הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הכנה של תרבות דם כדוריים לראפיד בקטריאלי זיהוי ואנטיביוטיקת רגישות בדיקה

36K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/51985

⸱

15 באוקטובר 2014

 ,  ,  , 
1Institute of Microbiology, University Hospital Center and University of Lausanne

במאמר זה

סיכום

הכנת גלולה חיידקים מהירה מתרבית דם חיובית יכולה לשמש כמדגם עבור יישומים כגון זיהוי על ידי MALDI-TOF, צביעת גראם, בדיקת רגישות לאנטיביוטיקה ובדיקת PCR מבוססת. התוצאות ניתן להעביר במהירות לרופאים כדי לשפר את התוצאה של חולים הסובלים מזיהומים בדם.

תקציר

זיהומים ואלח דם דם הם אחד גורמים עיקריים לתחלואה ותמותה. התוצאה המוצלחת של חולים הסובלים מבקטרמיה תלויה בזיהוי מהיר של הגורם המדבק להנחות טיפול אנטיביוטי אופטימלי. הניתוח של כתמים גרם מתרבית דם חיובית יכול להתנהל במהירות וכבר להשפיע על המשטר האנטיביוטי באופן משמעותי. עם זאת, זיהוי מדויק של הגורם המדבק עדיין יידרש לקבוע את הטיפול האופטימלי ממוקד. אנו מציגים כאן הכנת גלולה חיידקים פשוטה ומהירה מתרבית דם חיובית שיכול לשמש כדוגמה לכמה יישומים במורד הזרם חיוניים כגון זיהוי על ידי MALDI-TOF MS, בדיקת רגישות לאנטיביוטיקה (AST) על ידי assay דיפוזיה דיסק או מערכות AST אוטומטיות ועל ידי אוטומטי PCR מבוסס בדיקות אבחון. הביצועים של מערכות זיהוי וAST אלה שונים מיושמים ישירות על כדורי חיידקי תרבית הדם הוא מאוד siמילר לביצועים בדרך כלל מתקבל ממושבות מבודדות גדלו על צלחות אגר. בהשוואה לגישות קונבנציונליות, הרכישה המהירה של גלולה חיידקים מפחיתה באופן משמעותי את הזמן כדי לדווח על זיהוי שני וAST. לפיכך, החיוביות הבאה דם התרבות, זיהוי על ידי MALDI-TOF ניתן לדווח בתוך שעה פחות מ 1 ואילו תוצאות של AST ידי מערכות AST אוטומטיים או מבחני דיפוזיה הדיסק בתוך 8 עד 18 שעות, בהתאמה. באופן דומה, התוצאות של assay PCR מבוסס מהיר ניתן להעביר לרופאים פחות משעה 2 בעקבות הדו"ח של בקטרמיה. יחד, תוצאות אלו מראות כי ההכנה המהירה של גלולה חיידקי תרבית דם יש השפעה משמעותית על זמן זיהוי ותפנית AST ובכך על התוצאות המוצלחות של חולים הסובלים מזיהומים בדם.

מבוא

זיהומים בדם ואלח דם בחולים מאושפזים הם אחד גורמים עיקריים לתחלואה ותמותה. כך, תמותה הקשורים לזרם דם זיהומים הוא ציין ב% על 14 ל37% ממטופל מאושפז ועלולה להגביר 35% ביחידות לטיפול נמרצים לחולי 1-3. זיהוי המהיר של הגורם המדבק הוא מרכזי שינחה את טיפול מיקרוביאלית אופטימלי ולהגדיל את התוצאה המוצלחת של 4,5 טיפול האנטיביוטי. הניתוח המהיר של כתמים גרם מתרבית דם חיובית יש כבר השפעה משמעותית על ההסתגלות של טיפול האנטיביוטי 6,7 אבל זיהוי מדויק של הגורם המדבק נדרש לספק הטיפול האנטיביוטי המותאם הטוב ביותר לחולים. למשל, משטרי טיפול אנטיביוטי שונים צריכים להיות מיושמים, לאחר בקטרמיה עם Enterococci וסטרפטוקוקוס שקשה להבחין על ידי צביעת גראם. באופן דומה, זיהוי במיני לבאל דרוש כדי לאתר enterobacteria השלילי גרם קידוד גן ampC כרומוזומליות מקנות התנגדות מוגברת לβ-lactams 8.

