מאמר שיטה

דור של, Nanocomposites יחס Scalable מתכתי גבוהה היבט בביולוגי נוזלי בינוני

8.8K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52901

⸱

8 ביולי 2015

 ,  ,  ,  , 
1Biophysics Department, Centenary College of Louisiana, 2Department of Chemistry, Louisiana Tech University, 3Department of Integrative Physiology, University of North Texas Health Sciences Center, 4Biomedical Engineering, Louisiana Tech University, 5Institute for Micromanufacturing, Louisiana Tech University

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מציגים פרוטוקול לסנתז רומן, biocomposites יחס גבוה היבט בתנאים ביולוגיים ובתקשורת נוזלית. Biocomposites קנה מידה מננומטרים למיקרומטר בקוטר ואורך, בהתאמה. חלקיקי נחושת (CNPs) ונחושת גופרתית בשילוב עם ציסטין הם המרכיבים העיקריים לסינתזה.

תקציר

המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר את הסינתזה של שני biocomposites רומן עם מבני יחס גבוה היבט. Biocomposites מורכב מנחושת וציסטין, גם עם חלקיקי נחושת (CNPs) או נחושת גופרתית תורם הרכיב המתכתי. הסינתזה מתבצעת בנוזל בתנאים ביולוגיים (37 מעלות צלזיוס) וצורת מרוכבים עצמיים התאספו לאחר 24 שעות. ברגע שנוצר, חומרים מרוכבים אלה הם מאוד יציבים בשתי תקשורת הנוזלית ובצורה יבשה. חומרים מרוכבים בקנה מידה מננו למייקרו טווח אורך, ומכמה מיקרונים עד 25 ננומטר בקוטר. מיקרוסקופ אלקטרונים סורקים פליטת שדה עם ספקטרוסקופיה רנטגן נפיצה אנרגיה (EDX) הוכיח כי הגופרית הייתה נוכחת במבנים ליניארי נגזר-NP, בזמן שהוא נעדר מחומר CNP מתחיל, ובכך אישר ציסטין כמקור של גופרית בnanocomposites הסופי . במהלך סינתזה של ננו ומיקרו-חומרים מרוכבים ליניארי אלה, במגוון הרחב של אורכים של structures נוצר בכלי הסינתזה. Sonication של התערובת הנוזלית לאחר הסינתזה הודגם לסייע בשליטה בגודל ממוצע של המבנים על ידי צמצום האורך הממוצע עם זמן מוגבר של sonication. מאז המבנים נוצרו הם מאוד יציבים, לא מצבר, ונוצרים בשלב נוזלי, צנטריפוגה עשויה לשמש גם כדי לסייע בריכוז והפרדת חומרים מרוכבים נוצרו.

מבוא

נחושת היא מתכת ריאקטיבית מאוד שבעולם הביולוגי חיונית בתפקודי אנזימים מסוימים 1,2, אך בריכוזים גבוהים יותר היא רעילה בעוצמה כולל בצורה הננו-חלקיקית 3,4. החשש מהרעלת נחושת הפך רלוונטי יותר ככל שנעשה שימוש ב-CNPs וננו-חומרים אחרים מבוססי נחושת, בשל שטח הפנים/המסה המוגדלים של ננו-מבנים. לפיכך, אפילו מסה קטנה של נחושת, בצורת ננו-חלקיקים, עלולה לגרום לרעילות מקומית בשל יכולתה לחדור לתא ולהתפרק לצורות תגובתיות. מינים ביולוגיים מסוימים יכולים להרכיב יוני מתכת ולקלוט אותם, ואפילו לשלב אותם במבנים ביולוגיים כפי שתואר במולים ימיים 5. בחקר ההשפעות הרעילות הפוטנציאליות של ננו-חומרים 4, התגלה כי לאורך זמן, ובתנאים ביולוגיים המשמשים לתרבית תאים טיפוסית (37 מעלות צלזיוס ו-5% CO2), ביו-קומפוזיטים יציבים מנחושת יכולים להיווצר עם מבנה בעל יחס גובה-רוחב גבוה (ליניארי).

