הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

פיתוח אלגוריתם לבצע מחקר מקיף על האוטונומית דיסרפלקסיה ב בעלי חיים עם פגיעה בחוט השדרה גבוהה שימוש בהתקן טלמטריה

7.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52809

⸱

29 ביולי 2016

 ,  ,  , 
1International Collaboration on Repair Discoveries (ICORD), Faculty of Medicine, University of British Columbia, 2Department of Medicine, Division of Physical Medicine and Rehabilitation, University of British Columbia, GF Strong Rehabilitation Centre

במאמר זה

סיכום

הצנתר של מכשיר טלמטריה מושתל באבי העורקים הבטני על מנת לאסוף באופן רציף נתונים המודינמיים פעימה אחר פעימה מבעלי חיים לפני ואחרי חתך חוט השדרה של בית החזה. תוכנת JAVA חדשה שימשה לניתוח פרמטרים המודינמיים כמו גם תדירות ועוצמה של אפיזודות ספונטניות של דיסרפלקסיה אוטונומית.

תקציר

פגיעה בחוט השדרה (SCI) היא מצב נוירולוגי מתיש, המאופיין בהפרעות בתפקוד סומטי ואוטונומי. בפרט, SCI מעל רמת אמצע בית החזה יכול להוביל למצב יתר לחץ דם שעלול לסכן חיים הנקרא דיסרפלקסיה אוטונומית (AD) המופעל לעתים קרובות על ידי גירויים סומטיים או קרביים מזיקים או לא מזיקים מתחת לרמת הפציעה. אחד הטריגרים הנפוצים ביותר למחלת אלצהיימר הוא התנפחות של קרבי האגן, כגון במהלך התנפחות או פינוי של שלפוחית השתן והמעי. פרוטוקול זה מציג אלגוריתם זיהוי דפוסים חדשני שפותח עבור תוכנת פלטפורמת JAVA כדי לחקור את התנודות של פרמטרים קרדיווסקולריים כמו גם את המספר, החומרה ומשך הזמן של אירועי אלצהיימר המתרחשים באופן ספונטני. התוכנה מסוגלת ליישם אלגוריתם זיהוי דפוסים על נתונים המודינמיים כגון לחץ דם סיסטולי (SBP) וקצב לב (HR) שחולצו מהקלטות טלמטריה של בעלי חיים מודעים ובלתי מרוסנים לפני ואחרי חתך מלא של בית החזה (T3). בעזרת תוכנה זו, ניתן לזהות ולנתח פרמטרים המודינמיים ואפיזודות של אלצהיימר עם הטיה מינימלית של נסיין.

מבוא

דיסרפלקסיה אוטונומית (AD) היא מצב חירום מסכני חיים אצל אנשים לאחר פגיעה בחוט השדרה אקוטית או כרונית (SCI) בקטעי צוואר רחם או גבוהים ובית החזה מתאפיינת בדרך כלל פרקים של יתר לחץ דם מתמשך ברדיקרדיה 1. AD נגרם בעיקר בגלל שיבוש יורד מסלולים השדרה כי בדרך כלל מספקים קלט ממרכזי supraspinal לתאי העצב preganglionic אוהד השדרה השולטים פעילות סימפתטית ואת הטון וסקולרית 1-4. פרקים לספירה מאופיינים עלייה חדה בלחץ הדם הסיסטולי (SBP) עד 300 מ"מ כספית אם אינו מטופל עלול לגרום התקפים, דימום תוך מוחי, אוטם שריר הלב, ואפילו מוות 5-8. מגוון של גירוי מזיק ובלתי מזיק לפעול כמפעיל של AD, כולל המעי התנפחות שלפוחית ​​השתן, עוויתות, פצעי לחץ, צנתור שלפוחית ​​השתן או נהלים iatrogenic 9-12.

הפיתוח הזמני לאלצהיימר בבני שו"תonse כדי SCI נחקר בשני מודלי 9 ו חיה האנושיים 13,14. בדרך כלל המחקרים הללו השתמשו בשיטה 'מושרה AD' (כלומר, urodynamics, פין vibrostimulations בבני אדם או התנפחות גסה בחיות) כדי לקבוע את הפיתוח הזמני של AD. גישה כזו היא מוגבלת על ידי צורך הערכות חוזרות ונשנות בזמן נקודות מבודדות שעשויות למנוע קביעה מדויקת של הפיתוח הזמני של AD. השימוש ניטור לחץ דם 24 שעות אצל בני אדם מאפשר מדידות לחץ דם סדרתי להתבצע במרווחי זמן קבועים מראש. טכניקה זו הועסקה לאחרונה לפקח המתרחשת לספירה ספונטנית בחולים עם כרונית SCI. במודלים של בעלי חיים, מתמר ללחץ מצב מוצק יותר ויותר בשימוש כדי לפקח באופן כרוני לנצח-ידי-כלוחם נגד לחץ דם עורקים. לאחרונה, Rabchesvky et al. (2012), פתח אלגוריתם חילוץ אחד ממוצעים שניים של לחץ דם ממוצע (MAP)ד לעומת נגד סף ממוצע נע 15. אירועים לספירה ספונטני התאפיינו מבוסס על פסגות MAP כי הם 10 מ"מ כספית או יותר מעל לסף במקביל לירידה HR של 10 פעימות לדקה או יותר.

