליגה, לכל בקבוק.
  2. הקים שני כלובי שליטה, טופלו באופן זהה לכלובים בבית עם החריג שכלובי השליטה אינו מכילים חולדות או מצעים.
    1. הכן בקבוקי אתנול ומים לכלובי שליטה כמפורט בשלבי 2.1.1 - 2.1.4.
    2. השתמש באמצעים המתקבלים מכלובי השליטה לשלוט על שפיכה ו / או אידוי שעלול להתרחש במהלך פגישת גישת אתנול (כפי שמתוארים בשלבי 2.8.1 - 2.8.2).
  3. לשקול את כל בקבוקי אתנול ומים. להקליט את כל המשקולות.
  4. לשקול את כל החולדות. להקליט את כל המשקולות.
  5. מניחים את בקבוק אתנול ובקבוק מים בכל כלוב בבית ולשלוט בכלוב באותו הזמן. השאר את שני הבקבוקים על הכלובים ל24 שעות.
  6. בתום תקופת 24 שעות, להסיר את שני הבקבוקים מכלובים באותו הזמן.
  7. לשקול את כל בקבוקי אתנול ומים. להקליט את כל המשקולות.
  8. כדי לקבוע כמה אתנול ומים נצרכים, בתקופה 24 שעות, לחסר את המשקל של כל בקבוק כאשר הוא הוסר מהכלוב הביתה מהמשקל של הבקבוק כאשר הוא הונח על הכלוב בבית 24 שעות קודם לכן עבור כל חולדה.
    1. לעשות את אותו הדבר עבור שני כלובי השליטה, ולאחר מכן לחשב את הכמות הממוצעת של שפיכה לכל נוזל.
    2. הפחת את הכמות הממוצעת של אתנול ודליפת מים, בהתאמה, מאמצעי אתנול וצריכת מים המקביל לכל חולדה.
    3. השתמש באמצעי הבדל דליפה מבוקרת אלה כדי לחשב את צריכת אתנול בגרם / קילוגרם, צריכת מים, והעדפת אתנול.
  9. כדי לחשב את צריכת אתנול (ז / קילוגרם), להמיר ראשון במשקל (גרם) של פתרון אתנול נצרך לנפח (מ"ל) המבוסס על הצפיפות של הפתרון הכולל (רכיבי אתנול + מים), על פילנפח הנוסחה (מ"ל) = משקל (ג) / צפיפות (g / ml). הערה: הצפיפות של הפתרון תשתנה כפונקציה של ריכוז אתנול.
    1. בשלב הבא, להכפיל את הנפח (מ"ל) של פתרון אתנול הנצרך על ידי הצפיפות (g / ml) של אתנול בקנה מידה לפתרון אחוז המסוים משמש, להניב המשקל (גרם) של אתנול נצרך.
    2. מחלקים את המשקל (גרם) של אתנול הנצרך על ידי משקל החולדה (קילוגרם) כדי להשיג את g / אמצעי ק"ג צריכת אתנול.
  10. כדי לחשב העדפת אתנול, להביע את צריכת אתנול (מ"ל) כאחוז מנוזל הכולל (מים אתנול +, מ"ל) הצריכה.
  11. להחזיר את בקבוק המים רק חזרה לכלוב בבית של החולדה. עבור שעה 24 הבאה, לתת גישת חולדות למים אבל לא אתנול. במקום בקבוק אתנול, למקם את בקבוק מים שני שקל מראש בכלוב בבית.
  12. בתום תקופת 24 שעות, להסיר את שני בקבוקי המים מהכלוב באותו הזמן.
  13. שוקל שני הקבוצות של בקבוקי מים. להקליט את כל weights.
  14. הפחת את המשקל של כל בקבוק כאשר הוא הוסר מהכלוב הביתה מהמשקל של הבקבוק כאשר הוא הונח על הכלוב בבית 24 שעות קודם לכן, הפחתה את מידת דליפה הממוצעת המתקבלת מכלובים שליטה כמתואר בשלבים 2.8.1 - 2.8.2.
  15. השתמש באמצעי הבדל בשליטת שפיכה אלה כדי לחשב את צריכת מים.
  16. להתחיל את המחזור שוב על ידי מתן שני בקבוקי מים אתנול וחולדות, כפי שמתואר בצעדים 2.1 דרך 2.14.
    1. חזור על מחזור זה למרובה (על 12) הפעלות לגרום לרמות גבוהות ויציבה של צריכת אתנול. ראה איור 1 לתוצאות נציג של צריכת אתנול (ז / קילוגרם) בכלוב בבית.
    2. החלף את המיקום המרחבי של בקבוק אתנול ומים על מכסה הכלוב על פני מפגשים כדי למנוע ההתפתחות של העדפת צד.
    3. בצע פתרון אתנול טרי פעם בשבוע כדי להבטיח ריכוז אתנול מדויק ויציב על פניהפעלות. למזער את ההשפעה של אידוי של אתנול על פני תקופות ממושכות של זמן שימוש בגישה זו.

