בידוד וכריתה של אב העורקים Murine; טכניקה רב-תכליתית בחקר לב וכלי דם מחלות

Summary

פתולוגיה של אבי העורקים עלולה להוביל לתחלואה ותמותה קשה, ולכן יש צורך במחקר על התקדמות המחלה וטיפולים פוטנציאליים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבידוד וכריתת אבי העורקים העכברי כדי לסייע לחוקרים בחקירת מחלות לב וכלי דם.

Abstract

מחלות לב וכלי דם הוא מונח רחב המתאר מחלות לב ו/או כלי דם. כלי הדם העיקרי המספק לגוף דם מחומצן הוא אבי העורקים. אבי העורקים עלול להיפגע במחלות כמו טרשת עורקים ומפרצת. חוקרים החוקרים מחלות אלה יפיקו תועלת מהתבוננות ישירה באבי העורקים כדי לאפיין את התקדמות המחלה וכן להעריך את יעילותם של טיפולים פוטנציאליים. מטרת פרוטוקול זה היא לתאר בידוד וכריתת אבי העורקים כדי לסייע לחוקרים החוקרים מחלות לב וכלי דם. בידוד וכריתה של אבי העורקים מאפשרים לחוקרים להסתכל על שינויים מורפומטריים גסים כמו גם לאפשר להם לשמר ולצבוע את הרקמה כדי להסתכל על שינויים היסטולוגיים אם רוצים. אבי העורקים עשוי לשמש למחקרים מולקולריים להערכת ביטוי חלבונים וגנים לגילוי מטרות מעניינות ומנגנוני פעולה. טכניקה זו עדיפה על שיטות הדמיה מכיוון שיש להן מגבלות מובנות בטכנולוגיה ובעלות. בנוסף, תאים מבודדים ראשוניים מאבי העורקים שבודד ונכרת זה עתה יכולים לאפשר לחוקרים לבצע בדיקות נוספות באתרן ובמבחנה. לבידוד וכריתת אבי העורקים יש מגבלה של הצורך להקריב את בעל החיים, אולם במקרה זה היתרונות עולים על הנזק מכיוון שזו הטכניקה המגוונת ביותר בחקר מחלת אבי העורקים.

Introduction

אב העורקים ממלאים תפקיד מרכזי בתפקוד לב וכלי דם מספק לגוף את הדם מחומצן וחלקים דומים לאחרים בגוף, הוא רגיש למחלות. מחלות אב העורקים נפוצות כוללות טרשת עורקים ופרצה, שהן התוצאה של גורמים גנטיים וסביבתיים הכוללים תזונה, עישון ואורח חיים בלתי פעיל ^1. טרשת עורקים היא בתצהיר של סידן ורובד שומנים מבוסס לקיר אב העורקים נמצא בדרך כלל בחולים עם היפרליפידמיה כרונית ^2. מפרצת מתאפיינת השפלה של הרכיבים המבניים של אב העורקים והדילול של קיר הכלי, ואחריו עלה שקוטר סופו של דבר עלול להוביל לקרע ^3.

מודלים של בעלי החיים הם כלים חשובים המשמשים ללמו....

Protocol

נהלי כל החיה בוצעו באישורה של ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים של אוניברסיטת סינסינטי ובהתאם למדריך לטיפול והשימוש בחי מעבדה מהמכון הלאומי לבריאות (NIH פרסום מס '85-23, מתוקן 1996).

1. הכנת העכבר

1. להרדים על ידי חשיפת בעלי החיים למנת supratherapeutic של הרדמה, isoflurane בשאיפה להשפעה. ודא המתת חסד ראשונית באמצעות קמצוץ הבוהן כגירוי מזיק. שיטה משנית של המתת חסד, חיתוך סרעפת, תתרחש בשלב הקרוב. שיטות חלופיות ניתן להשתמש בהמתת חסד שהוענק מתקבלת.

Results

עם השלמת ההליך, יהיו אב העורקים שלמים שמקורם בלב, יורדים לתוך חללי בית החזה ובטן עם עורקי הכליות עדיין מחוברים (איור 1 א). מכאן, אב העורקים ניתן הדמיה באתר לכמת שינויי morphometric שאבחון במחקר של פרצות אב העורקים בבטן (איור 1 ו1C). בהמשך לכך, ניתן להסיר את אב העורקים, קבוע ומוכתמים להסתכל על שינויים היסטולוגית. כתם כללי ונפוץ של אב העורקים הוא hematoxylin וכתם eosin (איור 2 א ו -2 ב). בנוסף, את השלמות המ.......

Discussion

מחלת אבי העורקים עלולה להוביל לפתולוגיה מערכתית משמעותית ואולי למוות במקרים חמורים. אפשרויות הטיפול מוגבלות כיום ולכן יש צורך בהמשך המחקר בתחום¹⁰. מודלים של עכברים הם אידיאליים להמשך מחקר התקדמות המחלה ואפשרויות טיפוליות פוטנציאליות⁴. לכן, השלמה מוצלחת של השיטה המתוארת בכתב יד זה תספק לחוקרים את הכלים למדוד את התקדמות המחלה ואת יעילות התרופות.

ניתן לשנות טכניקה זו בכמה דרכים על מנת לייעל את התוצאות. השימוש בזכוכית מגדלת כירורגית או במיקרוסקופ מנתח יכול לסייע בהדמיה של הא.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isoflurane	Med-Vet International	#RXISO-250
70% אתנול	פישר	07-678-001
פוספט חוצץ מלח	סיגמא אולדריץ'	P5368-10PAK
סרט כירורגי	3M	1527-1
גזה סטרילית	Dukal Corporations	1312
25 מד מחט	BD
מזרק 10 מ"ל	BD	309604