הנה תוכנה JAVA הרומן אשר מובנה AD איתור אלגוריתם מוצג. אלגוריתם זה עובד על ידי זיהוי דפוסים שנקבעו מראש בלחץ הדם העורקי (ABP) וקצב הלב (HR) המעידים על אירוע לספירה המתרחשים באופן ספונטני. המשתמש יכול להתאים את כל משתני הקלט באופן ידני על תוכנה כזו כי "אלגוריתם זיהוי 'יכול להיות מותאם אישית בקלות על פרמטרים ספציפיים של עניין. התוכנה היא גם מסוגל dichotomize ABP ומשאבי אנוש לתוך עידן נתון כזה כי מקצב יומי של פרמטרים המודינמי ניתן לנתח 16. בכתב היד הנוכחית, הסבר מפורט ניתן של הטכניקה כירורגית אשר ממשמשת להשתיל את התקנים טלמטריה לנהל ניתוח SCI. לְשֶׁעָבַרamples ניתן גם ביחס ליכולות שלאחר העיבוד של בתוכנת האיתור לספירה ואיך לב וכלי דם פונקציה משתנה שלאחר SCI. לצורך השוואה, המתודולוגיה התוצאות שהתקבלו בשיטה של ​​מושרה לספירה המכונית התנפחות גסה (CRD) בא לידי ביטוי גם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

Wistar זכר (HSD: WI Wistar) חולדות בגיל 7 שבועות של גיל במשקל 300-350 גרם ששימשו בניסוי זה. כל החולדות היו מתוחזקים על מחזור 12 שעות אור / חושך וקבלו צ'או עכבר מעבדה סטנדרטי כרצונך מים. כל הפרוצדורות תאמו עם מדריך לטיפול ושימוש של חיות הניסוי הוקמה על ידי המועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים ואישור אתיקה שהוענקו על ידי אוניברסיטת קולומביה הבריטית. טיפול כירורגיה ובעלי חיים נערכו על פי נהלים קבועים במעבדה שלנו (רמזי et al. 2010) 17.