3 מכשירים

  1. בית כל תא אוויר בתוך תא מאוורר, החלשת קול.
  2. לבנות תא אחד מיזוג אוויר לרצפת מוט פלדה אל חלד מתכת, תקרת פוליקרבונט ברורה, פוליקרבונט ברור קיר אחורי וקדמית דלת, והצדדיים פנל מתכת אלומיניום.
    1. התקן יציאת נוזל מרכזי בסמוך לבסיס של דפנות מתכת תקין. לצייד את הכניסה לנמל הנוזל עם תא פוטואלקטרי אינפרא אדום כדי לזהות כניסות לנמל.
    2. חיבור צינורות פוליאתילן מהחלק האחורי של נמל הנוזל למזרק 20 מ"ל המכיל אתנול באמצעות מחט קהה שקצהו. הנח את המזרק לתוך משאבת מזרק נמצאת מחוץ לתא מרכך-הצליל. לאימוני אפליה הפבלובית, לטעון אתנול לתוך המזרק לפני הצבתו למשאבה. ראש הצינור בy קידום ידני המשאבה, ולאחר מכן לנגב את אתנול עודף מנמל הנוזל.
    3. על הדפנות השמאלית, להתקין houselight לבן מרכזית בסמוך לתקרה של החדר.
    4. להתקין השלט (מחזור הרץ 2) ומחולל רעש לבן עם רמקול בפינה השמאלית העליונה של הדפנות עזבו.
  3. לצייד כל תא אוויר עם תצורה מסוימת של חוש הריח, וגירויים חזותיים, מישוש כדי ליצור הקשר ייחודי.
    1. השתמש בשני הקשרים שונים, המיועדת מחצית Configure הקשר 1 וההקשר .2 של תאי האוויר כקשר 1 ואת החצי השני כקשר 2.
    2. כדי ליצור הקשר 1, למקם פנלים שחורים קרטון מעל התקרה וקירות הקדמיים ואחורי של החדר, ריח לימון תרסיס (10% v / v, שנעשה על ידי שמן לימון דילול במים ברז) לתוך צלחת פטרי ולמקם אותו במרכז של מגש פסולת מתכת מתחת לרצפה של החדר, והכנס פנל רצפת פוליקרבונט ברור על פני r המתכתרצפת od. מרפד את מגש הפסולת עם מגבת נייר סופגת או אוניית ספסל.
    3. כדי ליצור הקשר 2, להותיר את התקרה והקירות הקדמיים ואחוריים של החדר נחשף, כך שהם ברורים, לרסס ריח שקדים (10% v / v, שנעשה על ידי דילול benzaldehyde במים ברז) לתוך צלחת פטרי ולמקם אותו במרכז במגש פסולת מתכת מתחת לרצפה של החדר, והכנס פנל רצפת מתכת מחורר על רצפת מוט מתכת. מרפד את מגש הפסולת עם מגבת נייר סופגת או אוניית ספסל.

.4 הרגלה

להרגיל חולדות לחדר אימון התנהגותי וכל אחד משני ההקשרים בתוך תאי אוויר. עבור שלב זה של הניסוי, אל תטען אתנול ל20 מ"ל המזרקים.

  1. להרגיל חולדות לתהליך של להיות מועברים ממתקן הטיפול בבעלי חיים להכשרת החדר התנהגותיות במעבדה בשתי פגישות התרגלות קצרות.
    1. בפגישה הראשונה, לטעון את החולדות in כלובים שלהם בבית על עגלת גלגלים במתקן הטיפול בבעלי החיים, ולהעביר אותם לחדר אימון התנהגותי במעבדה. להאיר את האורות בחדר, מדליק את האוהדים בכל תא קול מרכך, לצאת מהחדר, סוגר את הדלת, ולתת לחולדות להסתגל לסביבה חדשה זו עבור 20 דקות, תוך שנותרו בכלובים בביתם על העגלה. בסוף תקופת 20 דקות זה, להחזיר את החולדות למתקן הטיפול בבעלי החיים.
    2. במושב השני, להביא את החולדות לאימוני החדר התנהגותיות במעבדה. כמו בעבר, להשאיר את האורות ואוהדי חדרון בחדר. להישאר בחדר, עם הדלת סגורה כדי למזער את ההפרעות, ולטפל ולשקול כל חולדה בחדר האימון התנהגותי. רשום את המשקולות, ולאחר מכן להחזיר את החולדות למתקן הטיפול בבעלי החיים.
  2. להרגיל חולדות לתאי האוויר בשתי פגישות התרגלות קצרות.
    1. להעביר את החולדות לחדר אימון התנהגותי, להקליט המשקל של כל עכברוש,ולטעון בכל עכברוש לתוך תא האוויר שנקבע לו.
    2. בפגישה ההתרגלות הראשונה שהוקמה מחצית התאים כקשר 1 והשאר כקשר 2.
    3. בפגישה ההתרגלות השנייה להגדיר תא אחד עם ההקשר שלא היה בשימוש במפגש הקודם.
    4. לנהל פגישות הרגלה באופנה מתאזנת, מחצית מהחולדות כך שהם נחשפו לראשונה להקשר 1, ואחריו הקשר 2, ואת החצי השני הם נחשף לראשונה להקשר 2, ואחרי הקשר .1 באופן אידיאלי, לנהל שני מפגשי הרגלה ב באותו יום, למרות שהם יכולים להיות התפשטו על פני יומיים במידת צורך.
    5. למפגשי הרגלה, להשתמש בתוכנת מחשב כדי להאיר את דקות houselight 1 לאחר שהונפקה התכנית. רשום את המספר הכולל של ערכי יציאת נוזל נעשו במהלך 20 דקות. בסוף הפגישה, לתכנת את houselight לכבות. אל תציג כל אתנול או רמזים במהלך פגישות הרגלה.
  3. הסר חולדות מהתאים, להחזיר אותם לכלובים בביתם, ולהעביר אותם בחזרה למתקן הטיפול בבעלי החיים.
  4. נקה את הציוד (לדוגמא, לוחות רצפה, מגשי פסולת, צלחות פטרי). ראה שלב 5.7 לפרטים נוספים.