על ידי תהליך של חיסול, הגילוי הראשוני של ביו-קומפוזיטים ליניאריים אלה, שהתרחש במדיה שלמה של תרבית תאים, פושט לפרוטוקול מוגדר של אלמנטים חיוניים הדרושים להרכבה עצמית של הביו-קומפוזיטים. הרכבה עצמית של שני סוגים של ביו-קומפוזיטים ליניאריים מאוד התגלתה כאפשרית עם שני רכיבי מתכת התחלתיים: 1) CNPs ו-2) נחושת גופרתית, כאשר המרכיב הביולוגי הנפוץ הוא ציסטין. למרות שדווח בעבר על מבנים המכילים נחושת מסוג "קיפוד" ו"ננו-פרחים" עם תכונות ננומטריות ומיקרו-מורכבות יותר, אלה יוצרו בתנאים לא ביולוגיים, כגון טמפרטורות של 100 מעלות צלזיוס או יותר 6-8. למיטב ידיעתנו, סינתזה של ננו-מבנים בודדים המכילים נחושת ליניארית הניתנים להרחבה בשלב נוזלי בתנאים ביולוגיים לא תוארה בעבר.

אחד מחומרי המוצא המשמשים לסינתזה של ננו-קומפוזיטים, כלומר CNPs, דווח בעבר כרעיל מאוד לתאים 4. לאחרונה דווח כי לאחר היווצרות הננו-מרוכבים, מבנים אלה פחות רעילים על בסיס מסה מאשר ה-NPs ההתחלתיים 9. לפיכך, הסינתזה המתוארת כאן עשויה להיגזר מתגובה ביולוגית וביוכימית שיש לה תועלת בייצוב מיני נחושת תגובתיים, הן במובן של הפיכת צורת NP למבנים גדולים יותר והן בייצור חומרים מרוכבים פחות רעילים לתאים.

בניגוד לצורות ננו-חומרים רבות אחרות הידועות כמצטברות או מתגבשות באינטראקציה עם מדיה נוזלית ביולוגית 10,11, לאחר שנוצרו, החומרים המרוכבים הליניאריים ביותר המתוארים כאן נמנעים מצבירה, אולי בגלל חלוקה מחדש של מטען שדווח בעבר 9. כפי שמפורט בעבודה הנוכחית, הימנעות זו מצבירה נוחה למטרות עבודה עם המבנים שנוצרו משלוש סיבות לפחות: 1) מבנים מרוכבים לאחר שנוצרו עשויים להיות מרוכזים באמצעות צנטריפוגה ולאחר מכן להתפזר בקלות שוב באמצעות ערבוב מערבולת; 2) ניתן להקטין מבנים שנוצרו בגודל הממוצע על ידי סוניקציה לפרקי זמן שונים; ו-3) המבנים הליניאריים שנוצרו עשויים לספק כלי נוסף להימנעות מ"אפקט טבעת הקפה" שתואר לאחרונה 12 ובכך לספק אמצעי ליצירת ציפויים מפוזרים באופן שווה יותר של חומרים, במיוחד אלה המכילים חלקיקים כדוריים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. תכנון של ניסויים

  1. לקבוע את עוצמת הקול של nanocomposites הנחושת נחוץ לסינתזה. על בסיס זה, לבחור מספר צלוחיות הקטנות נפח (25 סנטימטר 2), או צלוחיות גדולות יותר כמפורט להלן בהכנת חומרים.
  2. לסינתזה זו, השתמש 37 ° C חממה עם 5% CO 2 ולפחות 40% לחות. ודא שחממה כזה יהיה זמינה ושזה לא יפריע שוב ושוב על פני תקופה של סינתזה (כ 24 שעות).
    זהירות: פתיחה חוזרת וסגירה של החממה תהיה בהחלט לגרום לתנודות טמפרטורה שעלולה לגרום לסינתזת שינה של מבני nanocomposite.