1. הכנה של בעלי החיים: פרוצדורות כירורגיות

  1. השרשה של מכשיר טלמטריה
    הערה: הפרוטוקול יושם על פי מפרט יצרן הניסיון הקודם שלנו עם ההשתלה של המכשיר: 16
    1. טרום לטפל בחיות עם Enrofloxacin, פעם אחת ביום למשך 3 ימים (10 מ"ג / ק"ג, ים.c.) טרום ניתוח.
    2. הסר מזון מוצק מהכלוב 9-13 שעות לפני הניתוח. החלפת ארוחה תזונתית דיאטה רכה יכולה להינתן במהלך תקופה זו.
    3. לטשטש את החיות באמצעות מנה אינדוקציה של isoflurane 4% בתא אינדוקציה ו מינון אחזקה של isoflurane כ -1.5% (עם 1-1.5 חמצן L / min) באמצעות מעגל ביין. השתמש רפלקס בוהן הקמצוץ ורפלקסים קרני להעריך האם חיות נמצאות במטוס כירורגית של הרדמה. נשימה חייבת להיות במעקב כדי להעריך אם עומק ההרדמה הוא גבוה מדי (כלומר, קצב נשימה איטי מאוד ומתנשף, חיוורת ממברנות ריר) או נמוך מדי (כלומר, מהירות, נשימות רדודות מציין החיה לא יכולות להיות מטוס כירורגית של הרדמה ). ניטור חזור של המטוס של הרדמה כירורגית בערך כל 5 דקות במהלך הניתוח isoflurane להתאים מינון לפי הצורך.
      הערה: כל הניתוחים מתבצעים באמצעות טכניקת aseptic: במיוחד, מנתחים ללבושמסכת מנתחים, כובע, מסכה, וכפפות סטריליות. הליך gloving להרחיב הוא ציין, autoclaved חבילת כירורגית המכילה מכשירי ניתוח נפתח באמצעות טכניקת סטרילית החיה היא עטופה לפני תחילת ניתוח. כלי כירורגים הם מעוקרים טיפ בחרוזים חמים בין ניתוחים (עד חמישה ניתוחים). ספוגי גזת כירורגים הם autoclaved לפני השימוש. במהלך הניתוח, מוחזקים בעלי חיים על שמיכה מים במחזור שמרו על 37 מעלות צלזיוס.
    4. נהל עצירות (0.02 מ"ג / ק"ג; SC) מיד לפני הניתוח. יתר על כן, לנהל ketoprofen (5 מ"ג / ק"ג; SC) לפני הניתוח, כדי לספק שיכוך כאבים multimodal. נהל bupivacaine (5 מ"ג / ק"ג; SC) מיד לפני הניתוח, כדי לספק בלוק קו מקומי. לאחר גילוח הבטן, חל לסירוגין מטליות של chlorhexidine ו -70% אתנול (שלוש פעמים כל אחד), ואחריו יוד povidone לפחות 1 דקות, ולהסיר עם 70% אתנול (בכל פעם עם אלכוהול חדש שנפתח לנגב). בניקוי של העורנעשה בצורה קונצנטריים החלה במרכז קו החתך והקיף כלפי חוץ (כדי לא לזהם את האזור על ידי תנועות "חזרה / ושוב"). השתמש מטליות גזה סטרילי וזורק בין כל יישום. תהליך זה חוזר על עצמו שלוש פעמים לפני תחילת הניתוח של בעלי חיים. בעוד גזום בניתוח מקורצף, לשמור על חיות על חרטומו מחובר למעגל ביין שאינו rebreathing תחת כ 1.5% מינון אחזקה של isoflurane. התאמת רמת isoflurane הנדרש לשמירת החיה בכל תכנית של הרדמה כירורגית.
    5. ביצוע חתך בבטן קו האמצע 5 ס"מ חיתוך דרך השרירים הצפק חשיפת המעיים.
    6. לחזור בו המעיים (זה יחשוף את אבי העורקים היורד על דופן הבטן האחורי), לכסות את הבטן עם גזה ניתוח סטרילי טבולה 2-3 מ"ל של תמיסת האצבעות ולשמור לח עם האצבעות נוספות בתדירות הנדרשת כדי למנוע התייבשות הרקמה בהליך .
    7. בלאנט לנתח סביב האאורטה ולהפריד האאורטה מן הווריד הנבוב הנח ניצול spatulae איריס.
    8. ליגטורה מקום (8-0 תפרי monofilament) סביב הקצוות המקוריים ואת הזנב של השכבה של האאורטה adventitial החיצונית, דיסטלי רק אל עורק הכליה.
    9. הרם את זרימת דם ליגטורה הגורם לחסימה בקצרה לנקב את אב העורקים ברמה קדמי 1-2 מ"מ אל הסתעפות הכסל עם נטיית מחט 25 מד ב 90 מעלות בקצה.
    10. מדריך את קצה הצנתר של המכשיר טלמטריה לתוך אבי העורקים באמצעות מחט מעוקל 20-מד. לקדם rostrally לוודא כי הטיפ הוא דיסטלי רק אל עורקי הכליה
      1. תקנה באמצעות כמות קטנה של דבק רקמות. הסר קשירות להבטיח שאין חסימה בזרימת הדם עקב דבק קטטר או רקמות.
    11. אבטח את הגוף של מכשיר טלמטריה לתוך דופן הבטן באמצעות 4-0 תפרי משי. השתמש 4-0 Vicryl ו 4-0 התפרים Prolene לסגור את muscle ועור, בהתאמה.
  2. טיפול טלמטריה השרשה לאחר ניתוח
    הערה: חיות שלאחר ניתוח 14 הימים הראשונים צריכים להיבדק לפחות 3 פעמים ביום, בנוסף הערכת ניטור מפורטת פעם ביום. להעריך חיות ב -7 קטגוריות: משקל גוף, מראה פיזי (כאב מוערך בהתבסס על סימנים כגון ייצור פורפירין מוגבר לראות סביב עיניים, אף רגליו קדמיות, וסימני עווית פן), התנהגות / פעילות, עשיית צרכים, עור (כולל hunching, piloerection ריפוי seroma, חתך), הידרציה ונשימה.
    1. להאכיל את החיות עם פרות, מבחר של דגני הבוקר, החלפת ארוחה תזונתית דיאטה רכה, ולספק כרצונך מים, במשך 6 ימים לאחר השתלת מכשיר טלמטריה. בעלי חיים צריכים צ'או מכרסם מוצק רגיל הלנה לתפקיד ביום הראשון הניתוח. להזריק חיות עם חימם פתרון Lactated אצבעות (5 מ"ל) תת עורי במשך 3 הימים הראשונים לאחר הניתוח ועל המראהתסמינים של התייבשות. נהל פתרון אצבעות (5 מיליליטר) לפי צורך על הערכה של החיות (סימני אוהל עור, אוזניים חיוורות / ממברנות ריר) במהלך בדיקות הבוקר והערב.
    2. נהל Enrofloxacin (10 מ"ג / ק"ג, SC) ו ketoprofen (5 מ"ג / ק"ג, SC) פעם ביום, במשך 3 ימים לאחר הניתוח. נהל עצירות (0.02 מ"ג / ק"ג, SC) בשעות הבוקר והערב (כלומר, כל 12 שעות) במשך 3 הימים הבאים לאחר הניתוח. מנה באמצע יום של עצירות (0.02 מ"ג / ק"ג, SC) יכולה להינתן אם סימנים של כאב / מצוקה מצוינים.