.5 הפבלובית אפליית הדרכה (PDT)

חולדות התאמן להתנהגותית להפלות בין אות שמיעתית אחד שהוא זיווג עם אתנול קיו שמיעה שני שהוא לא. עבור שלב זה של הניסוי, למלא 20 מ"ל המזרקים עם 15% אתנול.

  1. לצייד כל תא אוויר עם תצורה ספציפית של חזותי, חוש הריח, וגירויים מישוש ליצור הקשר ייחודי, כפי שמתואר בשלבים 3.3.2 ו3.3.3
    1. הקצאת מחצית מהחולדות להקשר 1 ואת החצי השני להקשר 2 באופנה מתאזנת, המבוסס על צריכת אתנול והעדפה בממוצע על פני 2 המפגשים האחרונים של הליך גישת אתנול כלוב בבית. עיין בהמשךשלוחה המשמשת במהלך PDT כהערת א הקשר: כל עכברוש צריך לחוות רק הקשר אחד בשלב זה של אימונים.
    2. לוודא כי גירוי חוש הריח הוא הגירוי הקונטקסטואלי האחרון שיש להוסיף לכל תא אוויר. סגור את הדלתות של החדר והתא מרכך קול להכיל את גירוי חוש הריח ולמזער את הערבוב של ריחות שונים.
  2. להביא את החולדות לחדר אימון התנהגותי, להקליט המשקל של כל עכברוש, ולטעון בכל עכברוש לתוך תא האוויר שנקבע לו.
  3. ליזום תכנית המחשב ששולטת על הרצף הבא של אירועים במהלך כל מושב PDT.
    1. בהוצאו 5 דקות אחרי התכנית, להאיר את houselight.
    2. להציג את גירוי הרעש הלבן ושלט גירוי 16 פעמים כל אחד. תייעד את אחד מהגירויים השמיעתיים אלה להיות + CS ואחר להיות CS-, באופנה מתאזנת על פני שני ההקשרים.
    3. להפוך כל ליטר משפט CS + וCS-AST 10 שניות.
    4. לספק 0.2 מ"ל אתנול ליציאת הנוזלים במהלך 6 שניות האחרונות של + CS. אינו מספק כל אתנול במהלך CS-.
    5. הפוך כל מושב PDT 58 דקות האחרונות בממוצע. להציג + CS וCS- כל אחד על לוח הזמנים של שניות משתנים זמן 67.
    6. ערכים רשומות נוזל נמל במרווח שניות CS 10 (10 שניות במהלך מצגת CS), מרווח מראש CS 10 שניות (10 שניות מייד לפני תחילת CS), ואת המרווח שלאחר CS 10 שניות (sec 10 מייד הבא CS לקזז) עבור שניהם CS + ומצגות CS-, כמו גם ערכי יציאת נוזל הכולל עבור כל הפגישה. גם להקליט את משך הזמן של כל כניסת יציאה נעשתה בהפסקות.
    7. בסוף הפגישה, להפוך את houselight את.
  4. הסר חולדות מהתאים, להחזיר אותם לכלובים בביתם, ולהעביר אותם בחזרה למתקן הטיפול בבעלי החיים.
  5. בדוק את יציאות נוזל על מנת להבטיח כי חולדות שנצרכו 3.2 מ"ל של אתנול מועבר בכל PDT שלession.
  6. שטוף את אתנול מצינורות פוליאתילן עם מזרק 60 מ"ל המכיל כמות קטנה של מים. לאחר מכן, תעבור 60 מ"ל של אוויר דרך צינורות באמצעות מזרק שני, ריק, כדי לוודא שהוא יבש.
  7. נקה את הציוד. לניקוי יומי, לשטוף את לוחות הרצפה, מגשי פסולת, וצלחות פטרי. פעם בשבוע, לנקות את כל תא האוויר. אין להשתמש במוצרי ניקוי מבושמים כדי למנוע החדרת ריחות לא רצויים למנגנון הניסיוני.
  8. המשך מפגשי PDT יומיים עד חולדות להראות אפליה יציבה בתגובות כניסת יציאתם ל+ CS לעומת CS-. הערה: ערכי הנמל נעשו בתגובה ל+ CS יגדלו עם הפעלות, ואילו ערכי יציאה שנעשו בתגובה לCS- צריכים להישאר נמוכים. המספר המדויק של פגישות PDT הדרוש כדי להשיג מופלה מותנה להגיב יכול להשתנות, אבל, כמדריך, מתכננים כ 20 מפגשים.

.6 הכחדה

  1. לצייד כל צ'אם אווירבער עם חזותי, חוש הריח, וגירויים מישוש ליצור הקשר זה הוא שונה מזו של החולדות חוו במהלך פגישות PDT. לדוגמא, אם הקשר 1 שימש בPDT, להגדיר את התא כהקשר 2 עבור הפעלות הכחדה. עיין בהקשר משמש במהלך ההכחדה כB. הקשר
  2. לנהל פגישות הכחדה זהה למפגשי PDT, אך אינו מספק כל אתנול במהלך + CS.
    1. השתמש באותה תוכנת מחשב ששימש במהלך PDT להציג + CS וCS-.
    2. כדי לשמור על עקביות לאורך שלבים של הניסוי, לטעון מזרק ריק לתוך משאבת המזרק, ולהשאיר את המשאבה מופעלת. ודא צינורות פוליאתילן אינו מכילים אתנול לפני מפגשי הכחדה.
  3. המשך מפגשי הכחדה יומיים עד חולדות אין תכנית ארוכה יותר מופלות להגיב בין + CS וCS-. הערה: ערכי נמל נעשו בתגובה ל+ CS צריכים לרדת בהדרגה על פני מפגשי הכחדה, עד שאין differeפליטות בין ערכי נמל נעשו בתגובה ל+ CS וערכי יציאה שנעשו בתגובה לCS-. המספר המדויק של מפגשי הכחדת הצורך לכבות מזגן להגיב יכול להשתנות, אבל כמדריך, מתכנן כ 8 מפגשים.
  4. נקה את הציוד בסוף כל פגישה, כמתואר בשלב 5.7.