2. הכנת חומרים

  1. הכן את כל החומרים טריים לפני תחילת ניסוי, על ידי הוספת חומרים מוצקים לממסים ממש לפני הסינתזה היא להתחיל. שמירה על פתרונות מניות של חומרי ציסטין והתחלת נחושת בנוזל לפעמים ב ארוכהefore הניסוי אינו מומלץ ועלולים להוביל לתוצאות משתנים. פתח פעם אחת מהספק, ממשיך מתחיל חומרים יבשים על ידי עטיפה העליונה של המכל עם Parafilm.
    הערה: הפרוטוקול הבא משמש כדוגמא לתגובה בבקבוק תרבות 2 תא 25 סנטימטר באמצעות 7 μl של ציסטין, 6,643 μl של מים סטריליים, ו -350 μl של CNPs.
  2. הכן פתרון 2 מ"ג / מיליליטר של חלקיקי נחושת על ידי שקילה החוצה לפחות 2 מ"ג של CNPs. ללבוש כפפות חד פעמיות בשלב זה כדי למנוע מגע אפשרי של CNPs עם עור. מניחים את חלקיקים בבקבוקון זכוכית ריק מיליליטר 16 סטרילי.
    1. לבקבוקון המכיל CNPs, להוסיף מים ללא יונים סטרילי בנפח המתאים לעשות 2 מ"ג / מיליליטר פתרון ומערבולת הפתרון במשך 20 שניות כדי לספק פיזור של חלקיקים לפני תחילת סינתזה (נפח כולל לפחות 1 מיליליטר מומלץ). אין למלא יותר ממחצית דרך הבקבוקון עם מים כמו זה לעכב ערבוב על ידי vortexing. Wil CNPsl להתיישב במהירות לתחתית של הבקבוקון ויופיע בצבע כהה (אפור לשחור).
    2. Sonicate פתרון CNP במשך 17 דקות ב RT לספק פיזור מקסימאלי של CNPs לפני תחילת הסינתזה. מעת לעת לבדוק כדי לוודא שCNPs ערבוב בשל sonication. לאחר sonication מוצלח, CNPs להישאר תלוי בפתרון לפחות 30 דק 'והפתרון יהיה כהה בצבע.
  3. לשקול את מסה מספקת של ציסטין לעשות פתרון / מיליליטר 72.9 מ"ג לסינתזה. מאז ציסטין הוא לא ישירות מסיס במים, הנח את ציסטין שקל בכלי במשקל אנטי-סטטית.
    1. לציסטין כלי במשקל המכיל, להוסיף נפח מספיק של סטרילי, 1 M NaOH, כך שציסטין מתמוסס לחלוטין. לדוגמא, לפזר 7.29 מ"ג של ציסטין לחלוטין בשל 1 M NaOH 100 μl, כדי להפוך את פתרון 72.9 מ"ג / מיליליטר.
    2. כדי לשמור על תנאים סטריליים, לבצע צעד זה במנדף תרבות זרימת רקמות סטריליים.
      זהירות: NaOHבריכוז 1 M הוא קאוסטית, כך ללבוש כפפות חד פעמיות בשלב זה כדי למנוע מגע של NaOH המרוכז עם עור
  4. העבודה בברדס רקמת סטרילית תרבות, להוסיף 7 μl של ציסטין עם 6,643 μl של מים סטריליים לבקבוק סטרילי הסינתזה הראשונה, ולתת דגירה במשך 30 דקות בחממה על 37 מעלות צלזיוס עם כובע הבקבוק פרק (רופף) כדי לספק יעיל ערבוב. Resuspend 2 מ"ג / מיליליטר פתרון CNP ידי vortexing למשך 30 שניות, מאז CNPs יהיה התיישב אחרי צעד sonication.
    1. להוסיף פתרון CNP מספיק כדי בקבוק הסינתזה (באמצעות טכניקה סטרילית) כדי לשמור על יחסי הרכיב הבאים: לשלב ציסטין 1 חלקים, 50 חלקים CNPs, וחלקי 949 מים סטריליים בבקבוק תרבות 2 תא 25 סנטימטר להתחיל הסינתזה. לדוגמא, עבור 7 מיליליטר סינתזת נפח, לשלב 7 μl של פתרון מניות ציסטין, 350 μl של CNPs, ו6,643 μl של מים סטריליים. החלף את הכובע על הבקבוק ולהדק כך שזה securדואר.
    2. לאחר שילוב כל הרכיבים לסינתזה, לערבב בעדינות בבקבוק על ידי מתערבל 4-5 פעמים. הנח בקבוק בחממת CO 2 ולפרוק את הבקבוק על ידי שחרור הכובע כדי שיהיה חילוף גזים ובמתוך הבקבוק במהלך סינתזה.
  5. לאפשר סינתזה לרוץ בחממה במשך כ 24 שעות. במהלך סינתזה, ניתן לראות, עם מיקרוסקופ ועל ידי עין, היווצרות של חומרים מרוכבים ליניארי מאוד.
    הערה: תהליך ההיווצרות של המבנים עלול לקרות פתאום במובן זה שהם מבנים בתחילה קשה לזהות, אז ההופעה ממשיכה במהירות להגדלת צפיפות. היווצרות לכן עשויה להתרחש לפני 24 שעות. התהליך יכול גם להיות שנצפה על ידי העין פעם המבנים הפכו גדולים יותר והעלייה בצפיפות שלהם. בעוד דור של המבנים ניתן לראות לאורך זמן מתחת למיקרוסקופ ולפי העין בנקודות זמן מאוחר יותר, ברציפות להפריע תנאי הסינתזה וטמפרטורה תוביל לענייםתוצאות סינתזה.
  6. לסיים סינתזה של biocomposites ידי חוזקה מכסת בקבוק הסינתזה ואחסון הכלי במקרר (4 מעלות צלזיוס). המבנים, שנוצרו פעם אחת, יישארו יציבים בצורה זו לשנה לפחות. תווית הבקבוק עם תנאי סינתזה, כוללים רכיבים מנוצלים, תאריך של הסינתזה, וזמן דגירה של הסינתזה לפני הסיום.