  3. חיתוך רוחב מלא של חוט השדרה
    הערה: אפשר חי להתאושש מניתוח השתלת טלמטריה במשך 14 ימים לפחות לפני ניתוח חיתוך רוחב מלא T3.
    1. חיות טרום לטפל עם Enrofloxacin מניעתי (10 מ"ג / ק"ג, SC) במשך שלושה ימים לפני הניתוח SCI.
    2. לטשטש חיות תחת מנת אינדוקציה של isoflurane 4% כפי שתואר לעיל. נוסף,להזריק חיות עם קטמין הידרוכלוריד (70 מ"ג / ק"ג, IP) ו hydrochloride dexmedetomidine (0.5 מ"ג / ק"ג, IP).
      הערה: ניתוחי חיתוך רוחב מלאים, את ההתרחבות שנגרמה על ידי isoflurane לעתים קרובות מציגה בעיות עם המוסטאסיס פעם הכבל transected. בעיה זו ניתן למנוע באמצעות קוקטייל קטמין / dexmedetomidine. החיות צריכות להיות מורדמות 20-25 דקות, ולאחר התהפכו באמצעות atipamezole (1 מ"ג / קילו, SC) לאחר ניתוח חיתוך רוחב חוט השדרה.
    3. טרום הניתוח לנהל עצירות תת עורי (0.02 מ"ג / ק"ג), ו ketoprofen (5 מ"ג / ק"ג). נהל bupivacaine (5 מ"ג / ק"ג; SC) מיד לפני הניתוח, כדי לספק בלוק קו מקומי. לאחר גילוח הבטן, לסירוגין מברשות של chlorhexidine ו -70% אתנול (שלוש פעמים כל אחד), ואחריו יוד povidone צריך להיות מיושם לפחות 1 דק ', והוצא עם 70% אתנול (בכל פעם עם אלכוהול חדש שנפתח לנגב). מברשות הם להיעשות בצורה קונצנטריים מתחילותבמרכז קו החתך והקיף כלפי חוץ (כדי לא לזהם את האזור על ידי תנועות "חזרה / ושוב"). השתמש גזה סטרילי וזורק בין כל יישום. חזור על התהליך שלוש פעמים לפני תחילת הניתוח של בעלי חיים. בעוד גזום בניתוח מקורצף, לשמור על חיות על חרטומו תחת כ 1.5% מינון אחזקה של isoflurane (יותאם כנדרש לשמור המטוס כירורגית של הרדמה). לכל האורך של חי הניתוח נשמרים על שמיכת מים במחזור שמור על 37 מעלות צלזיוס.
    4. ביצוע חתך קו אמצע גב, 2 סנטימטר אורך, בשריר השטחי שמעל חוליות C8-T3.
    5. בלאנט לנתח כדי לחשוף את שכבת הדורה.
    6. פירס את השכבה ההדורה עם microscissors או עם קצה מחט 25 מד.
    7. פתח את הדורה על הפער הבין חולייתי T2-T3 ולבצע חיתוך רוחב מלא באמצעות microscissors. פתח את microscissors אבל לא רוחבית להתפוצץ arterie בחוליותים ורידים. בתנועה מהירה transect חוט השדרה ולחפש עווית מוגזמת בגפיים האחוריים החי. אשר חתכו קווים מלאים באמצעות פרדה ויזואלית של גדמי חוט שדרה המקוריים ואת הזנב.
    8. לאחר אישור, להציב gelfoam בין הגדמים להשיג hemostasis. החל gelfoam מספיק כדי לעצור את הדימום וכדי להפריד את הגדמים של חוט השדרה.
    9. השתמש 4-0 Vicryl ו 4-0 התפרים Prolene לסגור את השריר והעור, בהתאמה. לאחר הניתוח SCI, לתת חיות מחומם מראש פתרון Ringer Lactated (5 מ"ל, SC ב 30 מעלות צלזיוס) ולאפשר להם להתאושש בסביבה מבוקרת טמפרטורה.
  4. טיפול בחוט השדרה חיתוך רוחב לאחר ניתוח
    הערה: חיות שלאחר ניתוח 14 הימים הראשונים צריכים להיבדק מדי יום 3 פעמים, בנוסף הערכת ניטור מפורטת פעם ביום. לאחר 14 ימים מבדק מעקב מפורט ניתן לחזור בכל יום אחר. להעריך חיות ב -7 Categoריס: משקל גוף, מראה פיזי (כאב מוערך בהתבסס על סימנים כגון פורפירין והעווית פן), התנהגות / פעילות, עשיית צרכים, עור (כולל hunching, piloerection, ריפוי חתך seroma), הידרציה ונשימה. עבור שלפוחיות 5-7 ימים הראשונים צריכים להיבדק והביע לפחות 3 פעמים ביום.
    1. להאכיל את החיות עם פרות, מבחר של דגני הבוקר, החלפת ארוחת דיאטה רכה תזונתית, ולספק כרצונך מים עבור 8-14 ימים לאחר ניתוח חיתוך רוחב חוט השדרה. להזריק חיות עם חימם פתרון Ringer Lactated (5 מ"ל) תת עורי במשך 3 הימים הראשונים לאחר הניתוח ועל תסמינים של התייבשות. נהל בתמיסת רינגר (5 מ"ל) לפי הצורך על הערכת החיות במהלך המחאות.
      הערה: לאחר חיתוך רוחב חוט שדרה, חולדות תערוכת שיתוק של הגפיים האחוריים, ו ambulate באמצעות כיפוף ורחבה של forelimbs, אשר נשמר במודל פציעה זו. החולדות חסרות תמיכת מטען וזנב. כדי להקל עלתנועתם בכלוב, רשת גומי צריכה להיות ממוקמת מתחת מצעים פתיתי שיבולת שועל. זה מאפשר חולדות לתפוס את הרשת עם הרגליים הקדמיות, ולעבור בקלות בכלוב לגשת מזון ומים. כלי המיטה יש לשנות יומית. ביום 7 לאחר חיתוך רוחב חוט שדרה, את מצעי שיבולת השועל צריכים להיות מוחלפים על ידי המצעים שבבי עץ המקורי שלהם. כלי מיטת פתיתי שיבולת השועל משמשת מאז עצירות חולדות שקבלו יכולה לפתח פיקה שבו הם אוכלים מצעים וזה יכול לגרום impactions ושט. שיבולת שועל מגולגל הם impaction הסופג של הוושט עם שיבולת שועל התגלגל לא נצפה.
    2. נהל Enrofloxacin (10 מ"ג / ק"ג, SC) ו ketoprofen (5 מ"ג / ק"ג, SC) פעם ביום למשך 3 ימים לאחר הניתוח. נהל עצירות (0.02 מ"ג / ק"ג, SC) בשעות הבוקר והערב (כלומר, כל 12 שעות) במשך 3 הימים הבאים לאחר הניתוח. מנה באמצע היום של עצירות יכולה להינתן אם סימנים של כאב / מצוקה מצוינות.