.7-Induced הקשר מבחן חידוש

  1. לצייד כל תא אוויר עם חוש הריח, וגירויים החזותיים, מישוש כדי ליצור את ההקשר שחווה במהלך מפגשי PDT. לדוגמא, אם חולדה ניתנה חוותה הקשר 1 במפגשי PDT, להגדיר התא שלו כקשר 1 בפגישה המבחן. עיין בהקשר משמש במהלך בדיקת החידוש כא Context
  2. לבצע את בדיקת חידוש מושרה הקשר זהה למפגשי PDT, אך אינו מספק כל אתנול במהלך בדיקת ההתחדשות. להציג את
    CS + וCS- כמו קודם במהלך פגישות PDT, אבל לעכב אתנול.
    1. השתמש באותו pr המחשבogram ששימש במהלך PDT להציג + CS וCS-.
    2. כדי לשמור על עקביות לאורך שלבים, לטעון מזרק ריק לתוך משאבת המזרק, ולהשאיר את המשאבה מופעלת. ודא צינורות פוליאתילן אינו מכילים אתנול לפני פגישת המבחן.
  3. שים לב לחידוש מושרה הקשר של מיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה. הערה: אפקט חידוש זה יהיה ברור על ידי עלייה סלקטיבית במספר כניסות יציאה נעשו בתגובה ל+ CS, ללא שינוי בכניסה שנעשתה בתגובה לCS-, יחסית לCS + וCS- התנהגות נמל להגיב נצפתה ב סוף אימון הכחדה.
  4. נקה את הציוד בסוף הפגישה, כמתואר בשלב 5.7.

תוצאות

גישה לסירוגין אתנול בכלוב בבית: צריכת אתנול (ז / קילוגרם) ועליית העדפת אתנול על פני הפעלות של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית, בדרך כלל להגיע לרמות יציבים בתוך 8 - 12 מפגשים (איור 1). בערכת הנתונים מוצגת באיור 1, צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נעה 1.33-6.44 גר '/ קילוגרם לחולדות בודדות. שלב צריכת אתנול כלוב בבית של הניסוי ניתן לעצור פעם אחת גרם / צריכת קילוגרם יש התייצבה, וחולדות נשמרות ברמה יציבה זה של שתייה למספר המפגשים.

כדי לנתח את הנתונים מהשלב הזה, לבצע ניתוח חוזר ונשנה-צעדים נפרדים של שונות (ANOVA) על פני הגורם בתוך-הנושא של מפגש לצריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול.

סכמטי של הליך חידוש מושרה הקשר: כל שלב שלהליך ניסיוני (PDT, הכחדה, מבחן חידוש) מתואר באיור 2. ראה כותרת איור לפרטים נוספים.

ניתוח מדדים ונתונים תגובה: בכל שלבי ההתנהגות מתוארים להלן, תגובות כניסת יציאה שנעשו במהלך + CS וCS- הם מנורמלים עם התייחסות מראש CS תגובות כניסת בסיס יציאה. כדי ליצור את אמצעי CS מנורמלים, להפחית את מספר ערכי יציאה שנעשו במהלך מרווח הבסיס טרום CS (שניות 10 מייד לפני תחילת CS) ממספר ערכי נמל שבוצעו במהלך המצגות של + CS וCS-. CS + המנורמל ואמצעי CS- מנורמלים לשמש כמדדים של התנהגות שהושרו באופן ספציפי על ידי מצגות CS, מוגבהות מעל רמות בסיס.

לנהל חוזרים ונשנים-צעדים נפרדים ANOVA עם גורמי הנושא בתוך והנשנים של פגישה וסוג CS (CS + לעומת CS-) לPDT ושלבי הכחדה. להשוואות בין שלב (PDT, הכחדה, לחדשאל מבחן), נתוני שימוש בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של PDT והכחדה והמפגש של נתוני בדיקת חידוש אחד בחזרו-אמצעי ANOVA. לעקוב אחר השפעות משמעותיות עיקריות ואינטראקציות, מבחני t post hoc שימוש למדגמים בלתי תלויים או לזווג שמתוקנות להשוואות מרובות. קריטריון למשמעות מוגדר בα = 0.05.

PDT: תגובות כניסת נמל לעליית CS + על פני מפגשי PDT, ואילו תגובות כניסת יציאה לCS- יישארו נמוכות ויציב, הכוללים. שים לב שתגובות כניסת היציאה לCS- עלול להגביר מעט כבר בפגישות הראשונות של אימון PDT; עם זאת, ערכי יציאה שנעשו בתגובה לCS- יתייצבו ברמה נמוכה בהרבה מאלה שנעשו בתגובה ל+ CS. אפליה מוצלחת היא שמעידה העלאה משמעותית מבחינה סטטיסטית בערכי יציאה במהלך CS + בהשוואה לCS- (איור 3). תוצאה זו מצביעה על כך שמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יש להיותen הוקם ל+ CS, אבל לא CS-.

