הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

דור של תנודות γ CA1 מקומיות על ידי גירוי Tetanic

8.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52877

⸱

14 באוגוסט 2015

 ,  , 
1The Florey Institute of Neuroscience and Mental Health, University of Melbourne

במאמר זה

סיכום

תנודות הן מאפייני רשת בסיסיים והם מווסתים על ידי מחלה ותרופות. לומד תנודות המוח פרוסה מאפשר אפיון של רשתות מבודדות בתנאים מבוקרים. פרוטוקולים ניתנים להכנת פרוסות מוח חריפות ללעורר תנודות γ CA1.

תקציר

תנודות רשת עצביות הן תכונות חשובות של פעילות מוח בבריאות ובמחלה ויכולות להיות מווסתת על ידי מגוון רחב של תרופות בשימוש קלינית. פרוטוקול מסופק ליצור מודל לחקר תנודות γ CA1 (20 - 80 הרץ). תנודות γ אלה הן יציבים לפחות 30 דק 'ותלויים בפעילות הסינפטית מעוררת ומעכבת בנוסף להפעלה של זרמי קוצב לב. יש תנודות מגורה Tetanically מספר המאפיינים לשחזור בקלות ובכימות כוללים ספירת ספייק, משך תנודה, חביון ותדירות שתדווחנה על מצב הרשת. היתרונות של תנודות גירוי חשמלי כוללים יציבות, שחזור ורכישת אפיזודי המאפשרים אפיון חזק של פונקצית רשת. מודל זה של תנודות γ CA1 יכול לשמש כדי לחקור מנגנונים תאיים ולחקור באופן שיטתי כיצד עצבי רשת פעילות משתנה במחלה ועל ידי תרופות.פרמקולוגיה מדינת מחלה ניתן לשלב בקלות על ידי השימוש בפרוסות מוח ממודלים של בעלי חיים מהונדסים גנטי או התערבותית כדי לאפשר בחירה של תרופות שמתמקדות מנגנוני מחלה.

מבוא

תנודות רשת המוח מתרחשות בתוך תחומי תדרים שונים שתואמים למדינות התנהגותיות. במכרסמים, תנודות בהיפוקמפוס θ (5 - 10 הרץ) הם נצפו בהתנהגויות גישוש 1,2, תוך תנודות γ - עמית (20 80 הרץ) עם תהליכים קוגניטיביים שונים, כוללים תפיסה ותשומת לב 3,4. פעילות רשת γ סינכרוני גם מעורבת בפתולוגיה של הפרעות כגון 5,6 אפילפסיה וסכיזופרניה. לדוגמא, תנודות γ הם חשבו מתאימות לאזורים של מוקדי אפילפסיה קליפת המוח 5,7,8 ויכולות לשמש כסמנים של pharmacosensitivity או התנגדות, שני תחומים חשובים של חקירה באפילפסיה מחקר 9.

פרוסת המוח בהיפוקמפוס היא מודל שכבר בשימוש נרחב כדי לחקור את פעילות רשת 10-12. פרוטוקולים שונים פותחו כדי ליצור תנודות γ בפרוסות מוח, כי בדרך כלל אניאפנון תרופתי nvolve כגון Mg 2 + הנמוך, 4-aminopyridine (4AP), bicuculline, וחומצת kainic 12-17. חסרונות של תנודות מופעלות פרמקולוגית הם שהם מתרחשים באופן אקראי לאחר יישום סמים ולא אמין שנוצרו או יציב לאורך זמן. חשמלי מופעל תנודות γ להתגבר רבות של בעיות אלה וגם יש את היתרון של להיות נעול באופן זמני לאירוע המעורר המאפשר הקלטה וניתוח אפיזודי. הנה פרוטוקול מתואר ליצירת תנודות γ CA1 ידי מתן גירוי tetanic לאוריין השכבה בפרוסה בהיפוקמפוס.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים על עכברים שאושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי החיים Florey המכון.