2. טלמטריהניטור פרמטרים המודינאמית

  1. אסוף לנצח-ידי-כלוחם נגד לחץ דם עורקים (ABP) ואת טמפרטורת גוף ליבה כל יום במשך 24 שעות, לפני ואחרי SCI. תוכל לדגום את לחץ הדם העורקי ואת טמפרטורת גוף ליבה ב 1000 רץ ב 24 משבצות hr באמצעות מכשיר טלמטריה.
  2. מניח SmartPad תחת כלוב החיה עבור הטענה אלחוטית של המתמר ו לקליטת אותות מַד מֶרְחָק הדיגיטליים מן המתמרים.
    הערה: מתח המוצא מכן מועבר אל Configurator מחובר למחשב, אשר מארגן את זרימת הנתונים מערוץ אחד. המתח מומר להקלטות לחץ דם רציפות עורקים וטמפרטורה. דמיינו את הנתונים שנדגמו ניצול תוכנת רכישת נתונים, כגון LabChart.
  3. מחק את נתוני טלמטריה שנאספו במהלך ניטור בעלי חיים, כמו גם 10 דקות ערב הניטור ו -10 דקות לאחר ניטור.

3. הערכה הספונטנית Incidences של האוטונומית דיסרפלקסיה (AD)

הערה: התדירות, החומרה ומשך אירועים לספירה ספונטניות הוערכו באמצעות אלגוריתם שפותח עבור פלטפורמת תוכנת JAVA האיתור לספירת רומן שלנו (איור 4). אלגוריתם רומן פותח כדי לזהות אירועים לספירה ספונטניים אוטומטית בהתבסס על 24 הקלטות hr SBP ו- HR טלמטריה לפני ואחרי SCI ניצול פרמטרים שצוינו באיור 2.

