מאמר שיטה

מודל עכברוש של אחורי איסכמי אופטי נוירופתיה המושרית photochemically

DOI:

10.3791/52402

⸱

29 בנובמבר 2015

 ,  ,  , 
1Bascom Palmer Eye Institute, University of Miami Miller School of Medicine, 2Departments of Neurology and Biomedical Engineering, University of Miami Miller School of Medicine, 3Shiley Eye Center, University of California, 4Department of Ophthalmology and Vision Science, Fudan University

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המטרה של פרוטוקול זה היא לגרום לפגיעת איסכמית photochemically לעצב הראייה האחורי בחולדה. מודל זה הוא קריטי ללימודים של הפתופיזיולוגיה של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית, וגישות טיפוליות לזה ונוירופתיה אופטית אחרת, כמו גם במחלות של מערכת העצבים המרכזית איסכמי אחרות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נוירופתיה האחורית איסכמי האופטי (פיון) היא מחלה הרסני ראייה בפרקטיקה קלינית. עם זאת, פתוגנזה שלה וההיסטוריה הטבעית נשארו הבינו היטב. לאחרונה, פיתחנו מודל אמין, לשחזור בבעלי חיים של פיון ובדק את השפעת הטיפול של גורמי neurotrophic מסוימים במודל זה 1. המטרה של הווידאו הזה היא להדגים המודל המושרה photochemically של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית, ולהעריך את השפעותיו עם תיוג מדרדר של תאי הגנגליון ברשתית. בעקבות חשיפה כירורגית של העצב האופטי האחורי, צבע photosensitizing, erythrosin B, מוזרק לוריד ועל פני השטח עצב הראייה קרן לייזר ממוקדת. האינטראקציה פוטו של erythrosin B והליזר בניזקי קרינת האנדותל של כלי הדם, מה שגרמו לחסימת כלי דם בתיווכו של פקקת טסיות דם ודחיסת בצקים. פגיעת איסכמית וכתוצאה מכך תשואות הדרגתית אך pronouncאד dieback תא הגנגליון ברשתית, בשל אובדן קלט אקסונים - מרוחק, הנגרמת על-פגיעה ותוצאה רלוונטית מבחינה קלינית. לפיכך, מודל זה מספק פלטפורמה חדשנית ללמוד קורס pathophysiologic של פיון, ויכול להיות מותאם יותר לבדיקת גישות טיפוליות לנוירופתיה אופטית כמו גם מחלות של מערכת העצבים המרכזית איסכמי אחרות.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בחולים מעל גיל 50 שנים, נוירופתיה אופטית איסכמית (ION) הוא הסוג הנפוץ ביותר של אופטית החריף נוירופתיה 2. המצב יכול להציג כאחד משני תת-סוגים לפי מקור אספקה ​​ספציפית מושפעת דם והצגה קלינית: קדמי (AION) או אחורי (פיון) 3. בעוד פתוגנזה וכמובן של AION נחקרו רב 4-7, פיון שנשאר הבין היטב בשל השכיחות נמוכה, ההצגה משתנה, הקריטריונים שלה לא מוגדר אבחון וחוסר במודל חיה. יתר על כן, אין טיפולים הוכחו כדי למנוע או להפוך אובדן ראייה מAION או פיון ביעילות. לכן, מודל חיה לשחזור ואמין של פיון הוא בעל ערך רב ללמוד את תהליך המחלה in vivo ולבדוק משטרים טיפוליים חדשים לneuroprotection והתחדשות האקסון.