הכחדה: תגובות כניסת נמל ל+ CS לרדת בהדרגה על פני מפגשי הכחדה. תגובות כניסת נמל לCS- יישארו נמוכות ויציבה על פני מפגשי הכחדה. באופן אידיאלי, מופלה להגיב הוא בוטל על ידי סוף אימון הכחדה, כפי שמעידים על חוסר הבדל משמעותי סטטיסטי בין ערכי נמל ל+ CS וCS-. עם זאת, אין זה נדיר עבור מידה מסוימת של מופלה להגיב להישאר, אפילו בסוף אימון הכחדה. במקרה זה, חשוב לוודא שתגובות כניסת יציאה ל+ CS בסוף אימון הכחדה מבחינה סטטיסטי נמוכים מתגובות כניסת יציאה ל+ CS בתחילת ההכחדה, כמו גם בסוף PDT (איור 3) . דפוס זה של תוצאות מצביע על כך שהמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלת כבה באופן משמעותי.

מבחן חידוש מושרה הקשר: נמלתגובות כניסה לעליית CS + במבחן החידוש מושרה הקשר, ביחס לערכי נמל CS + נצפו בסוף אימון הכחדה. גידול זה הוא סלקטיבי ל+ CS, כערכי יציאה לCS- יישארו ללא שינוי. בנוסף, ערכי יציאה ל+ CS מבחינה סטטיסטי גבוהים בהשוואה לערכי יציאה לCS- במבחן החידוש מושרה הקשר (איור 4). אישור סטטיסטי של השוואות של ערכי CS + יציאה בין ההכחדה ובדיקה, כמו גם השוואות של CS + וערכי יציאת CS- בתוך מבחן, מצביע על התחדשות סלקטיבית של מיזוג הפבלובית התנהגות שוחרת אלכוהול הנגרמת על ידי הקשר האלכוהול קשור במבחן.

figure-results-1
איור 1 הסלמה של צריכת אתנול והעדפה הנגרמת על ידי גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. ממוצע &177 #; SEM () צריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול (B) על פני 12 מפגשים של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. שני הצעדים להגדיל בדרך כלל על פני פגישות ולאחר מכן לייצב. צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נע 1.33-6.44 גר '/ קילוגרם לחולדות בודדות. נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות זכרים הארוך אוונס שתיית 15% (V / V) אתנול.

figure-results-2
. איור 2 סכמטי של ההליך ניסיוני ההליך מורכב משלושה שלבים: הכשרת אפליה הפבלובית, הכחדה, ומבחן חידוש (PDT) הנגרם על ידי הקשר. במהלך כל מפגש PDT, חולדות לקבל 16 ניסויים של גירוי אחד שמיעתי מותנה (CS +) שמסמן את המשלוח של אתנול ו16 ניסויים שלגירוי שני שמיעתי (CS-) שאינו קשור למשלוח אתנול. מפגשי PDT יתקיימו בהקשר, מורכבים מתצורה ספציפית של חזותי, חוש הריח, וגירויים מישוש. במהלך פגישות הכחדה, שמתנהלות בהקשר B, מורכב מקבוצה של גירויים חזותיים, חוש הריח, ומישוש שונה, + CS וCS- מוצגים אבל אתנול הוא נמנע. למבחן חידוש מושרה הקשר, חולדות חזרו להקשר, ו+ CS וCS- מוצגים ללא אתנול. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

figure-results-3
איור 3 רכישה והכחדה של m להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע מופלים ± SEM ערכי נמל מנורמלade במהלך + CS וCS- פני PDT (מפגשי 1 - 18) בהקשר והכחדה (מפגשי 19 - 26) בB. הקשר נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (v / v) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P <0.05, CS + לעומת CS-. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier.

figure-results-4
איור 4 חידוש הערכים להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע ± SEM נמל מנורמל נעשו במהלך + CS וCS- במפגשי PDT בהקשר, הפעלות הכחדה בהקשר B, ובדיקת חידוש בהקשר א נתונים הם מעשה הקשר בממוצע לכל שני המפגשים האחרונים של PDT והכחדה; מבחן החידוש הוא פגישה אחת. אלההנתונים התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (V / V) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P <0.05; ** P <0.001, CS + לעומת CS-. #p <0.05, CS + PDT לעומת CS + הכחדה. ^ P <0.05, הכחדת CS + לעומת מבחן CS +. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier.

דיון

תוצאות מהליך זה עולים כי גירויים סביבתיים בדידים שאופן שיגרתי מלווים משלוח אלכוהול יכולים לרכוש את היכולת לנהוג התנהגות שוחרת אלכוהול. הם גם מראים כי גירויים קונטקסטואליים הקשורים לזמינותו או היעדריו של אלכוהול לפני יכולים להדריך התנו תגובות התנהגותיות לרמזים אלכוהול חזוי בדידים.

שלבים קריטיים בפרוטוקול

הקשרים במשימה הנוכחית לשלב גירויים שהם חיצוניים לחולדה. עם זאת, מדינת interoceptive של העכברוש בבדיקה יכולה גם להוות "הקשר" שיכול להשפיע על חידוש 20. לכן חשוב להרגיל חולדות לכל נהלים שעלולים להתרחש לפני בדיקת ההתחדשות ולשנות את מצב interoceptive, כמו microinfusions תוך גולגולתי או זריקות מערכתיות. יתר על כן, התרגלות לmicroinfusions או זריקות מערכתיות צריכה להתנהל לפני שתי ההכחדה וPDT שלessions, כדי למנוע נהלים כאלה מלהפוך קשורים בשלב מסוים אחד של הניסוי.