עם תרבית דם חיובית, הגישה לאבחון הקונבנציונלית היא תת הגורם המדבק על צלחות אגר שונות, אשר דורש כמה שעות של זיהוי לפני דגירה נוספת עם גישות שונות, כוללים בדיקות ביוכימיות, צמיחה בתקשורת סלקטיבית שונה ומערכות זיהוי חיידקים אוטומטיות. הזמן לתוצאות של גישת אבחון קונבנציונלית הוא של כ 1 עד 3 ימים.

הופעתה של טכנולוגית הלייזר desorption בסיוע מטריקס / ספקטרומטריית מסת הזמן של טיסת יינון (MALDI-TOF) לזיהוי מהיר של מיקרואורגניזמים סיפקה כלי חדש כדי לזהות במהירות מיקרואורגניזמים ממושבות גדלו על צלחות אגר אלא גם ישירות מהדם חיובי תרבויות (איור 1) 9-12. השימוש בדואר של MALDI-TOF לזהות גורם מזהם מתרביות דם צמצם באופן משמעותי את הזמן לתוצאות לכמה דקות במקום שעות וימים הנדרשים על ידי שיטות מסורתיות. כפי שנאמר על ידי Croxatto et al. 13, את היעילות של זיהוי MALDI-TOF מסתמכת על פרמטרים שונים כולל טוהר של מיקרואורגניזם וכמות. שני קריטריונים אלו מתקבלים בקלות ממושבות דיסקרטיות גדלו על צלחות אגר אבל נדרשו טיפול קדם אנליטיים להעשרת חיידקים וטיהור מדגימות מורכבות כגון תרבות דם, אשר מכילות מרכיבים תאיים וחלבון מרובים שעלולים להפריע לזיהוי MALDI-TOF.

שיטות צנטריפוגה שיטות בידוד מיקרואורגניזמים שונים מתרבות דם כבר בשימוש במספר המחקרים כולל saponin או שיטת חומרי ניקוי עדין אחרת להפקת חיידקים 9,14, שיטה מפריד בסרום 10, תמוגה 12 ופתרונות מסחריים כגון ערכת sepsityper. המעבדה לאבחון בקטריולוגיה פיתחה הכנת גלולה חיידקים בדם תרבות פשוטה המבוססת על כדורית אדומה-תמוגה אמוניום כלוריד המאפשר זיהוי מהיר של חיידקים ושמרים על ידי MALDI-TOF ומערכות זיהוי אוטומטי (איור 2) 15. הכנת גלולה דם תרבות זו גם מספקת לדוגמה עבור יישומים במורד הזרם ישירים אחרים כגון צביעת גראם, בדיקות אבחון המבוססת על PCR אוטומטיים כגון POCT-PCRs לזיהוי המהיר של methicillin עמיד Staphyloccocus aureus (MRSA), ובדיקת רגישות לאנטיביוטיקה עם מערכות אוטומטיות AST ו / או על ידי מבחני דיפוזיה דיסק על צלחות אגר (איור 3).

בעבודה זו, אנו מתארים את השלבים השונים של הכנת גלולה חיידקים בדם התרבות כפי שהוסבר על ידי Prod'hom et al. 15 (איור 4). אנו גם דהסופר הפרוטוקולים עבור שלושה היישומים העיקריים שיכול להתבצע על גלולה תרבות דם: זיהוי על ידי 15 MALDI-TOF, זיהוי (ID) ובדיקת רגישות לאנטיביוטיקה (AST) עם המערכות האוטומטיות 16 לEnterobacteriaceae וstaphylococci וPCR- האוטומטי בדיקת אבחון המבוסס על זיהוי של MRSA 17.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול זה פותח ומאומתים הבא תהליכי המחקר ופיתוח וכללי אתיקה של המוסד שלנו לפני שמיושם ככלי שגרתי.