Photochemically מושרה פגיעת איסכמית לנימי הדם הזעירה וכתוצאה מכך vasogבצקת enic ופקקת ביעילות יוצרים איסכמיה רקמות אזוריות 8-12. לאחר הזרקה למחזור הדם בכלי הדם, erythrosin צבע B רגיש מייצר חמצן תגובתי גופייה מולקולרית על הפעלה על ידי הקרנת לייזר של כלי יעד. חמצן הגופייה ישירות peroxidizes האנדותל של כלי הדם, מגרה את דבקות / הצטברות טסיות דם ומוביל להיווצרות אוטמת פקיק. נזק איסכמי הוא להתפשט לאזורים השכנים והחמיר עוד יותר על ידי דחיסת כלי דם עקב בצקת vasogenic. המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא לגרום לphotochemically איסכמיה בעצב הראייה retrobulbar לשקף את הנזק שנגרם על ידי פיון.

למיטב ידיעתנו, זהו המודל הראשון של פגיעת איסכמית בעצב הראייה האחורית 1. כמודל זה מייצר איסכמיה תוך הימנעות טראומה פיזית, התהליכים הפיסיולוגיים של נוירופתיה אופטי איסכמית אחורית הם טובים יותר חיקו ולמדו. כמו כן, מודל זה מציע פלטפורמה חדשנית להקרנה של תרופות מועמד לנוירופתיה אופטית ומחלה איסכמית של מערכת העצבים המרכזית אחרת. כאן, פרוטוקול מפורט לצנתור הירך וריד, חשיפת עצב ראייה, הזרקה תוך ורידית של Erythrosin B וקרינת לייזר במודל פיון עכברוש מתואר.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נהלי כל החיה אושרו על ידי אוניברסיטת קליפורניה בסן דייגו ואוניברסיטת מיאמי טיפול בבעלי חיים מוסדי ועדות שימוש (IACUC) ובוצעו בהתאם להצהרת ארוו לשימוש בבעלי חיים ברפואת עיניים ומחקר חזותי. כל ריאגנטים והמכשירים המשמשים בניתוחים עקרים.

1. להרדים והכן את העכברוש לכירורגיה

  1. לפני ההליך, חולדות מורדמים עם זריקת intraperitoneal של קטמין (60 מ"ג / קילוגרם) ו xylazine (8 מ"ג / קילוגרם) לפי משקל גוף. עומק נאות של הרדמה צריך להיקבע על ידי תגובה שלילית לגירוי קמצוץ הבוהן.
  2. ברגע שהרדים, למשוך את הלשון קדימה כדי למנוע חנק ולהחיל סיכה משחה לשתי העיניים כדי למנוע התייבשות של הקרניות במהלך ניתוח.
  3. לגלח את האתרים כירורגית באמצעות גוזז שיער ולנגב את האזור שלוש פעמים עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול.
  4. לא וילוןהוא החיה בתוך שדה סטרילי. כפפות סטריליות ומכשירי ניתוח משמשים במהלך ניתוח הישרדות. לעקר מחדש הטיפים של מכשירים באמצעות מעקר חרוז חם בין בעלי החיים.