  1. חלץ ערכי לחץ דם סיסטולי ו- HR מנתוני טלמטריה מגלמים על פני תקופה של עניין באמצעות תוכנת רכישה.
    הערה: תוכנת רכישה מזהה וקובעת את הערך של פסגות SBP מקלטות ABP רציפות. קצב הלב הוא אקסטרפולציה על ידי קביעת המרחק בין משך פסגות SBP הסמוך.
  2. העלה קובץ CSV של הקלטות טלמטריה עם מרווח interbeat בעמודה A, ערכי לחץ דם סיסטולי בעמודה B, ערכים MAP בטור ג והשעה של היום אניטור n D (איור 4 א).
  3. שימוש בתוכנה (איור 4 ב-ד), לציין את טווח HR הפיזיולוגי הרלוונטי (כלומר, R כדי מרווח R) עבור הקלטות SBP בין 180 פעימות לדקה ו 625 פעימות לדקה. ציין את טווח HR הרלוונטי על התוכנה תחת לוחות המינימום הדופק ודופק מקסימאלי.
  4. צור סף SBP ו- HR דרך חלון ממוצע נע של 240 שניות. ציין את אורך החלון של הסף הממוצע נע לניתוח בלוח סף המשך לספירה.
  5. גדר סף SBP משורבב ב 20 מ"מ כספי מעל לקו הבסיס הממוצע נע. כדי להצביע על שווי טרנספוזיציה בלוח BP טרנספוזיציה סף ממוצע נע.
  6. לבודד אשכולות השיא SBP החורגים סף משורבב עם לפיםגה מרווח פחות מ -2 שניות למשך תקופה של יותר מ -10 שניות. ציין את שיא מרווח שיא באמצעות BP מרווח Interpeak ואת duמרווח מנה באמצעות לוחות BP מרווח שיא אשכול.
  7. אשכולות שיא הקבוצה SBP כי הם בתוך 120 שניות של אחד את השני.
    הערה: זוהה אירועים לספירה פוטנציאליות שניתנות בתוך 120 שניות זה מזה ויקובצו כאירוע אחד. ציין מהו משך הזמן המקסימלי המותר בין אשכולות רצופים SBP להבדיל אירועים AD נפרד בלוח סף משך לספירה.
  8. אשר אם קבוצת אשכולות שיא SBP המשויכת לאירוע לספירה ספונטנית פוטנציאל ידי איתור ירידת HR של 40 פעימות לדקה או יותר.
    1. ממוצעים 10% מערכי HR על תחילת האירוע פוטנציאל (לציין אחוזים זה בקצב הלב העליון ושחררו לוח טווח ממוצע). ממוצעים 75% מערכי קצב לב מתום האירוע פוטנציאל (לציין אחוז זה נמוך קצב הלב לרדת פאנל מגוון הממוצע).
    2. הפחת את סף קצב הלב נמוך מערך הסף קצב הלב גבוה יותר, על מנת להבטיח corresponירידה דינג של 40 פעימות לדקה או יותר. ציין את הגבלת ירידת קצב לב באמצעות לוח הגבלת ירידת קצב לב.
  9. לאחר הפנלים מולאו, לחץ על OK. מצגת גרפית של האירועים לספירה זוהו מוצגת, הכוללת קוצים בלחץ הדם הסיסטולי ונתוני HR קשורים (איור 4C-D). פלט קובץ Excel מופק גם עם התגובה Pressor (מ"מ כספית), משך (שניות), לחץ דם סיסטולי מקסימום (מ"מ כספית), HR מינימום (BPM) ושחרר HR (BPM) של כל אירוע לספירה זוהה.

4. מעי התנפחות בכוונה לעורר לספירה

הערה: החומרה לספירה מושרה ניתן לקבוע באמצעות התנפחות גסה (CRD), גירוי רלוונטי קליני המחקה את המעי 3,18,19 השיגרתי.