פרמטרים זמניים, כגון משך CS, מרווח CS-US, ומרווח intertrial (ITI), כבר מזמן ידועים להשפיע מותנים להגיב במגוון של פרדיגמות אוויר 21-26. באופן דומה, פרמטרים של זמן עשויים להשפיע על ההתבוננות בהשפעת החידוש בהליך שלנו. כל קבוצה של פרמטרים אחרים מאלה שצוינו בפרוטוקול חייבת להיות מאומתת במחקרי טייס ניסוי לפני שתמשיך להעסיק אותם בחקירות גדולות יותר.

שינויים ופתרון בעיות

המחקר קודם שנעשה מצא כי הכמות של אתנול שחולדות לצרוך בכלוב בבית יכולה להשתנות כפונקציה של הספק שממנו החולדות נרכשות 17,27. ספק הוא אפוא שיקול חשוב עבור שלב זה של המחקר. בדומה לכך, הבחירה של מתח חולדה צריכה להיות שותףnsidered בזהירות, שכן יש דיווחים רבים על הבדלי מתח בצריכת אתנול 28-31.

העבודה קודמת בפרדיגמה אוויר מרתיעה הראתה כי הגיל ההתפתחותי של חולדות משפיע על התצפית של התחדשות של תגובת פחד מותנית הפבלובית 32. חוסר השפעת התחדשות בחולדות צעירות מאוד (צעיר יותר מיום הלידה 20) כבר הציע להיות בשל קידוד לקוי של מידע קונטקסטואלי 33. הגיל ההתפתחותי של חולדות שישמשו בהליך הנוכחי ולכן צריך להילקח בחשבון.

חידוש הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה מותנית נצפה כאשר 10% 9,16, 15% 14, או 20% 15 פתרונות אתנול שמשו במהלך גישת אתנול כלוב בבית ושלבי PDT של הניסוי. חוקרים יכולים להשתמש בכל ריכוזים של אתנול אלה לצורך הקמת הליך זה בLaboratories.

במהלך הרכישה של הכשרת אפליה הפבלובית זה חשוב לבדוק יציאות נוזל לאחר כל פגישה, כדי להבטיח שכל אתנול שנמסר כבר נצרך. השארת חולדות בתאי האוויר ל10 נוספות - 15 דקות לאחר כל פגישה ניתן לעשות זאת בשלב מוקדם בPDT לעודד צריכה של כל אתנול שלא צרך במהלך הפגישה. מספר החולדות עוזבים אתנול unconsumed בנמלים צריך לקטון PDT מתקדם. אם עד סוף חולדות PDT הם או (א) לא לצרוך את כל אתנול ו / או (ב) אינו מגיב ל+ CS אז צריכים להיות ירד נושאים אלה מהמחקר. רוב החולדות באופן מהימן להגיב יותר ל+ CS מאשר CS-. עם זאת, כמה חולדות עשויות להגיב ברמות גבוהות לשניהם הרמזים, ובכך לא הראו סימנים ברורות של אפליה. חולדות שמראות גבוהות מגיבות לשניהם + CS וCS- במהלך PDT לא ירד מהמחקר. מניסיוננו, נושאים אלה להראות אפליה מדהימהבמהלך הפגישה הראשונה הכחדה בהיעדר אתנול, המצביעה על כך הרמות גבוהות שלהם להגיב לCS- במהלך PDT מונעות על ידי הנוכחות של אתנול בנמל הנוזל. נושאים אלה נוטים גם להראות השפעות חידוש חזקות.

מגבלות של ההליך

בגלל מבחן החידוש מתבצע בהעדר אתנול, ערכי יציאה מותנים שהושרו על ידי + CS להפחית בהדרגה על פני פגישת המבחן. לפיכך, הסכום הכולל של התנהגות שנוצר במבחן, שכנגדה ניתן להעריך שינויים מושרה בניסוי, הוא נמוך למדי. כי במשימה זו מגיבה נוטה להיות גבוהה יותר בתחילת לעומת סוף פגישת הבדיקה, חשוב לבחון את ההשפעות של מניפולציות ניסיוני על מותנה להגיב על בסיס ניסוי על ידי משפט.

כניסות לקיבול הנוזלים לספק המידה תלויה העיקרית במשימה זו. עם זאת, כניסת יציאה שגויה עלולה להיות registered אם בעל חיים הוא מספיק קרוב לקיבול הנוזלים כדי לשבור את קרן אינפרא אדום על פני פתיחת נמל הנוזל עם השפם שלו. בעוד תגובות נדירות, שגויות הן ברורות כמו עלייה דרמטית בנמל כולל ערכים ביחס לנושא של ההתנהגות במפגשים קודמים. צילום וידאו בעלי החיים יקל על זיהוי של תגובות שגויות אפשריות, ולאפשר לניתוחים מדויקים יותר של ההתנהגויות הוצגו על ידי החולדות בכל אימון ובדיקה.

משמעות של טכניקה ביחס לשיטות קיימות / אלטרנטיביות

חידוש מושרה הקשר של סמים התנהגות מסוימות לקבלת מידה רבה למד באמצעות משימת אוויר אינסטרומנטלי שבו המשתנה התלוי העיקרי הוא תגובה אופרנטית, כגון מנוף לחץ 8,34 או האף לתקוע 12. בהליך הנוכחי, התגובה מחפש סמים היא "גישה מותנית" ליציאת הנוזלים שהושרה על ידי מצגות של+ CS. תגובה זו סבירה שנרכשה באמצעות למידה הפבלובית, המהווה את תהליך הלמידה שמתווך את היווצרותם של קשרים בין גירויים הסביבתיים וההשפעות תרופתי של תרופות של התעללות בבני אדם.