2. גישה ניתוחית

  1. אינדוקציה פיון
    1. צנתור וריד הירך
      1. להכין ולנקות את האתר כירורגית. לגלח את הירך הפנימית הנכונה באמצעות גוזז שיער ולנגב את האזור שלוש פעמים כל אחד עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול.
      2. הכן את צינורות. לחתוך באורך 40 ס"מ של צינורות פוליאתילן (PE 10) עיקור באתנול 70%. לשטוף את צינורות עם מי מלח ולחבר אותו למזרק 1 מיליליטר המכיל פתרון נמדד מראש של 2% erythrosin B צבע (μl 1 / מ"ג, מניב מינון של 20 מ"ג / קילוגרם משקל גוף). הר המזרק לתוך משאבת עירוי רגל-מתג מבוקר נקבעה לשיעור של 600 μl / דקה.
      3. באמצעות סכין מס '15, לעשות חתך אופקי קטן בהבסיס של ירך ימין. לגזור ולהפיץ את הקרום בתוך ולנקות את האזור עם צמר גפן סטרילי.
      4. הפרד את השריר עם מלקחיים עד הסניף של וריד הירך הוא גלוי. נדן מקיף את העורק, וריד והעצב. לצבוט ולמשוך נדן זה כלפי מעלה עם מלקחיים (מלקחיים עדינים-קצה דומון), ולחתוך חתך קטן (2-4 מ"מ הוא בדרך כלל מספיק) ליד הבסיס של הטריז בצורת המשולש עם מספריים באביב Vannas. להרחיב את החתך לפי צורך.
      5. הפרד את הווריד ועורק עם מקביל וו בוטה מיקרו-כירורגית לכיוון של הווריד. היזהר שלא לפגוע בסניפי הקרום ווריד העדינים. ואז, בעדינות להרים את הווריד ולהפריד אותו מרקמות חיבור הבסיסיות.
      6. להשיג תפר ניילון מחטים ולמקם אותו בסמוך לוריד הירך. השימוש במייקרו-כירורגית הוו, לרומם את הרוח ולהעביר את המלקחיים העדין-קצה מתחת לאזור דיסטלי. תפוס את הקצה אחד של התפר ולמשוך אותו מתחת לוָרִיד. לקשור את וריד דיסטלי בחוזקה. לעבור תפר שני באופן דומה תחת הווריד הפרוקסימלי ולעשות קשר רופף.
      7. לעשות חתך קטן בווריד ליד קשירת דיסטלי עם מספריים באביב Vannas. להרחיב את החור במידת הצורך עם המלקחיים בסדר-קצה. דם מסוים עשוי לדלוף דרך החתך. נקה את אזור הניתוח עם BSS הקר, סטרילי וצמר גפן סטרילי.
      8. מחזיק קיר הווריד בקצה החתך, קטטר הכלי עם צינורות-סמוק המלוחים מוכנים באמצעות בעל מחט. להדק את הקשר הפרוקסימלי מסביב לווריד והצינורות. לאחר מכן, לעגן את צינורות על ידי קשירתו לתפר דיסטלי.
      9. בדוק את האיכות של הצנתור על ידי לחיצה על מתג הרגל להזריק מלוח, <1 מיליליטר הוא נאות. ודא צינורות הוא בלא הפרעה ואין דליפות. באופן זמני לסגור את החתך עם תפרים כדי להגן על הצנתור ורקמות.
    2. חשיפה של עצב הראייה
      1. הכנהדואר האתר כירורגית ידי ניגוב אזור קדם-מגולח מעל עין שמאל שלוש פעמים כל אחד עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול.
      2. עושה חתך לאורך מ"מ עור 2-3 מאחורי העין עם להב מס '15. לצבוט ולהרים את רקמת חיבור עם מלקחיים משוננים, ולעשות חתך קטן עם מספריים באביב Vannas. חתך קטן זה בדרך כלל כ -5 מ"מ אורך, אבל יכול להיות ארוך יותר כדי לספק חשיפה גדולה יותר למנתח בהכשרה. תמשיך לנתח בצורה בוטה ברקמת החיבור לאורך השפה מעולה של העצם מסלולית, לטפל כדי למנוע שיבוש כלי דם. נקה את אזור הניתוח עם צמר גפן.
      3. לנתח כלפי מטה דרך הלחמית עד שריר rectus מעולה גלוי. לצבוט ולנתח דרך השריר; השריר ישוחרר ממעמקי המסלול. עכשיו, יכולות להיות מנוצלת רקמות הסובבות כדי לסייע בנסיגה והעלאה של העין על מנת להקל על הדמיה.