3. סינתזה באמצעות נחושת גופרתית

  1. לבצע סינתזת הרכבה עצמית על ידי החלפת CNPs עם מלח נחושת גופרתי. באמצעות טכניקה סטרילית, לפזר לפחות 2 מ"ג של נחושת גופרתית בנפח מספק של מים ללא יונים סטרילי כדי להפוך את פתרון 2 מ"ג / מיליליטר. גבישי נחושת גופרתי בקלות ללכת לפתרון בריכוז זה, אבל מערבולת הבקבוקון במידת צורך, ולבדוק על ידי העין על מנת להבטיח את כל הגבישים מתמוססים.
  2. לאחר ההכנה של הנחושת גופרתית, לבצע סינתזה כפי שתואר לעיל, אך החלפת CNPs עם הנחושת גופרתית.
    הערה: nanocomposites התאסף עצמי באמצעות נחושת גופרתית כחומר מוצא נמצאו להיות הרבה יותר עקבי בצורה סופית מאשר למבנים מסונתזים מCNPs.
  3. לסיים את הסינתזה של biocomposites נחושת גופרתי כלרוכבי CNP (שלב 2.6) ולאחסן אותם לטווח ארוך על 4 מעלות צלזיוס.

4. אפיון וטיפול בbiocomposites פוסט-סינתזה

  1. לאפיין biocomposites נגזר מCNPs ומנחושת גופרתית על ידי מיקרוסקופ אור הלבנה 9 ועל ידי מיקרוסקופי אלקטרונים 9.
    1. לאפיון ובדיקה של biocomposites פוסט-סינתזה ידי מיקרוסקופ אור הלבנה, להשתמש מיקרוסקופ הפוכה כחומרים מרוכבים יישבו למשטח התחתון של הבקבוק תוך כמה של הנחת הבקבוק שטוח דקות, ולאחר מכן ניתן הביא אל מוקד. השתמש בהגדרת השדה בהירה במיקרוסקופ כדי למקסם את הניגוד בין biocomposites והמדיום הנוזלי. חומרים מרוכבים הנגזרים מCNPs ושוטרלסולפט שניהם מופיעים ברורים לאטום בצבע, אבל אגרגטים CNP unreacted יופיעו כהים מאוד בצבע.
      1. השתמש במצלמה דיגיטלית המחוברת למיקרוסקופ כדי ללכוד תמונות של חומרים מרוכבים. מגוון של אורכים למבנים הבודדים יקויימו.
    2. לאפיון ובדיקה של biocomposites הודעה סינתזה ולאחר האחסון ב 4 ° C, לאפשר צלוחיות להגיע לRT לפחות 15 דק 'כצלוחיות יהוו עיבוי תחילה על ההסרה ממקרר, שלטשטש יעיל תוך התמקדות בעת ביצוע הדמיה מיקרוסקופית. לאחר מאפשר איזון לRT, לנגב את המשטחים העליונים ותחתונים של הבקבוק עם מגבת נייר נקייה על מנת למקסם את איכות הדמיה מיקרוסקופית.
    3. כאשר עובדים עם או הדמיה מרוכבים שאוחסנו לטווח ארוך, מערבולת הבקבוק למשך 30 שניות כדי לנתק גושים של חומרים מרוכבים היוצרים בזמן במקרר. לאחר vortexing, לבדוק את המבנים עם מיקרופון הפוךroscope כדי להבטיח שאגרגטים שניתקו, וחזור vortexing צורך.
    4. השתמש במיקרוסקופ אור הלבנה הפוכה כדי להעריך את היעילות של הסינתזה לניסוי נתון באמצעות CNPs. לדוגמא, לתעד את הנוכחות או עדר של CNPs unreacted בצלוחיות סינתזה המשמשות לbiocomposites נגזר CNP מצלוחיות עם פרמטרים שונים כגון זמן של סינתזה.