1. הגדרה לחיתוך פרוסות המוח

  1. הכן פתרון חיתוך המורכב מ( מ"מ) 125 כולין-Cl, 2.5 KCl, 0.4 CaCl 2, 6 MgCl 2, 1.25 לאא 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 20 D-גלוקוז רווי בגז carbogen (95% O 2 -5 (פתרון הקלטת aCSF)% CO 2) ונוזל השדרתי מלאכותי מורכב מ( מ"מ) 125 NaCl, 2.5 KCl, 2 CaCl 2, 2 MgCl 2, 1.25 לאא 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 10 D-גלוקוז, רווי ב carbogen. מניחים את פתרון החיתוך על קרח כדי לשמור אותו קר.
  2. להקפיא כ 400 מיליליטר של פתרון החיתוך ומתמזג עם פתרון של חיתוך יצאה מן ההקפאה 100 מיליליטר ליצור slurry קרח. בועה עם carbogen (95% CO 2 -5% O 2) בזרימה של כ 0.5 ליטר / דקה דרך ג הקטןצינורות aliber או זכוכית sintered לייצר זרם קבוע אך עדין של בועות.
  3. הכן כוס 250 מיליליטר עם הוספת רשת הניילון העלתה על שפרוסות המוח תוצבנה. מלא עם aCSF כדי לכסות את הרשת בכ 2 סנטימטר ובועה עם carbogen, להבטיח כי הבועות לא ישירות לשבש את אזור הפרוסה מחזיקה. כמו כן, חשוב שאין בועות אוויר ברשת הניילון, כך שאם כל נוכחים להסיר אותם. זה יהיה התא מחזיק ונשמר ב RT (20 - 25 מעלות צלזיוס).
  4. פריסת המכשירים לנתח כולל זוג מספריים גדול, מספריים קטנים, מריות מיקרו קטנות וגדולות, וזוגות גדולים והקטנים של מלקחיים ולצנן אותם על קרח. מניחים את גוש חיתוך רקמת vibratome על קרח בריבוע של רדיד אלומיניום. להשיג 2 חתיכות של 6 סנטימטר נייר מסנן, סכין גילוח קצה אחד, וכוס 25 מיליליטר מלא בתרחיף פתרון החיתוך גם כן.
  5. מלא מיכל שני עם קרח, ולהניח פיסת הרקמה פאפאה על הקרח ומניח את צלחת תרבות 12 סנטימטר על גבי. מלא את צלחת התרבות עם חיתוך קרח slurry פתרון ובועה עם carbogen. זה הוא המכל שבו נתיחת המוח עם להתבצע.
  6. הכן את vibratome. הסר סכין גילוח טרי פיפיות (להשתמש להב טרי בכל פעם) מהעטיפה ולרסס במים ולאחר מכן deionized 80% אתנול. חותך פיפטה העברה פלסטיק 3 מיליליטר בנקודה שבה מתחילה להתחדד. זה ישמש להעברת פרוסות מוח. בנד מחט G 27 בבסיס בכ -45 מעלות ולצרף למזרק 1 מיליליטר. זה ישמש כדי לתפעל פרוסות במהלך חיתוך.