      4. מִחָדָשׁבדרכי את קפל עור ורקמות חיבור רוחבי וכלפי מטה, ולהחזיק במקום עם תפר וhemostat. זה יהיה לסובב את העין קדימה והחוצה כדי לחשוף את הנדן המכיל שומן שמקיף את עצב הראייה.
      5. בזהירות להכניס זוג מלקחיים חדים ולהרחיב במקביל לעצב הראייה להפריד את רקמות חיבור המקיפות את הנדן. אל תיגע בעצב הראייה עם הטיפים החדים של המלקחיים.
      6. אורך 5 מ"מ של עצב הראייה ונדן סביב צריך עכשיו להיות גלוי. רשת של microvessels על פני השטח הנדן מקיפה את עצב הראייה. אלה יהיו ממוקדים במהלך הקרנת לייזר.
    3. הזרקה תוך ורידית של Erythrosin B וקרינת לייזר
      1. יש להרכיב משקפיים בטיחות בצבע כתומים בכל העת בעת הפעלת מכשיר הקרנת הלייזר כדי להגן על עצמך מאור הלייזר הירוק. הפעל את הלייזר, לפתוח את התריס ולהתאים את השיא וpowe הממוצעRS של הלייזר במידת צורך. סגור את התריס.
      2. מקם את העכברוש במנגנון קרינת לייזר. כדי להבטיח מיקום נכון קרן, קרן מכוונת חלשה מופקת על ידי מרחבית סינון הלייזר דרך חור בקוטר 100 מיקרומטר נקדח בלהב התריס הסגור. -לחשוף מחדש את עצב הראייה עם זוג מלקחיים טיפ נאה, ולמקם את הקרן מכוונת על עצב הראייה intraorbital בין 3 מ"מ ו 4 מ"מ מאחורי ראש עצב הראייה.
      3. להזריק את הפתרון של 2% erythrosin B באמצעות הפעלה של משאבת העירוי. זה יכול לזרום לכמה שניות בזמן שהמנתח מוסיף טיפה קטנה של BSS כדי ללחלח את פני השטח של עצב הראייה.
      4. ודא את המיקום של הקרן במטרה ולאחר מכן לחץ על הרגל-המתג ליזום הקרנה. מסנן בטיחות בצבע כתום, שהוסיף לנתיב האופטי של מיקרוסקופ, יהיה מייד אחרי שחולל פתיחת התריס לאחר עיכוב 1 שניות.
      5. מכשיר את עצב הראייה ל9שניות 0 עם כוח שיא של 135mW והספק ממוצע של 18mW מיוצר על ידי מסוק קרן מסתובב ברץ 250 עם מחזור של 15% (זה ממזער אפקטים תרמיים). צהובה הקרינה, דמיין כתום בהיר דרך מסנן הבטיחות, תהיה נפלטת מפני השטח מעולה של עצב הראייה ודי בכך כדי להבטיח שהקרן irradiates העצב סימטרית.
      6. לאחר ההקרנה, מסנן הבטיחות בצבע הכתום ייפתח באופן אוטומטי. Microhemorrhage ניתן לצפות בחלק ממקרים.
      7. להקל על המתיחה על שרירי העין נוספים ולהחזיר את העין למצב ניטראלי. לסגור את החתך עם תפרים שהופסקו. אז למשוך את הקטטר ולקשור את עורק הירך בחוזקה כדי למנוע דליפה; לסגור עם תפרים שהופסקו. החל משחה אנטיביוטית לשני החתכים. בדוק את קרקעית העין כדי לוודא את תקינות כלי הדם של וריד הרשתית המרכזי והעורק.
  2. תיוג מדרדרשל תאי הגנגליון ברשתית (RGCs) הערה:. על מנת להעריך הישרדות RGC, תיוג מדרדר עם fluorogold (FG) אמורים להסתיים שבוע לפני פיון. השיטה מתוארת בפירוט בפרוטוקול יופיטר 819 13.
    1. בקצרה: להרדים את החיה עם קטמין (60 מ"ג / קילוגרם) ו xylazine (8 מ"ג / קילוגרם) ולגלח את הראש.
    2. ניתוח לשפשף את אתר החתך ולעשות חתך קו האמצע על הראש כדי לחשוף את הגולגולת.
    3. לקדוח חורים דו-צדדיים דרך הגולגולת (מ"מ 2x2 O) 0.5 מ"מ משני תפרי sagittal ורוחביים.
    4. בזהירות לשאוב את תוכן המוחין שנמצאת מעל פני השטח הגבי של colliculus מעולה (SC) באמצעות משאבת ואקום. ואז, במקום פיסה קטנה של gelfoam הספוגה עם FG 4% על פני השטח של SC.
    5. לסגור את החתך עם תפרים ולטפל בבעלי החיים באמצעות טיפול לאחר ניתוח סטנדרטי.
  3. טיפול שלאחר ניתוח והמתת חסד