.1 הכנת תרבות הדם בקטריאלי גלולה ידי נוהל כלוריד כדורית אדומה-lysing אמוניום

  1. הכנת תרבית דם חיובית לצנטריפוגה שלאחר מכן.
    1. לעקר את כובע תרבית דם. הוספת 70% אתנול בכובע של הבקבוק ולשרוף אותו.
      הערה: אל תבצע את הצעד הזה תחת הזרימה למינרית.
    2. הזז את הבקבוק לזרימה למינרית. לאסוף 5 מ"ל של תרבית הדם עם מזרק 20 G.
    3. הוסף 5 מ"ל של תרבית דם בצינור צנטריפוגה 50 מ"ל מכיל 45 מ"ל של מים סטריליים (H 2 O) ולערבב את המדגם.
  2. הכנה של גלולה חיידקי תרבית דם על ידי צנטריפוגה תמוגה.
    1. צנטריפוגה המדגם XG ב 1000 ל10 דקות ב RT.
    2. רמוve supernatant (המכיל בעיקר H 2 O ותאי דם) עם משאבת ואקום מעבדה.
    3. Resuspend גלולה ב 1 מ"ל של אמוניום כלוריד תוצרת הבית lysing פתרון (0.15 M NH 4 Cl, 1 מ"מ KHCO 3). לשבור את הכדור על ידי גירוד ועל ידי vortexing הצינור צנטריפוגות המדגם ב140 XG ל10 דקות ב RT.
    4. בטל supernatant שמכיל בעיקר תאי דם אדומים פסולת.
      1. אם גלולה נותרה מדממת, resuspend גלולה ב2 מ"ל של H סטרילי והמזוקק 2 0 עד lyse נוסף תאי דם אדומים שיורית ולשטוף את הכדור. צנטריפוגה המדגם ב140 XG 10 דקות ב RT וזורקים supernatant.
    5. Resuspend גלולה ב200 μl של H 2 O
  3. תת תרבות דם על תקשורת אגר סלקטיבי ולא סלקטיבי שונים.
    1. לאסוף 1 מ"ל של תרבית הדם עם מזרק 20 G.
    2. לחסן 1 טיפה של int תרבות הדםo ארבעה רבעים על אגר דם, אגר שוקולד, אגר McConkey ואגר Schaedler.
    3. לדגור על 37 ° C אגר הדם וצלחות אגר שוקולד באווירה 5% CO 2, אגר McConkey באווירה רגילה והצלחת אגר Schaedler בתנאים אנאירוביים.
    4. עקוב צמיחת חיידקים על מדיה שונה.
    5. הגעה לטוהר חיידקים.

.2 זיהוי על ידי MALDI-TOF MS

  1. זיהוי ישיר מגלולת הדם.
    1. העברת 1 μl של גלולה הדם על צלחת יעד MALDI ולתת לו להתייבש על פלטפורמת חימום 42 מעלות צלזיוס.
    2. כיסוי המדגם עם 1 μl 70% חומצה פורמית ולתת לו להתייבש על פלטפורמת חימום 42 מעלות צלזיוס.
    3. כיסוי המדגם עם 1 μl של מטריצת MALDI (רווי פתרון של α-Cyano-4-hydroxycinnamic חומצה ב50% אצטוניטריל-2.5% חומצת trifluoroacetic) ולתת לו להתייבש על פלטפורמת חימום 42 מעלות צלזיוס.
    4. המשך MALניתוח DI-TOF MS עם מערכת MALDI-TOF MS כפי שתואר על ידי היצרנים.
    5. אם ציון ההזדהות אינו חוקי, ברמת המין (למשל עם ציון <2), לבצע הפקת חלבון של מדגם גלולה דם.
  2. זיהוי לאחר מיצוי חלבון מגלולת תרבות דם.
    1. מערבבים 20 μl של גלולה עם 1 מ"ל של 70% אתנול ו צנטריפוגות ב XG 13,000 עבור 2 דקות ב RT.
    2. בטל supernatant ולהוסיף 25 μl של 70% חומצה פורמית ו25 μl של אצטוניטריל 100% לגלולה. וורטקס במרץ לresuspend את כדורים. Resuspend כדורים קשים על ידי פירוקם עם טיפים פיפטה לפני vortexing.
    3. צנטריפוגה ב13,000 XG למשך 2 דקות ב RT. העברת 1 μl של supernatant (המכיל חלבונים המופקים) על צלחת יעד MALDI ולתת לו להתייבש על פלטפורמת חימום 42 מעלות צלזיוס. המשך כמתואר ב2.1.2.