2. חיתוך פרוסות המוח

  1. הרדימי עכבר (P16 - P18) עם 2% isoflurane או שיטה שאושרה באופן מקומי. בעקבות אינדוקציה, לערוף את החיה עם זוג מספריים גדול ושחרר את הראש לתוך צלחת תרבות 12 סנטימטרים המכילה תרחיף פתרון חיתוך בועות. התרחיף חייב לחלוטין לטבול את הראש לקירור מהיר.
  2. החזק את החזית של הראש עם יד אחת קילוף העור ורקמות חיבור קדימה לכיוון האף. בעזרת המספריים הקטנים לחתוך את רקמת החיבור לחשוף את הגולגולת הבסיסית. ואז להסיר את השרירים שמעל היבט גב של הגולגולת והצוואר.
  3. הסר את המוח מהגולגולת על ידי הבטחת הראשונה מול הגולגולת עם המלקחיים הגדולים ולאחר מכן לבצע שני חתכים לרוחב דרך העצם משני צדי הנקב הגדול באמצעות המספריים הקטנים (איור 1, קיצוצי שכותרת A1 ו- A2).
    1. הפוך קיצוץ נוסף בין העיניים (רק קדמית של גבחת) (איור 1, B שכותרתו לחתוך) אז לחתוך בזהירות לאורך תפר sagittal anteriorly ומשקפים את חלקי גולגולת חתך כדי לחשוף את המוח (איור 1, חתך C שכותרתו).
    2. השתמש במרית הקטנה כדי לגרוף את המוח ומקום על צלחת תרבות. להיות מודע לקראןעצבי ial בהיבט הנחות של המוח שצריכים לקטוע, זה יכול להיעשות באמצעות מרית מיקרו בגודל קטנה יותר. מרית גדולה יותר באמצעות העברת המוח לכוס 25 מיליליטר מלא בתרחיף פתרון חיתוך.
  4. הכנת האונה המוח לחיתוך.
    1. מניחים פיסת נייר מסנן 6 סנטימטר אחד בתחתית צלחת תרבות טרי אז למלא עם slurry פתרון חיתוך הטרי ובועה. השתמש במרית הגדולה יותר למצב את המוח, צד הגחון למטה, על נייר הסינון. קח סכין גילוח קצה סינגל חדש וניקה וחתך את המוח כדי להסיר את המוח הקטן, ואז לעשות חתך לאורך קו אמצע כדי להפריד את המוח לשתי אונות.
  5. הכנת בלוק רקמת vibratome.
    1. קח גוש רקמת vibratome המצונן, לייבש את פני השטח, ואת מקום טיפה של דבק cyanoacrylate באמצע ולהתפשט באופן שווה לגודל המשוער של המוח. השתמש במרית הקטנה כדי לתפעל אחדאונות מוח על מרית מיקרו הגדולה כל כך בצד המדיאלי של המוח הוא למטה.
    2. לגעת בקצה של המרית בממשק של המוח על פיסת נייר הסינון השנייה כדי להסיר כמה שיותר מהפתרון אפשרי. חלק את המוח מהמרית הגדולה יותר באמצעות המרית קטנה כדי להנחות אותו על הדבק.
    3. אבטח את לחסום חיתוך לתוך תא vibratome ולמלא את החדר עם slurry פתרון חיתוך ובועה, הבטחת המוח הוא שקוע לחלוטין. סובב את בלוק החיתוך כך הצד הגחוני של המוח מול הלהב.
  6. חותך את המוח.
    הערה: כל vibratome הוא ייחודי כל כך לעקוב אחר הוראות היצרן.
    1. הגדר את העובי הפרוסה עד 450 מיקרומטר, ולהבטיח את הלהב רוטט כמו שהוא עובר דרך המוח במהירות של כ 0.3 מ"מ / s. לחתוך לחלוטין דרך המוח מהצד הגחון אל פני השטח בקליפת המוח, זה יהיה לייצר פרוסות מוח כל sagittal שיכולים בדואר משמש לקלטות אלקטרו. פרוסות יופקו רוחבית למדיאלית ובדרך כלל 3 - ניתן לחתוך 4 פרוסות מכל חצי הכדור.
    2. אם הבסיס של מעליות הפרוסה להשתמש במחט G הכפופה 27 לעיתונות עדינה הפרוסה בחזרה למטה. ככל פרוסה היא לחתוך, להשתמש בפיפטה ההעברה כדי להעביר אותה אל הרציף בתא שבו הם מחזיק קיימא לעד 8 שעות.