  1. בדוק את בלון קטטר צרפתית (ישר, 10 צרפתית, 3 מ"ל, 35 ס"מ, לטקס חינם) לא דולף על ידי ניפוח זה עם 2 מ"ל של אוויר.
  2. לרסן הבעלי חיים דואר על ידי לפפה במגבת ולאפשר BP ו HR לייצב במשך חצי שעה.
  3. מניחים סיכה על קצה הצנתר. מניחים חותם על קטטר עם סמן קבע, 2 ס"מ מאמצע הבלון. הצנתר מוכנס דרך פי הטבעת לתוך המעי הגס עד הסימן נראה בקצוות בפתיחה. Secure את הקטטר הזנב בעזרת פלסטר. Re-מקום החיה העטופה בכלוב בביתו להציב על המקלט SmartPad התאמה המתמר מושתל בתוך החיה. אפשר BP של החיה לנרמל במשך 10 דקות.
  4. לאחר החדרת קטטר האיקלום משויך (כלומר, 10 דק '), להחדיר את הבלון עם 2 מ"ל של אוויר מעל 10 שניות, לאפשר BP ו HR לייצב. לשמור התנפחות דקות 1. ודא קצה הצנתר נשאר בתוך פי הטבעת. חשוב לא להפריז לנפח את הבלון (כלומר, 3 מ"ל +) על מנת למנוע קרע של המעי הגס.
    הערה: התנפחות למשך תקופה של 1 דק '&# 160; מאפשר זמן מתאים לפיתוח של תגובת Pressor וירידת HR בתיווך baroreceptor הקשורים אפיזודה מושרה של AD. בנוסף, תקופת 1 דק 'זה גם מספק מספיק זמן לנורמליזציה של מדדי לב וכלי דם.
  5. התנפחות חזור 3 פעמים לכל ניסוי, חוזר ניסויים יומיים עם מרווח מינימאלי של 10 דקות בין ניסויים. לאחר ההערכה היא מוחלטת, הסר את קטטר פולי מן החיה.
  6. פעימה אחר פעימה ממוצע נתונים מעל 1 במרווחים שניים ולדווח על העלייה המרבית בלחץ הדם הסיסטולי וירידת מקסימלית HR מעל ניסויים מרובים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

באמצעות טלמטריה, לחץ דם עורקים ידגם בתדר של 1,000 הרץ ברציפות במשך 24 שעות. הקלטה המחשה של לחץ הדם העורקי (ABP) באמצעות LabChart מוצג באיור 1B. המדגם ABP היה פיקוח על ידי חיישן הלחץ מצב מוצק מוכנס לתוך אבי העורקים היורד. בתוכנת איתור לספירה פלטפורמה JAVA הרומן הוא מסוגל לחלץ SBP רלוונטי (מ"מ כספית) פסגות (תרשים 1C). אנו יכולים גם לחלץ את HR (BPM) מן מרווח הזמן בין פסגות SBP סמוכים (איור 1D).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הפרוטוקול מתאר מפורט ליישום של תוכנת איתור לספירת פלטפורמת JAVA רומן אשר יהיה משולבת עם מכשיר טלמטריה, עבור ניתוח מעמיק לטווח ארוך של ABP ב SCI-חיים (איור 1 ב). זוהי התוכנה הראשונה שמאפשרת לאפיון דפוסי ABP לזהות אירועים לספירה ספונטניים כפי שהם מתרחשים לסירוגין במשך כל המשך היום. במודל חיה T3 SCI היטב מאופיין יכול להמחיש את היכולת התפקודית של לתוכנה לזהות את התדר, בתגובה Pressor ומשך לספירה ספונטנית. יחד עם זיהוי של אירועים לספירה ספונטניים, התוכנה יכולה לנתח תנוד...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה אם הממומן על ידי המכון הקנדי לחקר בריאות ואת לב ושבץ קרן של BC ו יוקון. ברצוננו להודות למר Rayshad Gopaul וד"ר שלי McErlane לתמיכה טכנית מומחיות לטיפול בבעלי חיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
11 עכברושי וויסטאר זכרים -Hsd-WI (250-300 גרם)Envigo (לשעבר מעבדות הרלן) תרשים מעבדה 141
(PowerLab® מערכת איסוף נתונים)מכשירי AD 
טלמטר לחץ מילר בע"מתצורת RP-TRM54P
MillarInc.TR190
SmartPadמילר בע"מTR180
איזופלורן (אראן)בקסטר קורפ.DIN: 02225875
Enrofloxacin (Baytril)Bayer HealthcareDIN: 02169428
5-0 תפרי משיEthiconS182
4-0 Vicryl SubcuticularEthiconJ496G
בופרנורפין (Temgesic)רקיט בנקיזרDIN: 0281250
Bupivicaine Hydrochloride (מרקאין 0.5%)Hospira Healthcare Corp.  DIN: 02305909
קטופרופן (אנאפן)מריאלDIN: 02150999
קטמין הידרוכלוריד (Vetalar)ביונישDIN: 01989529
Dexmedetomidine הידרוכלוריד (דומיטור)פייזרDIN: 02333929
תמיסת רינגר חבי בראון מדיקל בע"מDIN: 01931636
Gelfoam #12Pharmacia & חברת Upjohn03603-14-1
MicroscissorsFine ScienceTools 15003-008
Iris SpatulaeFine ScienceTools 10094-13
10 צרפתית 35  ס"מ פולי קטטרקולופלסט AA6110
Dietgel®  Clear H2O, Westbrook, ME76A
LabDiet Rodent Diet 5001Purina Mills (PMI®)5001
כלורהקסדין (היביטאן)Wyeth בריאות בעלי חיים, גואלף, אונטריוDIN 00245097
אטיפמזול הידרוכלוריד (אנטיסדאן)Orion PharmaDIN: 02237744