    1. לאחר ניתוח, להציב חיה בכלוב נקי נפרד על גבי משטח מים הסירקולציה המחודשת המחומם עד שהחיה הוא התאוששה.
    2. משככי כאבים לאחר ניתוח (עצירות HCl, 0.01 מ"ג / קילוגרם) צריכים להינתן פעמיים ביום במשך שלושה ימים רצופים כדי למזער אי נוחות.
    3. עכברוש צריך להישמר בנפרד ונצפה עד שהם הצליחו לשמור על כיבו sternal ולהחזיר את התודעה מספיק.
    4. סימני התאוששות ובריאות טובה מנוטרים יומיים במשך לפחות 5 ימים לאחר הניתוח, או עד להסרת תפרים וריפוי נאות של האתר כירורגית, מוקדם מבין השניים אחרונות.
    5. להרדים בעלי החיים על ידי זלוף עם PFA 4% בנקודות זמן מדעי מתאימות לאחר הניתוח על פי עניין חקירה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פגיעת איסכמית וכתוצאה מכך נגרמת על ידי טכניקה זו מניבה מוות הדרגתי אך בולט של תאי הגנגליון ברשתית לאחר פציעת האקסון איסכמי. זוהי תוצאה רלוונטית קליני דומה לזה שנצפה במחלות של בני האדם. תיוג מדרדר FG משמש לכמת הישרדות RGC לאחר פיון. באותה השיטה מועסקת כדי לאמת יצירת מודל מוצלחת, כמו גם להעריך את ההשפעות של משטרים טיפוליים שונים. איור 1 מציג תמונות נציג confocal של תאי FG-חיוביים בmounts השטוח רשתית משליטה (איור 1 א), שטופל בדמה (לייזר / לא erythros...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן אנו מתארים בפירוט שיטה להשראת PION במודל חולדה. החלק הקריטי ביותר בפרוטוקול הוא חשיפה והקרנה של עצב הראייה - כדי לחשוף את העצב זמן רב ככל האפשר תוך הימנעות מנזק הנגרם ממלקחיים חדים או ממתיחה. בחולדות, עורק העיניים נכנס לעצב הראייה ≤1 מ"מ מראש עצב הראייה. לכן, הקרנה של עצב הראייה במרחק של 3-4 מ"מ מראש עצב הראייה אמורה לגרום רק לאיסכמיה של הנימים המזינים את העצב, ולא של העורק המספק את הרשתית הפנימית. בדיקה פונוסקופית נחוצה כדי להבטיח את שלמות כלי הדם של עורק הרשתית המרכזי והווריד. עם תרגול, ניתן לבצע את ההליך הכירורגי ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנחנו אסירי תודה Eleut הרננדז לגידול בעלי חיים, גייב Gaidosh למומחיות מיקרוסקופיה, וKhue טראן וZhenyang זאו לעריכת וידאו. מחקר זה מומן על ידי העין הלאומית מעניק R01-EY022129 לEY022589 JLG ומענקי P30 לUCSD וEY014801 אל UM; איגוד הלב האמריקאי, קרן ג'יימס ואסתר המלך, קרן התכנית חילופי סטודנטים לתואר השלישי של אוניברסיטת פודאן בית הספר למוסמכים (מס '2,010,033), ומענק בלתי מוגבל ממחקר למניעת העיוורון, Inc.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
לייזר 532 ננומטר Nd:YAG LaserglowLRS-532-KM-200-3
מסוק קרןבהתאמה אישיתבהתאמה
וטיימר כונן תריס מתאיםVincent AssociatesSD-10
עדשה כדורית באורך מוקד 25 ס"מCVI/Melles-Griot01 LPX 293plano-convexBK7 עדשת זכוכית עם ציפוי HEBBARTM ציפוי נגד השתקפות
אריתרוזין B MP Biomedicals190449
פלואורוגולדפלואורוכרום, LLC
ג'ל קצףקרדינל בריאותCAH1203421
צינורות פוליאתילן (PE10)BD Intramedic427400
מס' 10 להבMiltex4-110
מלקחיים עדיניםFST91150-20Dumont #5 מלקחיים לא מגנטיים ללא חלודה
עם שינייםFST11153-10גרמניה
מלקחייםFST18025-10 גרמניה נירוסטה
מספריים קפיציים של VannasFST2-220 JJECK נירוסטה
תפר פוליגלקטיןEthiconJ488G7-0 תפר
המוסטטF.S.T.12075-12 גרמניה נירוסטה
תריס מכני אישית אל חלד