3. הקלטות אלקטרופיזיולוגיה תאית

  1. הרכבה הפרוסה בחדר ההקלטה.
    1. באמצעות פיפטה ההעברה, למקם את פרוסת מוח לתא הקלטה שקועה perfused עם aCSF זורם 1 - 2 מיליליטר / דקה ומחומם ל- C ° 32. ACSF משמש להקלטות שונים מזו בתא מחזיק כריכוז Mg 2 + הוא עלה מ 2 מ"מ עד 4 מ"מ.
    2. אבטח את הפרוסה עם "נבל" (פלדת אל-חלד חצי עגולה עם גדילי ניילון נמתחו על פני 2 - מרווח של 3 מ"מ). מקוםהנבל, כך שהגדילים במקביל לCA1. להגדיל את המהירות של זלוף ל8 - 10 מיליליטר / דקה ב 32 מעלות צלזיוס.
  2. תחת מיקרוסקופ לנתח מקום האלקטרודה מגרה והאלקטרודה הקלטה (אלקטרודת זכוכית מלאה בפתרון הקלטת aCSF) על פני השטח של radiatum השכבה של CA1 (איור 2 א). מניחים את האלקטרודה מגרה ראשון ואז למקם את האלקטרודה ההקלטה.
  3. לעורר את שפר טחונות עם 120 - 150 מיקרו-אמפר משרעת ודופק 0.1 בדיקת משך msec ולבחון את צורת גל וכתוצאה משדה פוסט מעורר הסינפטי פוטנציאלי (fEPSP) כדי לקבוע בריאות פרוסה (איור 2). אלקטרודות המגרה והקלטה ייתכן שתהיינה הצורך עברו לפרוסה כ 50-100 מיקרומטר מפני השטח הפרוסה כדי לקבל fEPSP הקלטה עם מטח סיבים קטן ומשרעת גדולים. בטחונות שפר עוררו fEPSPs הן סטריאוטיפיים ולספק אינדיקציה טובה של בריאות פרוסה. Hפרוסות ealthy בדרך כלל להראות מטח סיבים לfEPSP יחס המשרעת של פחות מ -0.3.
  4. למקם מחדש את האלקטרודות.
    1. באמצעות מיקרוסקופ לנתח, להעביר את האלקטרודה מגרה לאמצע אוריין השכבה ולהעביר את האלקטרודה ההקלטה לשכבת תאי הפירמידה הקרובה לאלקטרודה ההקלטה ככל האפשר כפי שמוצג באיור 3 א. אלקטרודות המגרה והקלטה ייתכן שתהיינה הצורך דחפו לתוך הפרוסה כ 50-100 מיקרומטר כך שמשרעת תגובת fEPSP ל120 - דופק בדיקת מיקרו-אמפר 150 היא כ 1 mV.
  5. יצירת תנודות γ.
    1. כדי ליצור תנודות γ לעורר את הרקמה עם רכבת של 20 x 0.1 פולסים msec נמסרו ב 200 הרץ. גירוי tetanic זה יכול להניב תגובות לשחזור כאשר נמסרו כל 5 דקות.
  6. השתמש בפרמטרים הבאים ההקלטה.
    1. קנה מידה של הרווח של אות הפלט כדי להתאים את טווח מתח כניסה שלאנלוגי ממיר דיגיטלי ל. ודא שטיול אות מקסימאלי צפוי משתמש מינימום של 30% מטווח מתח כניסה. היזהר בעת קביעת רווחים גבוהים כאותות עשויים קליפ. רוחב הפס הטיפוסי הנדרש להקלטות שטח הוא הרץ 500 עם צימוד AC 0.1 הרץ להסיר להיסחף בסיס.
    2. עבר דיגיטציה לפחות 4-5 פעמים מהר יותר מאשר תדירות פינת מסנן המעביר הנמוך, כדי למנוע aliasing אות.
  7. ניתוח נתונים.
    1. נתונים לעבור סינון גבוה ב 5 הרץ כדי להסיר כל משמרות בסיס. לזהות קוצים באמצעות סף נגזר, עם מרחק מינימאלי של 10 אלפיות שנייה אירוע, זמן אירוע אופייני לשיא ומרווח נסיגה של 7 אלפיות, סף ~ 100 mV / msec, ועמק מפריד של 100%. לחשב השהיה כזמן שלוקח לספייק זוהה לראשונה להתרחש לאחר תום חפץ הגירוי. ניתוח זה מאפשר לאפיון של מספר הקוצים, חביון, מרווח בין אירוע, ומשך מחושב ככדלקמן:
    2. לחשב את מספר הקוצים כמספר הכולל של קוצים לתנודה עבור כל לטאטא נקבע.
    3. לחשב את זמן אחזור התנודה. לכל תנודה, להפחית את הזמן של ספייק זוהה לראשונה מסוף חפץ הגירוי.
    4. לחשב את הרווח הממוצע בין האירוע (ISI). לקבוע את פרק הזמן בין קוצים מזוהים מרובים וממוצע.
    5. חשב את משך התנודה. מדוד את הזמן בין ספייק זוהה הראשון והאחרון בכל תנודה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

גירוי Tetanic של אוריין השכבה שנוצר תנודות γ חזקות ושחזור (35.4 ± 2.2 הרץ), ראה איור 3. על מנת להוכיח כי התנודות נוצרו בתוך רשת CA1 המקומית התשומות מCA3 נותקו על ידי החיתוך הפרוסה באזור Ca 2 באמצעות מחט G 32 כפופה. מאפייני התנודה בפרוסות לחתוך לא היו שונים מהפרוסות חתוכות (p = 0.85; פרוסות לחתוך 6.16 ± 1.1 קוצים, n = 6; פרוסות חתוכות 5.89 ± 0.8 קוצים, n = 6), מצביעים על כך שהתנודות נוצרות באופן מקומי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

שיטה חזקה כדי ליצור תנודות γ CA1 בפרוסות מוח חריפות מתוארת. התנודות שנוצרו נובעות ממעגל מקומי מאפשר הזדמנות טובה יותר לשליטה והבנת בסיס neurophysiological של תנודות רשת 12. כל ערוצי 2 + קולטני AMPA, קולטני GABA, אני שעות ו- T-הסוג Ca נדרשים לתנודות γ במודל זה. בעוד תנודות CA1 המקומיות שתוארו כאן יכולות להיות שנוצרו חסונה זה תלוי בהבטחת שפרוסות המוח בריאה. שלב קריטי הוא ההסרה מהירה של המוח מהגולגולת, נזהרת שלא לחדור למוח בזמן ההסרה וטבילה אז מהירה ב...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

יש המחברים אין לחשוף.