מקורות

  1. Krassioukov, A., Claydon, V. E. The clinical problems in cardiovascular control following spinal cord injury: an overview. Progress in brain research. 152, 223-229 (2006).
  2. Krassioukov, A. Autonomic function following cervical spinal cord injury. Respiratory physiology & neurobiology. 169, 157-164 (2009).
  3. Teasell, R. W., Arnold, J. M. O., Krassioukov, A., Delaney, G. A. Cardiovascular consequences of loss of supraspinal control of the sympathetic nervous system after spinal cord injury. Archives of physical medicine and rehabilitation. 81, 506-516 (2000).
  4. Alan, N., et al. Recurrent autonomic dysreflexia exacerbates vascular dysfunction after spinal cord injury. The Spine Journal. 10, 1108-1117 (2010).
  5. Eltorai, I., Kim, R., Vulpe, M., Kasravi, H., Ho, W. Fatal cerebral hemorrhage due to autonomic dysreflexia in a tetraplegic patient: case report and review. Spinal Cord. 30, 355-360 (1992).
  6. Pan, S. -L., et al. Intracerebral hemorrhage secondary to autonomic dysreflexia in a young person with incomplete C8 tetraplegia: A case report. Archives of physical medicine and rehabilitation. 86, 591-593 (2005).
  7. Ho, C., Krassioukov, A. Autonomic dysreflexia and myocardial ischemia. Spinal cord. 48, 714-715 (2010).
  8. Wan, D., Krassioukov, A. V. Life-threatening outcomes associated with autonomic dysreflexia: A clinical review. The journal of spinal cord medicine. 37, 2-10 (2014).
  9. Mathias, C. J., Frankel, H. Cardiovascular control in spinal man. Annual review of physiology. 50, 577-592 (1988).
  10. Hubli, M., Krassioukov, A. V. Ambulatory Blood Pressure Monitoring in Spinal Cord Injury: Clinical Practicability. Journal of neurotrauma. 31, 789-797 (2014).
  11. Liu, N., Fougere, R., Zhou, M., Nigro, M., Krassioukov, A. Autonomic dysreflexia severity during urodynamics and cystoscopy in individuals with spinal cord injury. Spinal cord. 51, 863-867 (2013).
  12. Phillips, A. A., Elliott, S. L., Zheng, M. M., Krassioukov, A. V. Selective alpha adrenergic antagonist reduces severity of transient hypertension during sexual stimulation after spinal cord injury. Journal of neurotrauma. , (2014).
  13. Maiorov, D. N., Fehlings, M. G., Weaver, L. C., Krassioukov, A. V. Relationship between severity of spinal cord injury and abnormalities in neurogenic cardiovascular control in conscious rats. Journal of neurotrauma. 15, 365-374 (1998).
  14. Maiorov, D. N., Weaver, L. C., Krassioukov, A. V. Relationship between sympathetic activity and arterial pressure in conscious spinal rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 41, H625(1997).
  15. Rabchevsky, A. G., et al. Effects of gabapentin on muscle spasticity and both induced as well as spontaneous autonomic dysreflexia after complete spinal cord injury. Frontiers in physiology. 3, (2012).
  16. Mayorov, D. N., Adams, M. A., Krassioukov, A. V. Telemetric blood pressure monitoring in conscious rats before and after compression injury of spinal cord. Journal of neurotrauma. 18, 727-736 (2001).
  17. Ramsey, J. B., et al. Care of rats with complete high-thoracic spinal cord injury. Journal of neurotrauma. 27, 1709-1722 (2010).
  18. Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. Journal of neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
  19. Krogh, K., Mosdal, C., Laurberg, S. Gastrointestinal and segmental colonic transit times in patients with acute and chronic spinal cord lesions. Spinal cord. 38, 615-621 (2000).
  20. Krassioukov, A. V., Johns, D. G., Schramm, L. P. Sensitivity of sympathetically correlated spinal interneurons, renal sympathetic nerve activity, and arterial pressure to somatic and visceral stimuli after chronic spinal injury. Journal of neurotrauma. 19, 1521-1529 (2002).
  21. Braga, V. A., Prabhakar, N. R. Refinement of telemetry for measuring blood pressure in conscious rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 48, 268(2009).
  22. Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

T3AD
פיתוח אלגוריתם לבצע מחקר מקיף על האוטונומית דיסרפלקסיה ב בעלי חיים עם פגיעה בחוט השדרה גבוהה שימוש בהתקן טלמטריה
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.