.3 בקטריאלי Identification ואנטיביוטיקת רגישות בדיקה עם אוטומטית של מערכת מיקרוביאלית

  1. הכנת השעיה חיידקים לזיהוי חיידקים וAST עם מערכת חיידקים אוטומטית.
    1. הכן צינור פלסטיק המכיל 3 מ"ל של 0.45% פתרון NaCl סטרילי תואם למערכת החיידקים האוטומטית.
    2. הוספת נפח מספיק של גלולה תרבות דם ב0.45% פתרון NaCl לקבל השעיה חיידקים המתאימה לעכירות מק 'פרלנד של 0.6-0.8. מדוד את העכירות באמצעות מכונה densitometer.
      הערה: הנפח של גלולה חיידקי תרבית הדם משתנה 50-200 μl להשיג עכירות מק 'פרלנד של 0.6-.8.
  2. לחסן כרטיסים האוטומטיים גראם חיובי (GP) או גראם שלילי (GN) לזיהוי וכרטיסי AST האוטומטיים לבדיקת רגישות מיקרוביאלית של חיידקי Cocci גראם חיובי וגראם השלילי כפי שתואר על ידי היצרן.
    הערה: identification עם GP או כרטיסי GN אינו מיושם אם ערך ציון הזדהות MALDI-TOF MS הוא> 2. בדוק את טוהר של ההשעיה חיידקים על ידי subculturing ההשעיה חיידקים על אגר דם (GP וGN) וצלחות אגר MacConkey (GN).

.4 אנטיביוטי רגישות בדיקה על ידי Assay דיפוזיה דיסק

Assay דיפוזיה הדיסק מתואר על ידי הוועדה האירופית לבדיקת רגישות מיקרוביאלית (EUCAST, הגרסה 3.0, אפריל 2013, www.eucast.org).

  1. הכנת השעיה חיידקים לבצע בדיקת רגישות מיקרוביאלית על ידי assay דיפוזיה דיסק.
    1. הכן שפופרת זכוכית המכילה 3 מ"ל של .0.9% פתרון NaCl סטרילי.
    2. הוספת נפח מספיק של גלולה תרבות דם ב0.9% פתרון NaCl לקבל השעיה חיידקים המתאימה לעכירות מק 'פרלנד של 0.5. מדוד את העכירות באמצעות מכונה densitometer.
      הערה: הנפח של תרבות הדםגלולה חיידקים משתנה 50-200 μl להשיג עכירות מק 'פרלנד של 0.6-.8.
    3. מערבולת ההשעיה החיידקים.
  2. הרכבה של השעיה חיידקים על גבי אגר Mueller-Hinton (MH) או אגר אורגניזמים אגר אנין Mueller-Hinton (MHF) (MH בתוספת 5% דם defibrinated סוס ו20 מ"ג / L של dinucleotide אדנין β-Nicotinamide).
    1. טובלים מקלון צמר גפן סטרילי בהשעית החיידקים ולהסיר בעדינות את נוזלים עודפים על ידי הפיכת הספוגית על הקיר הפנימי של צינור הזכוכית.
    2. מורחים את ההשעיה החיידקים באופן אחיד על כל פני השטח של הצלחת אגר MH / MHF על ידי שטיפה בשלושה כיוונים או באמצעות מסובב צלחת אוטומטית.
  3. יישום של דיסקים מיקרוביאלית על צלחות אגר מחוסנת.
    1. החל מקרוב הדיסקים על פני השטח של יבשות צלחות אגר מחוסנת באופן ידני או על ידי שימוש במתקן רגישות דיסק.
    2. דגירה את הצלחת על טמפה המתאימהrature ואווירה כפי שמתואר בשיטת דיפוזיה EUCAST דיסק בדיקת רגישות מיקרוביאלית (3.0 גרסה, אפריל 2013, www.eucast.org).