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wang, Y., Brown, D. P. Jr, Duan, Y., Kong, W., Watson, B. D., Goldberg, J. L. A novel rodent model of posterior ischemic optic neuropathy. JAMA Ophthalmology. 131, 194-204 (2013).
  2. Rucker, J. C., Biousse, V., Newman, N. J. Ischemic optic neuropathies. Curr Opin Neurol. 17, 27-35 (2004).
  3. Hayreh, S. S. Posterior ischaemic optic neuropathy: clinical features, pathogenesis, and management. Eye (Lond). 18, 1188-1206 (2004).
  4. Hayreh, S. S. Inter-Individual Variation in Blood-Supply of the Optic-Nerve Head. Doc Ophthalmol. 59, 217-246 (1985).
  5. Jacobson, D. M., Vierkant, R. A., Belongia, E. A. Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy - A case-control study of potential risk factors. Arch Ophthalmol-Chic. 115, 1403-1407 (1997).
  6. Kosmorsky, G., Straga, J., Knight, C., Dagirmanjian, A., Davis, D. A. The role of transcranial Doppler in nonarteritic ischemic optic neuropathy. Am J Ophthalmol. 126, 288-290 (1998).
  7. Hayreh, S. S., Zimmerman, M. B. Non-arteritic anterior ischemic optic neuropathy: role of systemic corticosteroid therapy. Graefe's archive for clinical and experimental ophthalmology. 246, 1029-1046 (2008).
  8. Prado, R., Dietrich, W. D., Watson, B. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. Photochemically Induced Graded Spinal-Cord Infarction - Behavioral, Electrophysiological, and Morphological Correlates. J Neurosurg. 67, 745-753 (1987).
  9. Dietrich, W. D., Busto, R., Watson, B. D., Scheinberg, P., Ginsberg, M. D. Photochemically induced cerebral infarction. II. Edema and blood-brain barrier disruption. Acta Neuropathologica. 72, 326-334 (1987).
  10. Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis. Annals of Neurology. 17, 497-504 (1985).
  11. Watson, B. D. Animal models of photochemically induced brain ischemia and stroke. Cerebrovascular Disease - Pathophysiology, Diagnosis and Treatment. , 52-73 (1998).
  12. Watson, B. D., Prado, R., Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. Photochemically induced spinal cord injury in the rat. Brain Research. 367, 296-300 (1986).
  13. Chiu, K., Lau, W. M., Yeung, S. C., Chang, R. C., So, K. F. Retrograde labeling of retinal ganglion cells by application of fluoro-gold on the surface of superior colliculus. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Erythrosin B

מאמרים קשורים