תודות

נתמך על ידי APA ל-RJH, מענק תוכנית NHMRC 400121 ל-SP, ומלגת NMHRC 1005050 ל-SP. CAR מכיר בתמיכת ה-ARC (FT0990628) ותוכנית המלגות של DOWD. מכון פלורי למדעי המוח ובריאות הנפש נתמך על ידי קרנות תשתית של ממשלת מדינת ויקטוריה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
4-(N-Ethyl-N-phenylamino)-1,2- דימתיל-6-(מתיל-אמינו) פירימידיניום כלוריד (ZD7288)סיגמא-אולדריץ'Z3777
ביוקוליןסיגמא-אולדריץ'14340
6-ציאנו-7-ניטרוקווינוקסה-קו-2,3-דיון (CNQX)סיגמא-אולדריץ'C127
ניקלסיגמא-אולדריץ'266965
קרבמזפיןסיגמא-אולדריץ'C4024
(2R)-אמינו-5-פוספונופנטנו-אט (APV)Tocris Bioscience0105
RetigabineChemPacific150812-12-7
כולין-Clסיגמא-אולדריץ'C1879-5KG
KClסיגמא-אולדריץ'P9333-500G
NaH2PO4Sigma-AldrichS9638-250G
NaHCO3Sigma-AldrichS6297-250G
NaClSigma-AldrichS7653-5KG
גלוקוזסיגמא-אולדריץ'G8270-1KG
CaCl2 • 2H2OSigma-Aldrich223506-500G
MgCl2 & שור; 6H2OSigma-AldrichM2670-500G
אלקטרודהזכוכית מכשיר הרווארד GC150F-10
אלקטרודה מתכתית מגרה דו-קוטבית קונצנטרית FHCCBBPF75
מבודד דיגיטלימקבל מכשיריםדגם BJN8-9V1 
דגם 1800 ampמערכותAMGדגם 1800 ampliifier
DigitizerNational IntrumentsNI USB-6211
VibrotomeLeicaVT1200s