      הערה: פרט CNPs הם קטנים מדי כדי לצפות במיקרוסקופ אור, אבל CNP unreacted צובר יופיע כעגולה צורה וחפצים כהים, בניגוד לCNP-מרוכבים מסונתזים בהצלחה שיש יחס גבוה היבט, טופס ליניארי, ו יהיה מגוון של אורכים שונים. להתחמק מביצוע סינתזה במשך זמן רב מדי של זמן לפני הסיום, כמו זה יגרום מסועף מאוד מבנים מסוג "קיפודים", שהם קשים לפיזור למבנים בודדים יצרו פעם.
    5. השתמש במיקרוסקופ אור הלבן הפוכה להעריך את היעילותשל הסינתזה לניסוי נתון באמצעות נחושת גופרתית. מאז נחושת גופרתית הולך באופן מלא לפתרון באמצעות פרוטוקול זה, הפתרון יופיע פחות כהה מאשר הפתרון מסינתזה באמצעות CNPs. לתעד את הגודל ומידה של חומרים מרוכבים נחושת גופרתית על ידי השוואת צלוחיות עם תנאי סינתזה שונים כגון זמן של סינתזה לפני הסיום.
      הערה: חומרים מרוכבים מסונתזים בהצלחה יציגו מגוון של אורכים שונים. להתחמק מביצוע סינתזה במשך זמן רב מדי של זמן לפני הסיום, כמו זה יגרום באגרגטים מסועפים מאוד של חומרים מרוכבים, שחלקם יהיו "כמו קיפודים-" במבנה, ואשר קשים לפיזור למבנים בודדים שנוצרו ברגע ש .
  2. להתרכז biocomposites הודעה סינתזה-, פתרונות צנטריפוגות של חומרים מרוכבים בצינור צנטריפוגות. הוסף 6 מיליליטר של או מבנים נגזר CNP או מבנים הנגזרים נחושת גופרתית לצינור צנטריפוגות 15 מיליליטר. צנטריפוגה למשך 10 דקותב XG 500 ב RT לצורה כדורית. עבור אמצעי אחסון קטן יותר, להוסיף 500 μl של מבנים בפתרון 0.6 מיליליטר צינורות בגודל. צנטריפוגה XG ב 2000 ב RT לפחות 10 דקות כדי ליצור גלולה.
    1. לאחר צנטריפוגה למספיק זמן (לפחות 10 דקות לmicrofuges), להציל את הכדור לצפייה בחלק התחתון של הצינור שבו המבנים מרוכזים על ידי הסרת נוזל supernatant מעל גלולה בזהירות. מבני biocomposite נגזרים מנחושת גופרתית מופיעים בצבע כחול ומבנים הנגזרים מCNPs כהים (אפורים לשחור).
    2. הוסף עוד חומרים מרוכבים לצינור זה ולחזור על התהליך באותו הצינור להתרכז מבנים אם תרצה בכך. כדי לפזר את כדורים מרוכזים, להוסיף נפח הרצוי של פתרון לצינור, ומערבולת למשך 10-30 שניות.
  3. מבני Sonicate יצרו פעם אחת, כדי להעביר את הגודל הממוצע אוכלוסייה (אורכים) של המבנים להורדת ערכים. מבני מקום במים סטריליים deionized וsonicate בleAST 10 דקות. באמצעות תהליך זה, לאורך זמן, המבנים הופכים למפוצלים וקטנים יותר באורך ממוצע (ראה איור 6 של הטקסט). שינויים במסמך בגדלים מורכבים עם פעמים sonication שונות באמצעות מיקרוסקופ הפוכה אור לבנה ומצלמה דיגיטלית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