יישומים עתידיים

משימה זו יכולה להיות בשימוש בשילוב עם neuropharmacology, כימיה של מוח optogenetics וללמוד את המנגנונים העצביים המעורבים בחידוש מושרה הקשר של מיזוג הפבלובית שוחר אלכוהול התנהגות 16. בנוסף, מנגנונים התנהגותיים ועצביים המסדירים את הרכישה והכחדה של מיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יכולים להיחקר. לבסוף, משימה זו יכולה לשמש כדי לחקור מניפולציות של הכחדה שעלולה למנוע התחדשות, כיוון חשוב למחקר translational נועד להקטין את ההשפעה של תרופה קשורה הקשרים סביבתיים בתגובתיות לרמזים חזוי תרופה לאחר טיפול בחשיפת האות בaddi האנושיCTS.

גילויים

כל הליכי הניסוי אושרו על ידי ועדת האתיקה למחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה והנם בהתאם להנחיות מהמועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים. פרסום הגישה הפתוחה של מאמר זה התאפשר בזכות חסות של מד Associates בע"מ

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי להתמכרות לאלכוהול ואלכוהוליזם (RO1 AA014925 הוענק לד"ר פטרישיה ה. ג'אנק מאוניברסיטת קליפורניה, סן פרנסיסקו, קליפורניה, ארה"ב), Fonds de recherche du Quebec – Santé (NC) ומועצת המחקר למדעי הטבע וההנדסה (NC, 387224-2010). הפרסום בגישה פתוחה של מאמר זה התאפשר הודות לחסות Med Associates Inc.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
עגלת שירות כבדהRubbermaid#4520-88משמשת להובלת חולדות בכלוב הביתי שלהן מחדר המושבה לחדר ההתנהגות או למתקנים אחרים
חולדות, חולדות לונג-אוונסהרלןשקלו 220-240 גרם עם הגעתם
סולם אוהאוספישר#S402421לשקילת חולדות; טרפו תחילה את תחתית מיכל הפלסטיק, ואז הכניסו את החולדה לתוכו כדי לשקול אותו
שבבי בטא, אספןהרלן#7090Aמצעים לכלוב ביתי
NylaboneBio-Serv#K3580העשרה הניתנת בכלוב הביתי
צ'או מכרסמים הניתן לחיטויAgribrands, Charles River#5075להאכלת חולדות
מכסה כלוב בר תילAncare#R20SS2Bבהתאמה אישית עם שני חריצים עבור   בקבוקים
תחתית כלובAncare#R20PCלשכן חולדות
פקקיםAncare#8.5פקקי גומי לחסימת פתח בבקבוקי מים וצילינדרים מדורגים; הולך עם צינורות לגימת נקודות כדוריות 
צינורות כדוריים, באורך 1.5 אינץ'Ancare#TD-99מוכנסים לפקקים, מאפשרים לחולדות לשתות מבקבוקי מים וצילינדרים מדורגים
בקבוקי מיםAncare#FSPC8HTקיבולת 473 מ"ל (16 אונקיות), צריך להיות חסום עם פקק
צילינדרים מדורגים, 100 מ"לפישר#0300741להכיל אתנול במהלך חשיפה לאלכוהול בכלוב הביתי; יש לחתוך את הקצה הפיה כדי לאפשר חסימה עם פקקים
סולם מטלרטולדו#MS6001Sלשקילת בקבוקי מים ובלוני אתנול
צינורות פוליאתילן, קוטר פנימי 1/32 אינץ',   עובי דופן 1/32 אינץ', קוטר חיצוני 3/32 אינץ' פישר#14-169-1Aלחיבור מזרק אתנול 20 מ"ל ליציאת נוזל
מחט, 18 גרם, אורך 1.5 אינץ'פישר#B305199כדי לחבר צינורות פוליאתילן למזרקי אתנול; צריך להגיש
מזרקים, 20 מ"ל, Luer-Lok פישר לא סטרילי#1482316Jלהכיל אתנול על משאבות הנוזל; צריך להיות מחובר לצינורות הפוליאתילן על ידי מזרקי מחט 18 גרם 1 1/2
, 60 מ"ל, Luer-Lok לא סטריליפישר#14-820-11כדי לשטוף צינורות פוליאתילן לאחר הפעלות PDT
משאבת מזרק במהירות אחת, 3.33 סל"דMed Associates Inc.#ENV-018MDלהחזיק מזרקי אתנול של 20 מ"ל ולספק
יציאת נוזלMed Associates Inc.#ENV-254-CBכדי לאפשר אספקת אתנול במהלך מפגשי PDT; מחובר למזרקי אתנול עם צינורות פוליאתילן
גלאי אינפרא אדום כניסה לנמלMed Associates Inc.#ENV-215Mקבוע משני הצדדים של יציאת נוזלים; צריך 2 לכל יציאת נוזל
תאורת בית, 28 וולט, 100 mAMed Associates Inc.#ENV-135Mמספקת תאורה כללית בתא מיזוג
מודול קליקרMed Associates Inc.#ENV-225SMגירוי שמיעתי לתא מיזוג
מחולל רעש לבן עם רמקולMed Associates Inc.#PHM-100גירוי שמיעתי לתא מיזוג
רצפת ברMed Associates Inc.#ENV-009A-GFכדי ללכת עם מעיל ספסל תא בדיקה מודולרי
, סופגVWR#89126-790נייר סופג להכנסה למגש מתכת, צריך לחתוך כך שיתאים למגש המתכת
יריעת פוליקרבונט, עובי 1/8 אינץ', 12-5/8 אינץ' x 10 אינץ'ג'ונסטון פלסטיק#30102515כדי ליצור תוספת רצפה שקופה חלקה המשמשת להקשר 1. צריך לחתוך לחתיכות 11.5 אינץ' x 12.25 אינץ'
יריעת אלומיניום מחוררת, עובי 0.063 אינץ', 48 אינץ' x 96 אינץ', 0.250 אינץ' חורים x 0.375 אינץ' מרכזיאניקה פלדהכדי ליצור תוספת רצפה מחוררת המשמשת להקשר 2. יש לחתוך לחתיכות 11.5 אינץ' x 12.25 אינץ'
קרטון שחור, עובי 0.053 אינץ', 28 אינץ' x 44 אינץ'עומר דסרס#P1909לבניית לוחות המכסים את התקרה, הדלת והקיר האחורי של תא המיזוג בהקשר 1. צריך לחתוך לגודל. כל תא זקוק לשלושה לוחות בגודל של כ-11.5 אינץ' x 13.25 אינץ'. ניתן לחבר את הלוחות לצד הצר יותר באמצעות סרט דביק.
סרט דביק בעל חוזק לכל מטרה, 1.88 אינץ' x 45 יארד.סרטחומר דבק לחיבור לוחות הקרטון השחורים המשמשים לכיסוי הקיר האחורי, התקרה והדלת בהקשר 1.
תא בדיקה מודולריMed Associates Inc.#ENV-009Aתא מיזוג
תא הנחתת קולAssociates Inc.#ENV-200R3AMמגיע עם מאוורר 28 וולט DC מותקן (#ENV-025F)
צלחת פטריפישר#08748Bתחתון בלבד, כדי להכיל את התמיסה המרוססת המספקת את גירוי הריח; צריך להיות מרוכז במגש המתכת בתאי מיזוג חבילת
ממשק PCIMed Associates Inc.#DIG-700P2-R2מחבר ארון ממשק שולחני למחשב; כולל כרטיס ממשק אחד, כרטיס פענוח אחד, כבל סרט אחד וכבל חשמל 1 28 וולט DC
ארון שולחן גדול וספק כוחMed Associates Inc.#SG-6510Dמשמש להכיל את 12 הכרטיסים הכלולים ב-SmartCrtrl 8 כניסה, 16 חבילת פלט
SmartCtrl 8 כניסה, 16 חבילת פלטMed Associates Inc.#DIG-716P2משמש לחיבור ובקרה של המכשירים בתא המיזוג. החבילה כוללת את כל הכבלים, מודול הממשק ולוח החיבור.
תוכנת Med PC IVMed Associates Inc.#SOF-735תוכנה להפעלת תוכניות. צריך להתקין במחשב.
צג LG, LCD 19 אינץ'חנות מחשבים קונקורדיה#W1942TQ-BFצג מחשב; ללכת עם מחשב עם Med PC IV
HP Z200 Tower Workstationחנות מחשבים קונקורדיה#BZ788US#ABAמחשב עליו מופעל Med PC IV
Benzaldehyde, ≥ 99%Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc.#B37-50לדלל במי ברז לריח הקשר שקדים
שמן לימון, בכבישה קרה, CaliforniaSigma Aldrich#W262528-1KG-Kלדלל במי ברז לריח הקשר לימון
אלכוהול אתילי, 95%אלכוהולמדלל במי ברז לריכוז הרצוי
אתנול ברווז Med מסחרי