.5 האוטומטי PCR מבוסס בדיקת אבחון לאיתור של MRSA

  1. באמצעות micropipette, להעביר 50 μl של גלולה תרבות דם לתוך הבקבוקון מגיב מדגם מסופק עם MRSA האוטומטי ערכת PCR מבוססת אבחון בדיקה ומערבולת במהלך 20 שניות.
  2. באמצעות micropipette 1 מ"ל, לוותר המדגם ליציאת הדגימה של המחסנית. הכנס את המחסנית לתוך מערכת PCR האוטומטית ולהתחיל assay כפי שתואר על ידי היצרן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במחקר שבוצע על ידי Prod'hom et al. 15, כדורי חיידקים המתקבלים על ידי צנטריפוגה תמוגה אמוניום כלוריד של 122 תרבות דם חיובית מ78 חולים נותחו על ידי MALDI-TOF MS. מתוך 122 תרבות דם חיובית, 95 (77.9%) זוהו בצורה נכונה, ברמת המין ואחד (0.8%) ברמת הסוג. 26 כדורי תרבות דם הנותרים (21.3%) לא נתנו שום זיהוי אמין על ידי MALDI-TOF. בין אלה, 21 היו חיידקים חיוביים גרם כולל 13 סטרפטוקוקוס ו5 staphylococci coagulase שלילי. חשוב לציין, 10 מתוך סטרפטוקוקוס מזוהה 13 היו Str...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בהשוואה לגישות אבחון תרבית דם החיובית קונבנציונליות, הרכישה המהירה של גלולה חיידקים על ידי שימוש בגישת צנטריפוגה אמוניום כלוריד תמוגה לצמצם את הזמן לדווח זיהוי על ידי 16 עד 24 שעה והזמן לדווח AST ידי 24 עד 48 שעה (איורים 1 ו 3).

מבוא מהיר של טיפול אנטיביוטי המתאים הוא מרכזי כדי לשפר את התוצאה של חולים הסובלים מזיהומים בדם. לפיכך, זיהוי המוקדם של הגורמים מזהמים בתוך שעה 1 ואחריו AST מהיר שהושג בכ ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

תודות

אנו מודים לטכנאים של המעבדה בקטריולוגיה של מרכז בית החולים של האוניברסיטה של ​​לוזאן לעזרתם כדי ליישם את הטכניקות במעבדה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מחט 20 גרםTerumo, לובן, בלגיהNN-2038R
50 מ"ל שפופרת פלקוןBD, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב352070צינורות צנטריפוגה 50 מ"ל
אמוניום כלורורMerck, דרמשטדט, גרמניה101145
אשלגן מימן פחמתיFluka, סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב 60340
חומצה פורמיתסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב F0507דליק, קורוזיבי
α-ציאנו-4-חומצה הידרוקסיצינמיתפלוקה, סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב 70990רעילות חריפה
אצטוניטרילסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב 271004דליק, רעילות חריפה
חומצה טריפלואורואצטיתסיגמא-אולדריץ', סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב T6508קורוזיבי, רעילות חריפה
Vitek 2 60 מכשירBiomé rieux, Marcy-l'Etoile, צרפת27202מכשיר מערכת מיקרוביאלית אוטומטית
Vitek 2 כרטיס גרם חיובי (GP)Biomé rieux, Marcy-l'Etoile, France21342אוטומטי GP  תעודת זהות
Vitek 2 AST-P580 כרטיסBiomé rieux, Marcy-l'Etoile, צרפת22233מערכת AST מיקרוביאלית אוטומטית
Vitek 2 כרטיס גרם שלילי (GN)Biomé rieux, Marcy-l'Etoile, צרפת21341תעודת זהות אוטומטית GN  תעודת זהות
Vitek 2 AST-N242 כרטיסBiomé rieux, Marcy-l'Etoile, צרפת413391מערכת AST מיקרוביאלית אוטומטית
Xpert MRSACepheid, Sunnyvale, Ca, USA  GXMRSA-100N-10טכנולוגיית הגברת חומצות גרעין MRSA
GeneXpert IV מכשירCepheid, Sunnyvale, Ca, ארה"במכשיר טכנולוגיית הגברת חומצות גרעיןGXIV-4-D
Microflex LT MALDI-TOF MS מכשירBruker Daltonics, ברמן, גרמניהBDAL microflex LT/SH
MSP 96 פלדת יעד BCBruker Daltonics, ברמן, גרמניה280799צלחת יעד MALDI
מד צפיפות מכשיר DensicheckBiomé rieux, Marcy-l'Etoile, France27208
MALDI Sepsityper kit 50Bruker Daltonics, ברמן, גרמניה8270170
Mac Conkey agarBiolife, מילאנו, איטליה4016702
Mueller-Hinton agarOxoid, המפשייר, אנגליהCM0337Mueller-Hinton agar (MH) 
MHF אגרBiomé rieux, Marcy-l'Etoile, צרפת43901Mueller-Hinton agar-fastidious organisms agar (MHF)
BD columbia III agarBD, Franklin Lakes, NJ, USA254071אגר
דם BD אגר שוקולדBD, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב254089אגר שוקולד
BD שאדלר אגרBD, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב254084אגר שאדלר