איור 1 מציג תרשים זרימה סכמטי של הצעדים כדי ליצור סינתזת biocomposites יניארי המתואר בעבודה זו. CNPs או נחושת גופרתית כמתחיל חומרים בשילוב עם מים סטריליים כדי ליצור פתרון 2 מ"ג / מיליליטר, פתרון זה הוא מעורב וsonicated לספק אפילו תערובת, ופתרון נחושת זה הוא מעורב אז ביחס הבא לסינתזה: 949 חלקים סטרילי מים: 50 חלקים תערובת נחושת: פתרון מניות ציסטין חלק 1. הכרכים בפועל עשויים להיות מוגברים או מופחתים בהתאם ליחסים אלו בהיקף של עד או להקטין את תשואת הסינתזה הסופית...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

תוך הערכת השפעות רעילות פוטנציאליות של ננו כולל CNPs, זה היה ציין כי בטווח הארוך, CNPs הפכו מהפצת חלקיקים בתחילה יותר מפוזרת לצורה גדולה יותר, מצטברת (איור 2). במקרים מסוימים, תצורות מצטברות מאוד אלה שיוצרו בצלחת תרבית תאים, בתנאים ביולוגיים, יצרו תחזיות ליניארי ביותר מהצבירה המרכזית, מזכירות נחושת שתוארה קודם לכן מכילות "הקיפודים" 6. יש לציין כי בתנאים שמוצגים כאן, הריכוז של CNPs הוסיף לתאים היה תת-מרבית, ובכך שלא הרג את כל התאים בתרבות (ראה ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

לסופרים אין מה לחשוף.

תודות

המחברים מבקשים להודות לסיוע הטכני של אלפרד גונסקארן במחקרי מיקרוסקופיה אלקטרונית במכון למיקרו-ייצור באוניברסיטה הטכנולוגית של לואיזיאנה, ולד"ר ג'ים מקנמרה על הסיוע במחקרי מיקרוסקופיה נוספים. העבודה המתוארת נתמכה בחלקה על ידי מועצת העוצרים של לואיזיאנה PKSFI חוזה מס. LEQSF (2007-12)-ENH-PKSFI-PRS-04 ופרופסור ג'יימס א. וויצ'ה השלישי מאוניברסיטת לואיזיאנה טק (לדוקטורט).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מיני וורטקסרVWR (https://us.vwr.com)58816-121
CO2 חממה דגם # 2425-2VWR (https://us.vwr.com)צור קשר עם הספקדגם נוכחי calalog # 98000-360
צנטריפוגה אפנדורף (מיקרוצנטריפוגה מקוררת)Labnet (http://labnetinternational.com/)C2500-Rדגם פריזמה R
צנטריפוגה תרבית תאים דגם Z323KLabnet (http://labnetinternational.com/)צור קשר עם הספקדגם נוכחי Z206A קטלוג # C0206-A
Sonicator (מנקה קולי)Branson Ultrasonics Corporation (http://www.bransonic.com/)1510R-MTH
BalanceSartorius (http://dataweigh.com)דגם CP225D דגם דומה CPA225D
Olympus IX51 Inverted Light MicroscopeOlympus ( http://olympusamerica.comצור קשר עם הספק
אולימפוס DP71 מיקרוסקופ מצלמה דיגיטליתאולימפוס (http://olympusamerica.comצור קשר עם הספק
יחידת אספקת חשמל חיצונית - אור לבן למיקרוסקופ אולימפוסאולימפוס (http://olympusamerica.comTH4-100
10X, 20X, ו-40X מטרות מיקרוסקופאולימפוס (http://olympusamerica.comצור קשר עם הספק
סריקת מיקרוסקופ אלקטרוניםהיטאצ'י (http://hitachi-hitec.com/global/em/sem/sem_index.html)דגם S-4800
מיקרוסקופ אלקטרונים שידורZeiss (http://zeiss.com/microscopy/en_de/products.html)דגם Libra 120
שולחן תחנת עבודה זרימה חד כיוונית ספסל נקיEnvirco (http://envirco-hvac.com)דגם PNG62675משמש לתרבית תאים סטרילית טכניקה