מקורות

  1. Buzsaki, G. Theta rhythm of navigation: link between path integration and landmark navigation, episodic and semantic memory. Hippocampus. 15 (7), 827-840 (2005).
  2. Vanderwolf, C. H. Hippocampal electrical activity and voluntary movement in the rat. Electroencephalogr. Clin. Neurophysiol. 26 (4), 407-418 (1969).
  3. Bartos, M., Vida, I., Jonas, P. Synaptic mechanisms of synchronized gamma oscillations in inhibitory interneuron networks. Nat. Rev. Neurosci. 8 (1), 45-56 (2007).
  4. Buzsáki, G., Wang, X. -J. Mechanisms of gamma oscillations. Annu. Rev. Neurosci. 35, 203-225 (2012).
  5. Kobayashi, K., et al. Cortical contribution to scalp EEG gamma rhythms associated with epileptic spasms. Brain Dev. 35 (8), 762-770 (2013).
  6. Andreou, C., et al. Increased Resting-State Gamma-Band Connectivity in First-Episode Schizophrenia. Schizophr Bull. , (2014).
  7. Alarcon, G., Binnie, C. D., Elwes, R. D., Polkey, C. E. Power spectrum and intracranial EEG patterns at seizure onset in partial epilepsy. Electroencephalogr. Clin. Neurophysiol. 94 (5), 326-337 (1995).
  8. Fisher, R. S., Webber, W. R., Lesser, R. P., Arroyo, S., Uematsu, S. High-frequency EEG activity at the start of seizures. J. Clin. Neurophysiol. 9 (3), 441-448 (1992).
  9. Kwan, P., Brodie, M. J. Early identification of refractory epilepsy. N. Engl. J. Med. 342 (5), 314-319 (2000).
  10. Traub, R. D., Kopell, N., Bibbig, A., Buhl, E. H., LeBeau, F. E., Whittington, M. A. Gap junctions between interneuron dendrites can enhance synchrony of gamma oscillations in distributed networks. J. Neurosci. 21 (23), 9478-9486 (2001).
  11. Traub, R. D., Whittington, M. A., Buhl, E. H., Jefferys, J. G., Faulkner, H. J. On the mechanism of the gamma --> beta frequency shift in neuronal oscillations induced in rat hippocampal slices by tetanic stimulation. J. Neurosci. 19 (3), 1088-1105 (1999).
  12. Whittington, M. A., Stanford, I. M., Colling, S. B., Jefferys, J. G., Traub, R. D. Spatiotemporal patterns of gamma frequency oscillations tetanically induced in the rat hippocampal slice. J. Physiol. 502 (3), 591-607 (1997).
  13. Avoli, M., Panuccio, G., Herrington, R., D’Antuono, M., de Guzman, P., Lévesque, M. Two different interictal spike patterns anticipate ictal activity in vitro. Neurobiol. Dis. 52, 168-176 (2013).
  14. Boido, D., Jesuthasan, N., de Curtis, M., Uva, L. Network Dynamics During the Progression of Seizure-Like Events in the Hippocampal-Parahippocampal Regions. Cereb Cortex. 24 (1), 162-173 (2014).
  15. Gloveli, T., Albrecht, D., Heinemann, U. Properties of low Mg2+ induced epileptiform activity in rat hippocampal and entorhinal cortex slices during adolescence. Brain Res. Dev. Brain Res. 87 (2), 145-152 (1995).
  16. McLeod, F., Ganley, R., Williams, L., Selfridge, J., Bird, A., Cobb, S. R. Reduced seizure threshold and altered network oscillatory properties in a mouse model of Rett syndrome. Neuroscience. 231, 195-205 (2013).
  17. Bracci, E., Vreugdenhil, M., Hack, S. P., Jefferys, J. G. On the synchronizing mechanisms of tetanically induced hippocampal oscillations. J. Neurosci. 19 (18), 8104-8113 (1999).
  18. Main, M. J., Cryan, J. E., Dupere, J. R., Cox, B., Clare, J. J., Burbidge, S. A. Modulation of KCNQ2/3 potassium channels by the novel anticonvulsant retigabine. Mol. Pharmacol. 58 (2), 253-262 (2000).
  19. Wickenden, A. D., Yu, W., Zou, A., Jegla, T., Wagoner, P. K. Retigabine, a novel anti-convulsant, enhances activation of KCNQ2/Q3 potassium channels. Mol. Pharmacol. 58 (3), 591-600 (2000).
  20. Otto, J. F., Kimball, M. M., Wilcox, K. S. Effects of the anticonvulsant retigabine on cultured cortical neurons: changes in electroresponsive properties and synaptic transmission. Mol. Pharmacol. 61 (4), 921-927 (2002).
  21. Pomper, J. K., Graulich, J., Kovacs, R., Hoffmann, U., Gabriel, S., Heinemann, U. High oxygen tension leads to acute cell death in organotypic hippocampal slice cultures. Brain Res. Dev. Brain Res. 126 (1), 109-116 (2001).
  22. Hatch, R. J., Reid, C. A., Petrou, S. Enhanced in vitro CA1 network activity in a sodium channel β1(C121W) subunit model of genetic epilepsy. Epilepsia. 55 (4), 601-608 (2014).
  23. Lord, L. -D., Expert, P., Huckins, J. F., Turkheimer, F. E. Cerebral energy metabolism and the brain/'s functional network architecture: an integrative review. J. Cereb. Blood Flow Metab. 33 (9), 1347-1354 (2013).
  24. Hájos, N., et al. Maintaining network activity in submerged hippocampal slices: importance of oxygen supply. Eur. J. Neurosci. 29 (2), 319-327 (2009).
  25. Hájos, N., Mody, I. Establishing a physiological environment for visualized in vitro brain slice recordings by increasing oxygen supply and modifying aCSF content. J. Neurosci. Methods. 183 (2), 107-113 (2009).
  26. Boido, D., Jesuthasan, N., de Curtis, M., Uva, L. Network Dynamics During the Progression of Seizure-Like Events in the Hippocampal-Parahippocampal Regions. Cereb Cortex. 24 (1), 163-173 (2012).
  27. Antuono, M., Köhling, R., Ricalzone, S., Gotman, J., Biagini, G., Avoli, M. Antiepileptic drugs abolish ictal but not interictal epileptiform discharges in vitro. Epilepsia. 51 (3), 423-431 (2010).
  28. Stenkamp, K., et al. Enhanced temporal stability of cholinergic hippocampal gamma oscillations following respiratory alkalosis in vitro. J. Neurophysiol. 85 (5), 2063-2069 (2001).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

CA1Stratum OriensStratum Pyramidale
דור של תנודות γ CA1 מקומיות על ידי גירוי Tetanic
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.