מקורות

  1. Alberti, C., et al. Epidemiology of sepsis and infection in ICU patients from an international multicentre cohort study. Intensive care medicine. 28, 108-121 (2002).
  2. Angus, D. C., et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Critical care medicine. 29, 1303-1310 (2001).
  3. Vincent, J. L., et al. Sepsis in European intensive care units results of the SOAP study. Critical care medicine. 34, 344-353 (2006).
  4. Micek, S. T., et al. Empiric combination antibiotic therapy is associated with improved outcome against sepsis due to Gram-negative bacteria a retrospective analysis. Antimicrob Agents Chemother. 54, 1742-1748 (2010).
  5. Seifert, H. The clinical importance of microbiological findings in the diagnosis and management of bloodstream infections. Clin Infect Dis. 48, S238-S245 (2009).
  6. Barenfanger, J., et al. Decreased mortality associated with prompt Gram staining of blood cultures. American journal of clinical pathology. 130, 870-876 (2008).
  7. Munson, E. L., Diekema, D. J., Beekmann, S. E., Chapin, K. C., Doern, G. V. Detection and treatment of bloodstream infection: laboratory reporting and antimicrobial management. J Clin Microbiol. 41, 495-497 (2003).
  8. Clerc, O., et al. Impact of matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry on the clinical management of patients with Gram-negative bacteremia a prospective observational study. Clin Infect Dis. 56, 1101-1107 (2013).
  9. Meex, C., et al. Direct identification of bacteria from BacT/ALERT anaerobic positive blood cultures by MALDI-TOF MS MALDI Sepsityper kit versus an in-house saponin method for bacterial extraction. Journal of medical microbiology. 61, 1511-1516 (2012).
  10. Moussaoui, W., et al. Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry identifies 90% of bacteria directly from blood culture vials. Clin Microbiol Infect. 16, 1631-1638 (2010).
  11. Seng, P., et al. Ongoing revolution in bacteriology routine identification of bacteria by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry. Clin Infect Dis. 49, 543-551 (2009).
  12. Stevenson, L. G., Drake, S. K., Murray, P. R. Rapid identification of bacteria in positive blood culture broths by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry. J Clin Microbiol. 48, 444-447 (2010).
  13. Croxatto, A., Prod&34hom, G., Greub, G. Applications of MALDI-TOF mass spectrometry in clinical diagnostic microbiology. FEMS Microbiol Rev. 36, 380-407 (2012).
  14. Chen, J. H., et al. Direct bacterial identification in positive blood cultures by use of two commercial matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry systems. J Clin Microbiol. 51, 1733-1739 (2013).
  15. Prod&34hom, G., Bizzini, A., Durussel, C., Bille, J., Greub, G. Matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry for direct bacterial identification from positive blood culture pellets. J Clin Microbiol. 48, 1481-1483 (2010).
  16. Prod&34hom, G., Durussel, C., Greub, G. A simple blood-culture bacterial pellet preparation for faster accurate direct bacterial identification and antibiotic susceptibility testing with the VITEK 2 system. Journal of medical microbiology. 62, 773-777 (2013).
  17. Clerc, O., et al. Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry and PCR-based rapid diagnosis of Staphylococcus aureus bacteraemia. Clin Microbiol Infect. , (2013).
  18. Martiny, D., et al. Impact of rapid microbial identification directly from positive blood cultures using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry on patient management. Clin Microbiol Infect. 19, E568-E581 (2013).
  19. Stoneking, L. R., et al. Would earlier microbe identification alter antibiotic therapy in bacteremic emergency department patients. The Journal of emergency medicine. 44, 1-8 (2013).
  20. Nordmann, P., Dortet, L., Poirel, L. Rapid detection of extended-spectrum-beta-lactamase-producing Enterobacteriaceae. J Clin Microbiol. 50, 3016-3022 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

MALDI-TOF MSמבחן דיפוזיה של דיסקיותבדיקת PCR אוטומטיתליזיס באמצעות 암monium chlorideפרוטוקול סנטריפוגציהעכירות מקפרלנד (McFarland)צביעת גרם
הכנה של תרבות דם כדוריים לראפיד בקטריאלי זיהוי ואנטיביוטיקת רגישות בדיקה
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.