מקורות

  1. Field, M., Duka, T. Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers. Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).
  2. Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics). Addiction. 95, 889-900 (2000).
  3. Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking. Addict Behav. 8, 1-10 (1983).
  4. Sinha, R. New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability. Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).
  5. Conklin, C. A. Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment. Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).
  6. Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity. Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).
  7. Janak, P. H., Chaudhri, N. The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction. Open Addict J. 3, 76-87 (2010).
  8. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core. Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).
  9. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats. Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).
  10. Crombag, H. S., Shaham, Y. Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats. Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).
  11. Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats. Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).
  12. Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking. J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).
  13. Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. Context is a trigger for relapse to alcohol. Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).
  14. Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats. Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).
  15. Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking. Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).
  16. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking. Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).
  17. Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats. Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).
  18. Simms, J. A., et al. Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats. Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).
  19. Wise, R. A. Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules. Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).
  20. Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms. Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).
  21. Pavlov, I. Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. , Oxford University Press. Oxford, England. (1927).
  22. Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. Trial and intertrial durations in autoshaping. J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).
  23. Holland, P. C. CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses. J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).
  24. Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. Some effects of two temporal variables on conditioned suppression. J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).
  25. Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression. J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).
  26. Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration. Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).
  27. Palm, S., Roman, E., Nylander, I. Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers. Alcohol. 45, 607-614 (2011).
  28. Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn. Alcohol. 10, 37-43 (1993).
  29. Goodwin, F. L., Amit, Z. Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study. Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).
  30. Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats. Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).
  31. Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms. Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).
  32. Yap, C. S., Richardson, R. Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects. Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).
  33. Carew, M. B., Rudy, J. W. Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis. Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).
  34. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats. Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

התנייה פבלוביתאימון הכחדהאימון הבחנהכניסות לנמל נוזליםרמזים שמיעתייםתאי התנייההזרקת אתנולבדיקות התנהגותיות
נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.