מקורות

  1. Klinman, J. P. The copper-enzyme family of dopamine beta-monooxygenase and peptidylglycine alpha-hydroxylating monooxygenase: resolving the chemical pathway for substrate hydroxylation. The Journal of biological chemistry. 281, 3013-3016 (2006).
  2. Uauy, R., Olivares, M., Gonzalez, M. Essentiality of copper in humans. The American journal of clinical nutrition. 67, 952S-959S (1998).
  3. Karlsson, H. L., Cronholm, P., Gustafsson, J., Copper Moller, L. oxide nanoparticles are highly toxic: a comparison between metal oxide nanoparticles and carbon nanotubes. Chemical research in toxicology. 21, 1726-1732 (2008).
  4. Parekh, G., et al. Layer-by-layer nanoencapsulation of camptothecin with improved activity. International journal of pharmaceutics. 465, 218-227 (2014).
  5. Harrington, M. J., Masic, A., Holten-Andersen, N., Waite, J. H., Fratzl, P. Iron-clad fibers: a metal-based biological strategy for hard flexible coatings. Science. 328, 216-220 (2010).
  6. Keyson, D., et al. CuO urchin-nanostructures synthesized from a domestic hydrothermal microwave method. Materials Research Bulletin. 43, 771-775 (2008).
  7. Liu, B., Zeng, H. C. Mesoscale organization of CuO nanoribbons: formation of 'dandelions'. J Am Chem Soc. 126, 8124-8125 (2004).
  8. Peng, M., et al. Controllable synthesis of self-assembled Cu2S nanostructures through a template-free polyol process for the degradation of organic pollutant under visible light. Materials Research Bulletin. 44, 1834-1841 (2009).
  9. Deodhar, S., Huckaby, J., Delahoussaye, M., DeCoster, M. A. High-Aspect Ratio Bio-Metallic Nanocomposites for Cellular Interactions. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. 64, 012014(2014).
  10. Montes-Burgos, I., et al. Characterisation of nanoparticle size and state prior to nanotoxicological studies. Journal of Nanoparticle Research. 12, 47-53 (2010).
  11. Wiogo, H. T., Lim, M., Bulmus, V., Yun, J., Amal, R. Stabilization of magnetic iron oxide nanoparticles in biological media by fetal bovine serum (FBS). Langmuir. 27, 843-850 (2011).
  12. Yunker, P. J., Still, T., Lohr, M. A., Yodh, A. G. Suppression of the coffee-ring effect by shape-dependent capillary interactions. Nature. 476, 308-311 (2011).
  13. Kahler, H., Lloyd Jr, B., Eden, M. Electron Microscopic and Other Studies on a Copper–Cystine Complex. The Journal of Physical Chemistry. 56, 768-770 (1952).
  14. Furia, E., Sindona, G. Complexation of L-cystine with metal cations. Journal of Chemical & Engineering Data. 55, 2985-2989 (2010).
  15. Hawkins, C., Perrin, D. Polynuclear Complex Formation. II. Copper (II) with Cystine and Related Ligands. Inorganic Chemistry. 2, 843-849 (1963).
  16. Hallman, P., Perrin, D., Watt, A. E. The computed distribution of copper (II) and zinc (II) ions among seventeen amino acids present in human blood plasma. Biochem. J. 121, 549-555 (1971).
  17. Jensen, L. S., Maurice, D. V. Influence of sulfur amino acids on copper toxicity in chicks. The Journal of nutrition. 109, 91-97 (1979).
  18. Lee, Y., Choi, J. R., Lee, K. J., Stott, N. E., Kim, D. Large-scale synthesis of copper nanoparticles by chemically controlled reduction for applications of inkjet-printed electronics. Nanotechnology. 19, 415604(2008).
  19. Hume, J., et al. Engineered coiled-coil protein microfibers. Biomacromolecules. 15, 3503-3510 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

compositecomposite ScalableSEMX EDX

מאמרים קשורים